刘珂
- 作品数：7 被引量：143H指数：6
- 供职机构：西南大学药学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 梓醇调控自噬和凋亡促进H_2O_2诱导的PC12细胞存活被引量：7
- 2018年
- 探讨梓醇对过氧化氢(H_2O_2)诱导的PC12细胞氧化损伤后调控凋亡和自噬相关分子的机制,采用0.01 mmol,0.1 mmol,1 mmol的梓醇预处理PC12细胞2h后,再用250μmol/L H_2O_2损伤细胞12h.MTT法检测细胞存活率,设置梓醇低、中、高3个剂量组(0.01 mmol,0.1 mmol,1 mmol),自噬抑制剂3MA阳性对照组,阴性对照组,H_2O_2诱导的PC12细胞损伤模型组,采用荧光单标检测LC3Ⅱ的表达,Western blot检测凋亡和自噬相关蛋白Bcl2/Bax,LC3Ⅱ/Ⅰ和Cleaved-caspase 3的表达情况.结果显示,梓醇呈剂量依赖性地提高了H_2O_2诱导的PC12细胞的存活,并对H_2O_2诱导的PC12细胞的LC3Ⅱ/Ⅰ,Bcl2/Bax升高蛋白水平表达,降低了Cleaved-caspase 3的表达;随着梓醇浓度的增加,Cleaved-caspase 3的表达减少,而LC3Ⅱ/Ⅰ和Bcl2/Bax的表达在升高.得出梓醇通过恢复凋亡和自噬相关蛋白Bcl2/Bax,LC3Ⅱ/Ⅰ的平衡能够保护PC12细胞免于H_2O_2诱导的氧化损伤.
- 王园刘珂邱邴勋祝慧凤王涛万东
- 关键词：梓醇PC12细胞凋亡自噬
- 梓醇对大脑皮质神经元的抗衰老保护作用研究被引量：8
- 2017年
- 目的探讨梓醇对正常皮质神经元的抗衰老作用及其可能机制。方法原代培养新生24 h SD大鼠皮质神经元,分为正常组、梓醇低(0.1 mg·L^(-1))、中(1 mg·L^(-1))、高(10 mg·L^(-1))剂量组。上述培养基中的神经元培养至13 d,显微观察7~13 d的各组细胞形态;MTT法检测7~13 d各组细胞的细胞活力;免疫荧光分别检测13 d各组神经元pS6和Map-2表达以显示细胞的内在活性和轴突生长情况;Western blot法检测13 d各组细胞GAP-43、p-S6、PI3K、pPI3K、Akt、p-Akt、m TOR、p-m TOR蛋白的表达。结果与正常组相比,梓醇给药各组均能延缓神经元的衰老,促进神经元的存活,提高神经元的细胞活力(P<0.05);诱导神经元内在活性,促进p-S6阳性细胞数增加(P<0.05);促进轴突生长(P<0.05)。且不同浓度的梓醇均能促进13 d的神经元GAP-43、p-S6、PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、m TOR、p-m TOR蛋白表达增加(P<0.05)。结论梓醇具有抗大脑皮质神经元衰老作用,其机制可能与调控PI3K/Akt/m TOR信号通路,增强神经元生长活性有关。
- 王静欢刘珂万东祝慧凤
- 关键词：梓醇皮质神经元抗衰老轴突生长PI3K/AKT/MTOR
- 黄芪及其有效成分对内皮细胞及其连接的保护作用及机制研究进展被引量：54
- 2016年
