目的分析b型流感嗜血杆菌(Type b Haemophilus influenzae,Hib)不同培养基发酵液中蛋白质、核酸含量及不同培养基添加物对发酵产物的影响,优化Hib发酵培养基。方法设计不同配方的Hib摇瓶培养基,经摇瓶培养,检测发酵液上清中的蛋白质及核酸含量,选择合适的基础培养基,并在此基础上进行发酵罐培养,检测不同添加物(磷酸盐、钠盐、金属离子等)对Hib多糖复合物收获量、菌体形态及发酵液颜色的影响,并发酵3批,进一步检测多糖复合物中蛋白质和核酸的含量。结果培养基介质不同,其发酵上清液中的蛋白质和核酸含量也不同,2号培养基(主要成分为酸水解酪素粉和酵母浸粉)发酵液蛋白质和核酸含量较低且稳定;培养基中不同添加物对Hib菌体形态、发酵液颜色及多糖复合物的收获量、质量和性状均产生不同的影响,其中b培养基发酵液菌体形态、多糖复合物收获量及质量均较好;3批发酵培养液中分别约有7%～10%的蛋白质和34%～42%的核酸被沉淀至多糖复合物中。结论选择2号培养基为Hib基础培养基,b培养基为发酵培养基,本实验为Hib疫苗培养基的优化和多糖抗原的纯化提供了实验依据。
