刘勇 作品数:12 被引量:15 H指数:2 供职机构: 兰州大学生命科学学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 理学 生物学 医药卫生 一般工业技术 更多>>
含有金纳米粒子的筛分介质对不同长度DNA片段的毛细管电泳分离 被引量:1 2009年 探讨了含有金纳米粒子(GNPs)的筛分介质在毛细管电泳(CE)中对不同长度DNA片段的分离。以聚环氧乙烷(PEO)-金纳米粒子(GNPs)-TBE为CE筛分介质,用涂层的毛细管柱(37 cm×75μm,有效长度27 cm)分离DNAMarker D和1 kbp DNALadder Marker标准DNA片段,考察了CE过程中各参数(如筛分介质质量浓度、分离电压、温度和筛分介质pH值)对不同长度DNA片段分离的影响。对比了新型筛分介质与不含GNPs的PEO-TBE筛分介质的分离效果,并将新型筛分介质用于实际样品的检测。结果表明,在筛分介质中添加GNPs后能够改进CE的分离效果,且分离时间短。方法较适于分离较宽范围的DNA片段。 刘勇 刘勇 王荣 高岚 贾正平 辛晓婷 谢华关键词:毛细管电泳 金纳米粒子 DNA片段 无胶筛分毛细管电泳分离蛋白质的实验研究 毛细管电泳(CE)是近年来迅速发展起来的一种新型生物大分子分离分析技术,本文细致考察无胶筛分毛细管电泳(NGS-CE)分离标准蛋白Pmtein Molecular Weiht Marker(Broad)D532S的实验条... 刘勇 王荣 贾正平 高岚 谢华 张爱梅 谢希晖 马骏关键词:无胶筛分 毛细管电泳 蛋白质分离 生物大分子 文献传递 毛细管电泳分离筛分介质的选择 近年来,毛细管电泳(CE)已成为分离生物大分子的重要手段,在分子生物学、分子医学、法医学等领域得到越来越广泛的应用。在CE分离生物大分子过程中,筛分介质的性能直接影响其迁移特性、分离度、读出长度、重现性、注入时间、注入压... 王荣 刘勇 贾正平 高岚 谢华 张强 郭志强文献传递 毛细管电泳分离蛋白质的方法学研究 :建立一种毛细管电泳分离蛋白质的方法。 方法:选用FITC为柱前衍生试剂,PEO为筛分介质,实验室常用缓冲液1×Tris-Boric acid-EDTA(1×TBE)作为电极缓冲液,将筛分介质P... 刘勇 王荣 贾正平 高岚 谢华 张爱梅 谢希晖 马骏关键词:毛细管电泳 聚环氧乙烷 蛋白质分离 荧光试剂 毛细管电泳和聚丙烯酰胺电泳法检测肺癌组织p53基因突变效果分析 被引量:1 2008年 目的筛选检测肺癌组织p53基因突变的优良方法,为临床早期诊断肺癌提供依据。方法分别运用毛细管电泳(CE)与聚丙烯酰胺电泳(PAGE)—限制性片段长度多态性(RFLP)两种方法对38例肺癌及癌旁正常组织p53基因第249位密码子点突变进行检测。结果RFLP-CE可检测到p53基因第249位密码子的野生型26 bp片段,用时<20 m in;RFLP-CE和RFLP-PAGE均能检测到基因突变,对29例非小细胞肺癌组织p53基因第249位密码子检测的突变率分别为31.03%(9/29)、20.69%(6/29),P<0.05。结论RFLP-CE可为大规模进行肺癌的早期诊断提供简便可靠的方法。 辛晓婷 王荣 高岚 贾正平 刘圆圆 刘勇关键词:毛细管电泳 限制性片段长度多态性 P53基因 点突变 影响毛细管电泳分离生物大分子的因素 被引量:2 2009年 目前毛细管电泳在分离方面的应用越来越广泛,但重复性一直是制约其应用的主要问题。随着毛细管电泳技术的发展,影响毛细管电泳结果的因素也发生着变化。本文对影响毛细管电泳分离生物大分子的因素进行综述,希望对使用毛细管电泳的使用者者有所帮助。 刘勇 刘勇 王荣 高岚 贾正平 辛晓婷 谢华关键词:毛细管电泳 影响因素 含有金纳米粒子的筛分介质的CE分离不同长度DNA片段的初步探讨 初步探讨含有金纳米粒子(GNPs)的筛分介质在毛细管电泳(CE)中时不同长度DNX片段的分离。
