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陈豪
作品数:
1
被引量:2
H指数:1
供职机构:
福建医科大学附属协和医院
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
王小众
福建医科大学附属协和医院
林纳
福建医科大学附属协和医院
黄月红
福建医科大学附属协和医院
陈志新
福建医科大学附属协和医院
李丹
福建医科大学附属协和医院
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陈豪
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福建医科大学...
年份
1篇
2011
共
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乙肝病毒X基因慢病毒载体的构建和鉴定
被引量:2
2011年
目的构建乙型肝炎病毒(HBV)X蛋白的重组慢病毒载体pRRLsincPPT-hPGK-X-IRES-eGFP-WPRE(pRRL-X),并感染正常组织来源的人肝细胞HL-7702,以验证其在体外的感染效率。方法采用PCR技术扩增出HBV X基因的DNA片段,用IN-Fusion技术构建表达载体pRRL-X并鉴定,jet-PEI转染试剂与三质粒共转染293T细胞后浓缩、计算慢病毒颗粒的滴度;用慢病毒液感染正常组织来源的人肝细胞HL-7702,120 h后初步观察慢病毒颗粒的感染情况。Real-time PCR和Western blot法检测细胞HBV X基因的表达。结果成功构建HBV X基因的慢病毒表达载体质粒pRRL-X。经293T细胞包装后,用慢病毒感染正常组织来源的人肝细胞HL-7702,120 h后被感染的细胞内可见强弱不等的荧光。结论成功构建HBV X慢病毒表达载体。
陈豪
李丹
林纳
黄月红
陈志新
王小众
关键词:
质粒
慢病毒感染
慢病毒属
聚合酶链反应
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