张琳萍
- 作品数：4 被引量：18H指数：3
- 供职机构：西安交通大学医学部更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省中医药管理局科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 活血胶囊激活PI3K/Akt/Nrf2/HO-1通路对血管内皮细胞发挥抗氧化损伤作用被引量：7
- 2019年
- 目的研究活血胶囊(HXJN)对血管内皮细胞的抗氧化损伤作用分子机制。方法采用WST-1法检测细胞活力;qRT-PCR和Western blot技术检测血红素加氧酶-1(HO-1)的表达;检测HXJN对Akt和转录因子Nrf2的激活作用,并分析其对HO-1表达的影响。结果HXJN可显著减轻H2O2对细胞活力的抑制作用。HXJN可上调HO-1表达水平。HXJN可诱导Akt和Nrf2磷酸化,并促进Nrf2核转位;LY294002、perifosine和ML385均抑制HXJN对HO-1的上调,LY294002可抑制Nrf2核转位。结论HXJN促进HO-1表达而发挥抗氧化损伤作用,Akt和Nrf2参与调控HO-1表达。
- 赵静袁瑞华王海芳邓国荣张琳萍曹情雯霍雪萍赵向绒刘勤社
- 关键词：活血胶囊血管内皮细胞HO-1
- RNA质量对内参基因选择和qRT-PCR结果评价的影响被引量：5
- 2018年
- 目的:研究RNA质量对内参基因选择和实时定量PCR(qRT-PCR)分析肿瘤坏死因子α(TNFα)诱导基因表达结果评价的影响。方法:用TNFα刺激体外培养的小鼠血管内皮细胞,采用qRT-PCR技术,以2种常用的管家基因β-actin和GAPDH为内参,检测细胞间黏附分子1(ICAM-1)基因的表达,探讨RNA纯度对TNFα下游基因表达检测结果的影响。结果:当提取的总RNA纯度很高(D260nm/D230nm>2.0)时,以β-actin和GAPDH为内参基因检测ICAM-1基因表达的结果相近;当总RNA可能被盐及小分子污染(D260nm/D230nm<2.0)时,以β-actin为内参基因检测的ICAM-1基因相对表达量显著高于以GAPDH为内参所得结果。结论:RNA质量显著影响荧光定量PCR对基因表达的检测结果,因此在RNA质量较低时应选择2个或以上内参基因进行校正,以减少实验结果误差,得到准确结果。
- 霍雪萍张琳萍赵向绒刘勤社王海芳
- 关键词：实时荧光定量PCR内参基因肿瘤坏死因子Α
- 黄芪皂苷Ⅲ抑制小鼠动脉平滑肌细胞TNFR1介导信号转导被引量：6
- 2017年
- 目的研究黄芪皂苷Ⅲ(astragaloside Ⅲ,ASⅢ)对小鼠动脉平滑肌细胞(arterial smooth muscle cells,ASMCs)中I型TNF-α受体(TNF-αreceptor type 1,TNFR1)介导信号通路的抑制作用,为中药黄芪的抗炎作用和抗动脉粥样硬化作用提供证据。方法以不同浓度ASⅢ预处理ASMCs,之后以TNF-α诱导细胞。采用WST-1实验检测细胞活力变化;采用实时定量RT-PCR技术检测细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)、凝集素样氧化低密度脂蛋白受体(lectin-like oxidized LDL receptor-1,Lox-1)和ATP结合盒转运蛋白A1(ATP-binding cassette transporter A1,ABCA1)m RNA表达变化;采用Western Blot方法检测ICAM-1、Lox-1和ABCA1蛋白表达变化,并检测ASⅢ对转录因子NF-κB(nuclear factor-κB)上游抑制蛋白IκBα(NF-κB inhibitor-α)、以及对信号分子AKT、细胞外受体活化激酶(extracellular receptor-activated kinases,ERKs)和p38磷酸化的影响。结果 (1)ASⅢ在30 n M^10μM范围内不抑制细胞活力;(2)ASⅢ剂量依赖性抑制TNF-α对ICAM-1、Lox-1和ABCA1 m RNA表达的调控;(3)ASⅢ剂量依赖性抑制TNF-α对ICAM-1、Lox-1和ABCA1蛋白表达的调控;(4)ASⅢ显著抑制TNFR1介导的IκBα磷酸化和降解;(5)ASⅢ显著抑制TNFR1介导的AKT、ERKs和p38磷酸化。结论 ASⅢ可全面抑制ASMCs中TNFR1介导信号通路激活,参与其抗炎和抗动脉粥样硬化作用。
- 王海芳张琳萍霍雪萍赵向绒赵苗苗曹情雯胡军刘勤社
- 关键词：动脉平滑肌细胞TNFR1抗炎作用
- 血管内皮细胞初始接种密度在细胞增殖和毒性检测中的重要性被引量：1
- 2018年
- 目的:探讨不同接种密度对药物诱导血管内皮细胞增殖及损伤作用评价的影响,阐明优化细胞初始接种密度的重要性。方法:体外培养bEND.3小鼠血管内皮细胞,按照不同密度接种96孔培养板,给予药物处理,通过倒置显微镜观察细胞形态并拍照,采用WST-1比色法检测细胞活力,评价药物的促增殖作用或H_2O_2诱导氧化损伤的程度。结果:在进行72 h细胞增殖效应评价实验中,bEND.3细胞接种量应为3000～6000/孔,细胞密度过低、间隙较大或接种密度过大,均可能影响对药物效应的评价。在建立H_2O_2诱导细胞氧化损伤模型时,内皮细胞的接种量直接影响H_2O_2对细胞的损伤程度。结论:针对实验目的选择合适的细胞初始接种密度,对于提高实验结果的准确性和稳定性十分必要。
- 霍雪萍张琳萍赵向绒刘勤社王海芳
- 关键词：细胞密度细胞增殖