- 查阅近年国内外相关文献,对血管内皮细胞连接及益气中药黄芪有效成分对血管内皮细胞连接的保护机制进行归纳总结。黄芪多糖和黄芪皂苷均可通过上调紧密连接(tight junctions,TJ)相关蛋白表达、下调细胞黏附分子(cell adhesion molecules,CAM)表达来增加内皮细胞连接的完整性,还可通过抑制细胞内皮素(ET)分泌、增加NO释放、抑制细胞凋亡和促进血管生成中内皮细胞的增殖和迁移等保护内皮细胞功能。而黄芪黄酮则主要通过抑制内皮细胞凋亡保护内皮细胞。黄芪有效成分对内皮细胞的保护作用涉及p38 MAPK/NF-κB、Rho/ROCK、PI3K/Akt、VEGF/Ang-1等信号通路多个关键性靶点,目前的研究主要集中在对TJ和CAM抑制单核细胞与内皮细胞黏附调控上,少有涉及缝隙连接(gap junctions,GJ)的保护作用研究。
- 刘珂邱炳勋邹利俸珊祝慧凤万东
- 关键词：内皮细胞
- 对乙酰氨基酚对不同妊娠期小鼠肝肾功能的影响及机制研究
- 2018年
- 目的研究对乙酰氨基酚(acetaminophen,APAP)对不同妊娠期小鼠肝肾功能的影响及其机制。方法分别给予未妊娠、妊娠中期和晚期小鼠500 mg·kg^(-1)APAP(文献报道最大可耐受剂量)后,于0、6、24、48 h取材,全自动生化仪测定肝脏和肾脏的血液生化指标;LC-MS/MS的cocktail探针法测定CYP450s代谢酶活性;HE染色法观察肝、肾组织病理学变化;LC-MS/MS法测定APAP活性代谢产物N-乙酰-对苯醌亚胺(NAPQI)-GSH结合物。结果小鼠肝CYP450s活性在妊娠中期上调,而在妊娠晚期恢复到正常水平;小鼠肝SOD活性在妊娠中期和晚期均上调,而肝脏GSH水平仅在妊娠中期明显高于未妊娠组。APAP可致妊娠中期小鼠产生轻微肝损伤,主要表现为ALT、AST、ALP、MDA水平升高(P<0.05),而SOD和GSH含量降低,同时其肝脏中的NAPQI-GSH水平明显升高(P<0.05)。APAP对未妊娠和妊娠晚期小鼠肝功能影响较小,APAP对妊娠各期小鼠肾功能无明显影响。结论 500 mg·kg^(-1)APAP仅致妊娠中期小鼠产生急性轻微肝损伤,这可能与妊娠中期小鼠肝CYP450s活性升高,但同时伴随肝SOD活性和GSH水平升高有关。
- 俸珊俸娜付玉颖邹利刘珂任巧徐晓玉
- 关键词：对乙酰氨基酚孕鼠
- 党参米炒前后党参多糖与5-羟甲基糠醛的变化及其对胃肠平滑肌运动的影响被引量：53
- 2017年
- 目的探讨庙宇党参炮制(米炒)前后党参多糖及5-羟甲基糠醛(5-HMF)的量变化及其对家兔离体胃肠平滑肌运动的影响。方法运用苯酚硫酸法、高效液相色谱法分别对炮制前后党参多糖、5-HMF进行定量测定,采用BL-420F生物机能平滑肌实验系统,观察庙宇党参米炒前后对家兔离体胃肠平滑肌运动的影响;并考察党参米炒前后对工具药氯化乙酰胆碱(Ach)、新斯的明、氯化钡(BaCl_2)、阿托品、肾上腺素(Adr)所致胃肠平滑肌运动的干预作用。结果米炒党参多糖的量显著低于党参饮片(P<0.05),5-HMF的量显著高于党参饮片(P<0.01)。米炒党参显著兴奋离体胃肠平滑肌,缓解新斯的明、BaCl_2引起的强直性收缩,对抗Adr引起的肠管松弛(P<0.05)。结论党参米炒后5-HMF大量产生,能调控胃肠平滑肌的兴奋性收缩,再现5-HMF对离体胃肠平滑肌的效应,可能是米炒党参健脾功效增强的物质基础之一,其机制可能与其协同调控胃肠平滑肌N_2受体和β肾上腺素能受体有关。
- 邹利邱炳勋刘珂万东祝慧凤
- 关键词：党参党参多糖5-HMFΒ肾上腺素能受体
