目的探索死亡受体3(DR3)受体激动剂(αDR3)抗体活化DR3信号通路干预抗体-介导输血相关急性肺损伤(TRALI)的有效性及可能机制。方法1)8~10周龄Balb/c小鼠40只随机均分为正常组、同型对照组、模型组、干预组;正常组不做任何处理;小鼠腹腔注射脂多糖(LPS)0.1 mg/kg及尾静脉注射4.5 mg/kg IgG2a同型对照抗体或抗-MHC-Ⅰ分别构建同型对照组与抗体介导TRALI模型组;小鼠腹腔单剂量注射αDR3抗体1 mg/kg 3 d后,再注射LPS 0.1 mg/kg及4.5 mg/kg抗-MHC-Ⅰ构建TRALI干预组。2)注射抗-MHC-Ⅰ后小鼠死亡或观察2 h处死小鼠取肺脏和脾脏,通过免疫病理评估肺损伤、流式细胞术检测脾脏调节性T细胞(Treg)、分别使用免疫组织化学(IHC)结合光密度定量分析分别检测小鼠肺组织Treg、M1巨噬细胞、M2巨噬细胞特异性标记物Foxp3、iNOS、CD206表达,CBA定量分析IL-6、IL-1β、TNF-α、IL-10,评估αDR3抗体对小鼠TRALI模型的干预效果。结果TRALI干预组与模型组比较,1)小鼠肺组织损伤明显减轻;2)Treg比例(%)脾脏为9.295±1.349 vs 2.257±0.610;肺脏Foxp3平均光密度0.3026±0.0526 vs 0.2302±0.0163(P<0.05);Treg来源细胞因子IL-10浓度(pg/mL)为29.52±8.885 vs 8.045±1.911(P<0.05);3)肺脏iNOS平均光密度为0.2096±0.0139 vs 0.2796±0.0452,其来源的细胞因子浓度(pg/mL)IL-6为23.22±19.35 vs 301.1±157.7、IL-1β为46.76±25.34 vs 307.6±183.8、TNF-α为45.99±14.16 vs 143.9±44.43(P<0.05);肺脏CD206平均光密度为0.2912±0.0321 vs 0.2215±0.0127,其来源的细胞因子IL-10(pg/mL)为29.52±8.885 vs 8.045±1.911(P<0.05)。结论αDR3抗体可能通过活化DR3信号通路扩增小鼠的Treg,进而Treg分泌IL-10调节M1巨噬细胞极化为M2巨噬细胞起到预防小鼠发生TRALI的作用。