本文使用聚环氧乙烷(PEO)-金纳米粒子(GNPs)-TBE作为CE筛分介质,用涂层的毛细管柱(37cmx 75μ... 刘勇 王荣 贾正平 谢华 马骏 高岚 辛晓婷关键词:毛细管电泳 金纳米粒子 DNA片段 文献传递 毛细管电泳检测肺癌及癌旁正常组织蛋白质混合物差异 被引量:2 2011年 以建立的毛细管电泳(CE)-激光诱导荧光(LIF)检测蛋白质的方法对提取肺癌及癌旁正常组织蛋白质混合物(变性/活性)差异进行检测.采用异硫氰酸荧光素(FITC)为衍生剂,电泳缓冲液为1×TBE(TBE为Tris-硼酸-EDTA,变性电泳pH 10.0,活性电泳为pH 8.3且含有2 mg/L考马斯亮蓝),分离电压15 kV,柱温15℃,电动进样(10 kV×10 s),激发波长/发射波长=488/520 nm检测时,肺癌及癌旁正常组织蛋白质混合物样品得到较好分离且有明显差异.与目前常用蛋白分析方法:变性SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)以及活性蓝绿温和胶电泳(BN-PAGE)进行比较.BN-PAGE结果显示肺癌组织相比正常组织有较明显蛋白种类差异;SDS-PAGE结果表明一些蛋白质表达量差异也是肺癌及癌旁正常组织的显著差别,且主要集中在20~116 kDa.CE-LIF检测结果与PAGE结果大致相同,且CE-LIF检测蛋白质的灵敏度高于PAGE,能更准确反映肺癌及癌旁正常组织的蛋白质差异.结论是CE-LIF可用于蛋白质差异检测,时间短,效果较好,对活性蛋白质进行分析体现了其优点:可提供较强的动力——电压,及强动力下良好的温度稳定性. 刘勇 刘勇 王荣 高岚 贾正平 谢华 张军莉 马骏 张爱梅关键词:蛋白质组学 毛细管电泳 肺癌 聚丙烯酰胺凝胶电泳 毛细管电泳法检测肺癌p53基因第七外显子的突变 被引量:2 2009年 p53基因点突变在肺癌的发生过程中起重要作用,检测基因点突变的方法学研究将有助于临床准确诊断肺癌。本实验用PCR扩增包含249位密码子的肺癌及癌旁正常组织p53基因第七外显子,扩增样品分别经96℃变性和HaeⅢ酶切处理,以CE-SSCP、CE-RFLP、PAGE-SSCP和PAGE-RFLP对其突变情况进行检测,并从上样量、时间、检出限和检出率4个方面进行比较。PAGE凝胶浓度为15%;CE筛分介质PEO浓度3.0%,pH8.2,电压15kV,温度15℃,λex=488nm,λem=520nm荧光检测。检出率由高到低分别为:CE-SS-CP>PAGE-SSCP>CE-RFLP>PAGE-RFLP。CE-SSCP可作为大规模肺癌早期诊断的简便可靠的方法。 刘勇 刘勇 王荣 高岚 贾正平 辛晓婷 谢华关键词:基因突变 毛细管电泳 聚丙烯酰胺凝胶电泳 单链构象多态性 限制性片段长度多态性 毛细管电泳分离筛分介质的研究进展 :对毛细管电泳分离筛分介质的选择研究进展进行评述。 方法:对文献与本课题组工作进行系统分析。 结果:对筛分介质的研究不仅仅局限于早期单纯性质的研究,已经深入至其分离机理。 结论:结合多学科优势研发... 王荣 刘勇 贾正平 高岚 谢华 张强 郭志强关键词:毛细管电泳