- 梓醇对高糖致大鼠脑微血管内皮细胞间紧密连接破坏的保护作用研究被引量：6
- 2018年
- 梓醇为地黄的主要有效成分,具有缓解脑微血管内皮细胞水肿,促进内皮细胞存活与增殖作用。而其是否对高血糖引发的脑微血管内皮细胞(brain microvascular endothelial cells,BMECs)间紧密连接损伤具保护作用还未知。该文评价了梓醇对高糖致大鼠BMECs紧密连接破坏的保护作用,并对其机制进行了初步研究。原代分离715 d SD大鼠BMECs,经30 mmol·L-1高糖损伤后,观察梓醇对其存活率、内皮素-1分泌、跨膜电阻、紧密连接超微结构、骨架蛋白F-actin重构、紧密连接蛋白和黏附连接蛋白表达的影响。结果表明梓醇(0. 3,3. 0,30. 0μmol·L-1)呈剂量依赖性提高BMECs存活率、降低内皮素-1的分泌、提高BMECs间跨膜电阻;透射电镜结果显示其还能增强BMECs间紧密连接;免疫荧光染色证实梓醇上调紧密连接蛋白claudin-5,ZO-1的表达,逆转高糖所致F-actin细胞骨架重排;q-PCR结果也进一步证实梓醇呈剂量依赖性上调紧密连接蛋白claudin-5,occludin,ZO-1,ZO-2,ZO-3和黏附连接蛋白α-actintin,vinculin,cateinins的mRNA表达(P <0. 05)。该研究表明梓醇对高糖致BMECs的损伤具有保护作用,其机制可能与上调细胞间紧密连接与黏附连接表达,逆转细胞骨架蛋白F-actin重构有关。
- 邹利邹利刘珂祝慧凤
- 关键词：梓醇高糖细胞骨架蛋白
- 五味子诱导的CYPs和Nrf2活化对对乙酰氨基酚急性肝损伤的影响被引量：16
- 2018年
- 五味子为临床常用保肝药,研究表明其对CYP450s酶活性具有双向调控作用,即短期给药可抑制CYP450s活性,而长期给药可诱导CYP450s活性。异常高表达的CYP450s活性是活性代谢产物致肝损伤发生的危险因素。而五味子长期用药后对活性代谢产物致肝损伤的影响还未见报道。因此,该研究选择对乙酰氨基酚(APAP,可经活性代谢产物导致药物性肝损伤)为模型药物。通过动物整体实验评价五味子长期给药后对APAP急性肝损伤的影响及其机制。五味子提取物(0. 5~2. 0g·kg-1)灌胃给予SD大鼠21 d后,大鼠肝脏组织5种CYP450s酶活性有不同程度的上调,同时Nrf2及其信号通路下游基因如GLCc,GLCm,GST,HO-1的mRNA表达均显著增加,GST和SOD活性也呈剂量依赖性增加。五味子提取物给药结束后,单次灌胃给予APAP(500 mg·kg-1,诱发急性肝损伤剂量)后,五味子呈剂量依赖性逆转APAP导致的急性肝损伤,主要表现为:逆转ALT,AST,MDA水平升高(P <0. 05),升高GSH水平,改善肝脏组织病理学损伤以及降低肝细胞中cleaved caspase-3表达。此外,LC-MS/MS含量检测显示五味子呈剂量依赖性增加肝组织中APAP活性代谢产物N-乙酰-对苯醌亚胺生成量(P <0. 05)。上述结果表明五味子(0. 5~2. 0 g·kg-1)长期给药虽然可上调CYP450s活性,导致APAP活性代谢产物生成量增加;但其同时激活Nrf2信号通路,上调GST等抗氧化酶表达,增强抗氧化酶活性及GSH水平,最终可保护APAP导致的急性肝损伤。
- 邱炳勋刘珂邹利祝慧凤祝慧凤
- 关键词：五味子对乙酰氨基酚肝毒性
