卢雁
- 作品数:6 被引量:41H指数:4
- 供职机构:国家乳制品质量监督检验中心更多>>
- 相关领域:轻工技术与工程医药卫生生物学更多>>
- 婴儿配方奶粉中条件致病菌的检出及检测方法的建立被引量:4
- 2010年
- 通过对市售婴儿配方奶粉中条件致病菌的筛查,检测出婴儿配方奶粉中不同程度地污染了阪崎肠杆菌、肺炎克雷伯氏菌和产酸克雷伯氏菌,检测样本50份,这三种菌的污染几率分别为8%、8%、12%。所建立的检测方法分别为传统方法的分离鉴定和荧光定量PCR法。
- 王宇卢雁
- 关键词:婴儿配方奶粉阪崎肠杆菌克雷伯氏菌荧光定量PCR
- 婴儿配方粉中克雷伯氏菌的检出及污染情况被引量:3
- 2011年
- 对婴儿配方粉中肠杆菌科细菌进行筛查,检出婴儿配方粉中污染了肺炎克雷伯氏菌和产酸克雷伯氏菌,检测样本241份,污染几率分别为5.0%和2.5%。所采用的检验方法为VRBGA结合MIAC进行分离,采用API20E和VITEC2进行生化鉴定。
- 卢雁王瑶于宁王淼房玉国王旻
- 关键词:婴幼儿配方粉肺炎克雷伯氏菌
- 婴儿配方粉中阪崎肠杆菌荧光定量PCR检测方法的建立被引量:3
- 2008年
- 建立奶粉中阪崎肠杆菌荧光定量PCR检测方法,为准确、快速地定量检测阪崎肠杆菌奠定基础。根据阪崎肠杆菌16S rDNA基因序列,设计特异引物和荧光标记探针并合成,用PCR扩增产物克隆的重组质粒作为阳性对照,经紫外分光光度计测定重组质粒浓度,梯度稀释后作为标准品绘制标准曲线,其Ct值与模板浓度有良好的线形关系,相关系数R2值为:0.997,可以用于阪崎肠杆菌浓度鉴定。用该方法检测阪崎肠杆菌样品21份,阳性4份,阳性检出率为19%,与常规检测方法结果完全符合。本文建立的检测阪崎肠杆菌的荧光定量PCR方法,较常规技术更为简便、快速,有很好的应用前景和研究价值。
- 卢雁王淼房玉国王旻王宇赵长利
- 关键词:阪崎肠杆菌荧光定量阈值
- 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术对阪崎克罗诺杆菌的鉴定及溯源被引量:9
- 2018年
- 目的研究不同样品前处理方法对VITEK~?基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(VITEK~?MALDI-TOF MS,以下简称VITEK MS)鉴定阪崎克罗诺杆菌的影响及该方法对阪崎克罗诺杆菌的分型溯源能力,研究VITEK MS与MALDI 7090^(TM)MALDI-TOF/TOF MS(以下简称MALDI 7090)所得图谱的异同。方法选取3种不同样品前处理方法处理18株阪崎克罗诺杆菌野生菌株、2株阪崎克罗诺杆菌标准菌株和2株非阪崎克罗诺杆菌标准菌株,比较VITEK MS鉴定结果与传统鉴定结果的一致性;通过VITEK MS的鉴定结果和图谱的比对,研究不同样品前处理方法对阪崎克罗诺杆菌鉴定的影响;利用VITEK MS质谱图特征峰的聚类分析,对20株阪崎克罗诺杆菌进行溯源研究;同时比较VITEK MS与MALDI 7090所得图谱,研究两者的异同。结果 20株试验菌株的VITEK MS鉴定结果均为阪崎克罗诺杆菌,与传统的鉴定结果一致,并与2株非阪崎克罗诺杆菌标准菌株能明显地区分;3种不同样品前处理方法得到的鉴定谱图与标准谱图比对获得的鉴定结果可信度之间差异无统计学意义(P>0.05),但质谱图中质谱峰数量和相对峰强度有明显差异,其中甲酸提取法在2 000~15 000 m/z范围内,相对峰强度>5 m V的质谱峰数量达15个以上。