亓传德
- 作品数:4 被引量:20H指数:1
- 供职机构:中国动物卫生与流行病学中心更多>>
- 发文基金:国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 我国部分省区高致病性猪蓝耳病分子流行病学分析与缺失基因片段dNsp2(87bp)的原核表达
- 亓传德
- 关键词:高致病性蓝耳病ORF5NSP2分子流行病学分析原核表达
- 猪生殖与呼吸综合征病毒分离株dNsp2基因的原核表达
- 2009年
- 参考GenBank中收录的猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)JXA1株Nsp2基因序列,设计了1对引物用于扩增截短的Nsp2(deleting Nsp2,dNsp2)基因,用BamHⅠ+XhoⅠ双酶切后将目的基因插入到原核表达载体pET-32a(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3)进行表达,经SDS-PAGE电泳和Western-blot检测,dNsp2基因得到了高效表达,融合蛋白的分子质量约为36.5 ku,表达产物以可溶性方式存在于表达上清液中,表达量可达菌体总蛋白的30%以上,表达产物能被PRRSV变异株抗体所识别,具有较好的生物学活性。PRRSV变异株dNsp2基因的高效表达为该病毒ELISA检测方法的建立及应用奠定了基础。
- 梁继望吴发兴亓传德张志刘爽张燕霞阿合买提李晓成
- 关键词:猪生殖与呼吸综合征病毒原核表达
- PRRSV基因缺失片段dNsp2(87)的原核表达
- 2009年
- 将质粒pUC57-dNsp2(87)经BamHⅠ和HindⅢ双酶切后,与经过相同酶切处理的pET-32a相连接,重组质粒转化大肠埃希菌BL21(DE3)进行表达,经SDS-PAGE电泳和Western blot检测,dNsp2(87)重组菌得到了有效表达,融合蛋白的分子质量约为23.5 ku,表达量可达菌体总蛋白的28.9%,重组蛋白能被PRRSV普通株阳性血清所识别,具有一定的生物学活性。
- 亓传德吴发兴梁继望高许雷郑辉张志张燕霞刘爽王洪斌黄保续李晓成
- 关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP2基因原核表达
- 猪伪狂犬病病毒PCR检测方法的建立与应用被引量:20
- 2009年
- 参考GenBank中收录的猪伪狂犬病病毒gE基因序列,应用Primer5.0软件设计了一对引物,扩增目的片段为632 bp。进行PCR检测方法的特异性、敏感性、重复性及符合性试验,建立了PRV的PCR检测方法。应用该方法对临床疑似发病样品进行了检测,PRV检出率为14.6%。表明该方法具有快速、特异、敏感、重复性好等优点,可用于PRV的临床发病诊断及流行病学监测等。
- 吴发兴郑辉亓传德高许雷张志刘爽张燕霞李晓成
- 关键词:猪伪狂犬病病毒GE基因聚合酶链式反应