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徐晓晗
作品数:
2
被引量:5
H指数:1
供职机构:
吉林大学人兽共患病研究所
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
农业科学
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合作作者
魏盼
吉林大学人兽共患病研究所人兽共...
彭其胜
吉林大学人兽共患病研究所人兽共...
赵玉玺
吉林大学人兽共患病研究所人兽共...
崔桂梅
吉林大学人兽共患病研究所人兽共...
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细胞
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锌指蛋白A2...
1篇
巨噬细胞
1篇
HSP70
机构
2篇
吉林大学
作者
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崔桂梅
2篇
赵玉玺
2篇
彭其胜
2篇
魏盼
2篇
徐晓晗
传媒
1篇
中国兽医学报
1篇
扬州大学学报...
年份
2篇
2014
共
2
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表达锌指蛋白A20的巨噬细胞J774A.1模型的构建
被引量:1
2014年
为了研究布鲁菌感染机体后锌指蛋白A20调节天然免疫的机制,我们尝试构建A20表达的巨噬细胞模型。通过分子生物学手段构建表达A20的慢病毒;Western blot检测A20的表达;以内毒素(LPS)刺激细胞,Western blot检测IκB-α降解变化且ELISA检测炎性细胞因子TNF-α及IL-6的水平来判定A20表达细胞模型是否成功。限制性内切酶酶切鉴定、DNA测序及慢病毒包装试验表明A20重组慢病毒构建成功;Western blot证实感染J774A.1后A20蛋白表达明显增加;A20表达的J774A.1受到LPS刺激后IκB-α未发生降解,TNF-α及IL-6水平明显低于空载体及空白对照组(P<0.01)。结果表明,本研究成功构建了A20表达的巨噬细胞模型。
赵玉玺
崔桂梅
潘垒昌
魏盼
徐晓晗
彭其胜
关键词:
巨噬细胞
布鲁菌
与Rab2互作布鲁菌株效应蛋白HSP70的鉴定
被引量:4
2014年
以Rab2作为诱饵钓取布鲁菌效应蛋白,通过RT-PCR获得鼠Rab2基因,利用基因克隆方法构建表达载体pGEX-4T-1-Rab2及其2个突变体pGEX-4T-1-Rab2[N119I]和pGEX-4T-1-Rab2[Q65L];然后IPTG诱导GST-Rab2、GST-Rab2[N119I]和GST-Rab2[Q65L]融合蛋白的表达,使用琼脂糖亲和介质分离纯化融合蛋白;最后将纯化的融合蛋白与超声破碎的野生布鲁菌或Δvirb2缺失布鲁菌株上清互作,利用SDS-PAGE电泳和银染确定差异蛋白,质谱分析差异蛋白。结果表明:所鉴定出的布鲁菌株效应蛋白为热休克蛋白HSP70。这为未来研究HSP70如何调节布鲁菌胞内寄生奠定基础。
崔桂梅
魏盼
赵玉玺
潘垒昌
徐晓晗
彭其胜
关键词:
布鲁菌
HSP70
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