张健民
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 供职机构：解放军324医院更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 细胞移植治疗神经变性疾病:是否发生了细胞“转分化”?被引量：2
- 2013年
- 背景:神经变性疾病为一类缓慢起病、病程呈进行性发展、预后不良的疾病,迄今尚缺乏有效的根治方法。细胞移植为神经变性疾病的治疗提供了一个崭新的思路。目的:研究细胞移植治疗神经变性疾病的移植细胞、修饰基因及方法,并探讨细胞移植后是否发生"转分化"。方法:收集细胞移植治疗神经变性疾病的相关文献,分析近年相关研究中细胞移植治疗神经变性疾病的移植细胞、修饰基因,以及细胞移植治疗帕金森病、阿尔茨海默病和肌萎缩侧索硬化的方法。结果与结论:目前治疗神经变性疾病研究较多的主要为骨髓干细胞、胚胎干细胞、脐血干细胞、神经干细胞、异体细胞等。细胞移植治疗神经变性疾病时的修饰基因主要有酪氨酸羟化酶、孤儿核受体、神经营养因子、VonHippel-Lindau基因、白细胞介素1及褪黑素等。细胞移植治疗帕金森病多是移植到大鼠纹状体,细胞移植治疗阿尔茨海默病和肌萎缩侧索硬化的移植部位分别多为海马和蛛网膜下腔。细胞移植应用于治疗神经变性疾病正日趋成熟,但移植后是否真的发生了细胞的"转分化",尚无明确的结论。
- 周玉峰张凡喜张健民
- 关键词：器官移植骨髓干细胞脐血干细胞
- 抗GPNMB单克隆抗体的制备及双抗体夹心ELISA方法的建立
- 2013年
- 目的:制备抗GPNMB单克隆抗体,建立双抗体夹心ELISA检测GPNMB在胶质母细胞瘤中的表达情况。方法:以新鲜胶质母细胞瘤组织为材料,提取总RNA,通过RT-PCR扩增得到GPNMB cDNA序列,经NcoI和XhoI双酶切后,克隆入PET-28a(+)进行原核表达,经蛋白纯化得GPNMB-6×His融合蛋白;以该融合蛋白免疫BALB/c小鼠,淋巴细胞杂交瘤法制备单克隆抗体;采用Western-blot、双抗体夹心ELISA以制备所得的抗GPNMB抗体检测胶质母细胞瘤细胞系U251、U373、SHG44和星形胶质细胞系SVG12中GPNMB的表达。结果:成功构建了GPNMB原核表达载体,获得了GPNMB-6×His重组蛋白;制备得到了G203、F105和M306共3株抗GPNMB的单克隆抗体,腹水ELISA效价分别为1:8000、1:8000、1:5000,抗体亚类分别为IgG2、IgG1和IgG1,进一步实验证实单克隆抗体G203和M306可用于双抗体夹心ELISA检测不同胶质细胞瘤细胞系中GPNMB的表达。结论:成功制备出抗GPNMB单克隆抗体,效价及特异性良好,并证实GPNMB在胶质母细胞瘤细胞系中高表达,为进一步研究GPNMB在胶质母细胞瘤中的作用奠定了基础。
- 张健民张凡喜黄晓龙周玉峰
- 关键词：胶质母细胞瘤单克隆抗体双抗体夹心ELISA
