陶丽红
- 作品数:13 被引量:21H指数:3
- 供职机构:中国农业科学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家科技支撑计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生更多>>
- 日本血吸虫信号转导蛋白Sjwnt-4基因的克隆、表达及功能分析被引量:7
- 2007年
- 由Wnt基因家族产物与其它相关基因产物构成的Wnt信号通路,是细胞发育和生长调节的一个关键途径,对动物的发育特别是生殖系统的发育起重要的调节作用。在人类和小鼠中,Wnt4蛋白是性腺分化过程中主要调节因子,在胚胎发育中起着关键作用。利用RACE技术从日本血吸虫19d童虫中首次扩增到一个Wnt家族基因,序列分析表明该基因的完整编码框含1311bp,编码436个氨基酸,理论分子量49.6kD。同源性分析结果表明,该基因的氨基酸序列具有典型Wnt家族蛋白特征,与日本三角涡虫、人Wnt4的氨基酸序列相似性分别达43%、37%,推测为血吸虫的Wnt4基因,命名为Sjwnt4(GenBank登陆号DQ643829)。实时定量PCR分析显示该基因在14d童虫、19d童虫、31d虫体、44d雌虫及44d雄虫中均有表达,其中19d童虫中的表达量明显高于其它发育阶段,44d雌虫中的表达量明显高于雄虫。构建了该基因的原核表达载体pGEX-4T-2-Sjwnt4,应用大肠杆菌系统进行了表达,表达蛋白以包涵体形式存在,Western印迹显示表达产物能被日本血吸虫成虫粗抗原免疫血清所识别。Sjwnt4基因及其表达产物的获得,为探索Wnt信号通路对血吸虫发育、生殖的调节提供了重要基础。
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- 关键词:日本血吸虫信号转导发育
- 日本血吸虫信号转导蛋白Sjwnt-4基因的克隆、表达及应用
- 本发明公开了利用RACE技术从日本血吸虫19天童虫中首次扩增到一个Wnt家族基因,序列分析表明该基因的完整编码框含1311bp,编码436个氨基酸,理论分子量49.6kD。同源性分析结果表明,该基因的氨基酸序列具有典型W...
- 林矫矫陶丽红苑纯秀姚利晓傅志强冯新港刘金明石耀军王欣之贾人初
- 文献传递
- 家畜日本血吸虫基因工程苗研究
- 林矫矫冯新港蔡幼民刘金明苑纯秀傅志强石耀军程国峰沈纬朱传刚李浩陆珂沈阳黄劭鹏姚利晓孙安国夏艳勋赵晓宇杨柳章登吉施福恢钱承贵陈兆国杨健美张雪娣邵东华陶丽红彭运潮孙毅贾人初
- 该成果为国家863计划血吸虫病防治研究专项课题(2004AA2Z3510,2004.7~2005.12)。研究针对某些血吸虫期别和性别差异表达的分子可能与日本血吸虫的生长、发育、性成熟、产卵、致病等相关,应用抑制性消减杂...
- 关键词:
- 关键词:疫苗日本血吸虫基因工程
- 日本血吸虫信号转导蛋白Sjwnt10a基因的克隆及其在童虫和成虫中mRNA表达量的变化被引量:3
- 2007年
- 利用RACE技术从19日龄的日本血吸虫童虫中扩增了1个Wnt家族基因,并对其进行了生物信息学分析。同源性分析表明,该基因为日本血吸虫新基因,完整开放阅读框(ORF)长1896 bp,编码631个氨基酸,理论分子质量为73.3 ku。该基因编码的氨基酸序列具有Wnt家族蛋白的典型特征,与人、鼠Wnt10a的氨基酸序列同源性均为26%,推测为血吸虫的Wnt10a基因,命名为Sjwnt10a(Gen BanK登录号DQ643829)。利用实时荧光定量PCR分析该基因在日本血吸虫不同发育阶段虫体中的表达情况,结果显示该基因在19日龄的日本血吸虫童虫中表达量最高,在14日龄童虫和44日龄雄虫中也有表达,但分别仅为19日龄童虫表达量的8.8%和5.0%,而在31日龄成虫和44日龄雌虫中没有检测到该基因。结果提示,童虫差异表达的Sjwnt10a基因可能对童虫的生长、发育至关重要。
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- 关键词:日本血吸虫信号转导
- 日本血吸虫信号转导蛋白SjWnt4、SjWnt10a编码基因的克隆、表达及其生物学功能分析
- 血吸虫病是由血吸虫感染引起的分布广泛、危害严重的人兽共患寄生虫病.血吸虫不同发育阶段虫体呈现不同的基因差异表达模式,导致血吸虫独特的代谢和发育过程及显著的生物学和形态学变化.由Wnt基因家族产物与其它相关基因产物所构成的...
