郭会杰
- 作品数:2 被引量:11H指数:2
- 供职机构:北京生物制品研究所更多>>
- 发文基金:国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 肠道病毒71型(EV71)基因组全长cDNA感染性克隆的构建及鉴定被引量:2
- 2010年
- 目的 构建肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)基因组全长cDNA感染性克隆,为EV71分子遗传学、致病机制及疫苗研究等建立技术平台.方法 根据EV71 085株病毒全基因组序列,分4个片段对基因组cDNA进行扩增后,将扩增片段定向、顺序克隆至pBluescript SK(+)载体,构建病毒基因组全长cDNA克隆,经体外转录为RNA后,转染Vero细胞获得拯救病毒.经RT-PCR、间接免疫荧光(IFA)以及电镜检测等方法鉴定拯救子代病毒.结果 成功构建Ev71基因组全长cDNA克隆,其转染Vero细胞后,可观察到典型的细胞病变;所获得的拯救子代病毒,可被EV71特异性抗血清中和;采用EV71特异性引物进行RT-PCR扩增,可出现长约226 bp的特异性条带;IFA检测可见感染细胞出现黄绿色荧光;透射电镜检测可见20~30 nm球形病毒颗粒;子代病毒在Vero细胞上连续传8代,滴度维持在4.5~6.0 lgCCID50/ml,略低于母本株(7.5 lgCCID50/ml);噬斑检测发现,空斑形态、大小均一,但比母本株小.结论 成功构建EV71基因组全长cDNA感染性克隆,为深入探讨EV71的致病机制和疫苗研制奠定了基础.
- 郭会杰李秀玲
- 关键词:肠道病毒71型全长CDNA克隆体外转录病毒拯救
- 人类肠道病毒71型的研究进展被引量:9
- 2010年
- 肠道病毒71型是引起手足口病的主要病原体之一,其感染还可导致多种与神经系统相关的疾病,致残率及病死率较高。近年来,EV71感染在全球范围呈现上升趋势,2008年我国也有较大规模流行。本文对EV71的病原学特征、流行病学特征以及相关最新研究进展等方面作一综述。
- 郭会杰王潇潇李秀玲
- 关键词:肠道病毒71型受体疫苗