在相似水平为80%的条件下,VITEK MS的聚类分析将甲酸提取法的20株阪崎克罗诺杆菌分为5个群,通过聚类分析及菌株来源能够推测阪崎克罗诺杆菌传播途径。VITEK MS和MALDI 7090得到的谱图,两者特征峰的出峰位置与相对峰强度无明显差异。结论 MALDI-TOF MS技术可以准确鉴定阪崎克罗诺杆菌;甲酸提取法更适用于阪崎克罗诺杆菌的MALDI-TOF MS鉴定;MALDI-TOF MS技术对阪崎克罗诺杆菌的溯源研究具有重要价值;VITEK MS与MALDI 7090所得谱图无明显差异。
- 王伟赵红阳卢雁王鸣雨孙英健宋娇娇张顺合卢行安
- 关键词:基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱样品前处理聚类分析食源性致病菌
- 提高食品中阪崎肠杆菌的阳性检出率被引量:10
- 2006年
- 阪崎肠杆菌对食品的污染具有微量和高度不均一性的特点,使得该菌能“逃避”食品卫生微生物学的检验。以国内生产的婴儿配方乳粉为样品,采用荧光定量PCR法和分离计数法分别进行检验,对影响检出率的主要因素进行比较和讨论。结果表明,样品中的阪崎肠杆菌分离株主要有6种生化型,X-α-GlcA琼脂的选择分离效果优于其它培养基,荧光定量PCR法有一定的假阳性率,同一批次样品不同包装间的个体差异较大,而且在同一样品中,常常会同时检出阪崎肠杆菌的不同的生化型或亚种,要挑取足够多的菌落用于生化鉴定。
- 房玉国卢雁王淼王旻王宇赵长利
- 关键词:阪崎肠杆菌婴儿配方乳粉阳性检出率生化鉴定
- 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱对阪崎肠杆菌的鉴定被引量:12
- 2013年
- 目的利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)法对阪崎肠杆菌进行鉴定,建立一种高效检测阪崎肠杆菌的方法,并为该技术的推广使用及阪崎肠杆菌的进一步研究提供科学依据。方法用MALDI-TOF-MS法检测38株野生阪崎肠杆菌、2株标准菌株和1株阴沟肠杆菌,结果与常规生化鉴定结果对比;同时对在不同培养基上培养的阪崎肠杆菌进行质谱分析比较,对比不同培养基对质谱结果是否有影响;对38株野生菌株质谱图进行聚类分析。结果 38株菌株鉴定结果均为阪崎肠杆菌,与生化鉴定结果一致,且质谱鉴定分值大多在2.0以上。通过MALDI-TOF-MS鉴定方法可以很明显地将阴沟肠杆菌与阪崎肠杆菌两种菌分开。4种培养基对MALDI-TOF-MS鉴定结果的影响不是很明显,TSA比较适合作为阪崎肠杆菌MALDI-TOF-MS鉴定的培养基。通过质谱图谱和离子峰值比较得出,所有菌株在5745 m/z附近均出现高的离子峰,在2871、4740、8288、6260和9488 m/z附近出现离子峰的实验菌株达95%以上;在差异水平在0.5时,MALDI-TOF-MS的聚类分析结果可将所有实验菌株分成5个类型,结合菌株对应的来源和种类分析表明本研究所用菌株与来源和种类之间并无明显关系。结论MALDI-TOF-MS方法具有准确且精确鉴定阪崎肠杆菌的能力;离子峰5745m/z具有作为阪崎肠杆菌的标记性离子峰的可能;差异水平为0.5进行MALDI-TOF-MS聚类分析,未发现5个类型与来源等具有一定关系,需要进一步研究。
- 赵红阳吕佳卢雁陈明生刘淑艳蒋丹李宪臻卢行安
- 关键词:阪崎肠杆菌基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱聚类分析