- 陶丽红
- 关键词:日本血吸虫信号转导蛋白WNT基因克隆生物学功能
- 文献传递
- 日本血吸虫生长发育相关基因的筛选、分析及功能研究
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- 依据血吸虫的一些重要生物学特征,如血吸虫雌雄合抱是雌虫发育成熟、产卵的基础,童虫是血吸虫在终宿主体内早期发育的虫体阶段,虫卵是血吸虫病最重要的致病原和传染源,一些在血吸虫不同发育阶段特异或差异表达的基因或蛋白可能在血吸虫...
- 关键词:
- 关键词:日本血吸虫功能基因生长发育
- 日本血吸虫SjPP基因原核表达蛋白的酶活性
- 2008年
- 分别以磷酸苏氨酸多肽(K-R-pT-I—R—R)和4-硝基苯基磷基二钠盐(pNPP)为底物,研究原核表达的日本血吸虫丝/苏氨酸蛋白磷酸酶重组蛋白rSjPP的酶活性,检测二价金属阳离子(Mn^2+、Ni^2+、Mg^2+、Ca^2+)、温度、pH值对rSjPP酶活性的影响。结果显示,rSjPP重组蛋白可以有效地水解磷酸苏氨酸多肽,具有丝/苏氨酸蛋白磷酸酶活性。rSjPP酶活性的最适温度为60℃,最适pH值为8.0。1~4mmol/L Ni^2+对rSjPP酶活力有促进作用,但Mn^2+、Mg^2+、Ca^2+等阳离子对rSjPP的酶活力影响不大。
- 姚利晓王欣之傅志强陶丽红林矫矫
- 关键词:日本血吸虫酶活性
- 日本血吸虫信号转导蛋白Sjwnt-4基因的克隆、表达及应用
- 本发明公开了利用RACE技术从日本血吸虫19天童虫中首次扩增到一个Wnt家族基因,序列分析表明该基因的完整编码框含1311bp,编码436个氨基酸,理论分子量49.6kD。同源性分析结果表明,该基因的氨基酸序列具有典型W...
- 林矫矫陶丽红苑纯秀姚利晓傅志强冯新港刘金明石耀军王欣之贾人初
- 文献传递
- 蛋白质组学技术及其在寄生虫学研究中的应用被引量:1
- 2007年
- 该文介绍了蛋白质组学研究的核心技术,即蛋白质组分分离、鉴定,利用蛋白质组信息学进行结构和功能预测,以及蛋白质组学技术在寄生虫学研究中的应用和前景。
- 陶丽红林矫矫
- 关键词:蛋白质组学双向电泳生物质谱寄生虫学
- 日本血吸虫磷酸甘油酸变位酶SjPGAM基因的克隆、表达及功能分析被引量:7
- 2008年
- 磷酸甘油酸变位酶(Phosphoglyceratemutas)是糖酵解过程中的一种重要酶,主要催化3-磷酸甘油酸转化为2-磷酸甘油酸。利用PCR技术从日本血吸虫19d童虫中首次扩增到一个PGAM家族基因,序列分析表明该基因的完整编码框含753bp,编码250个氨基酸,理论分子量28.26kD,理论等电点7.01。同源性分析结果表明,该基因的氨基酸序列具有典型PGAM家族特征,推测为血吸虫的PGAM基因,命名为SjPGAM(GenBank Accession No.EU374631)。实时定量PCR分析显示该基因在14d和19d童虫中的表达量明显高于其他发育阶段,42d雄虫中的表达量高于雌虫。构建了该基因的原核重组表达质粒pET-28a(+)-PGAM,在大肠杆菌系统中成功获得了表达,重组蛋白以包涵体形式存在,Western blotting显示表达产物能被日本血吸虫成虫粗抗原免疫血清所识别。SjPGAM基因及其表达产物的获得,为探索PGAM基因家族在血吸虫能量代谢过程中碳水化合物转运、新陈代谢调节和生长发育提供了重要基础。
- 周岩林矫矫姚利晓王欣之石耀军陆珂刘金明傅志强陶丽红
- 关键词:日本血吸虫糖酵解克隆