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国家自然科学基金(31371751): 作品数：17 被引量：62H指数：5; 相关作者：倪辉蔡慧农肖安风李利君朱艳冰更多>>; 相关机构：集美大学克莱姆森大学绿麒(厦门)海洋生物科技有限公司更多>>; 发文基金：国家自然科学基金厦门市科技计划项目福建省自然科学基金更多>>; 相关领域：轻工技术与工程生物学化学工程农业科学更多>>

柚苷酶处理对琯溪蜜柚果汁抗氧化活性的影响被引量：4: 2016年; 目的:以琯溪蜜柚果汁为对象,研究柚苷酶处理对柑橘果汁抗氧化活性的影响。方法:用DPPH和·OH自由基的清除能力及Fe3+还原能力评价抗氧化活性,并分析它们与抗坏血酸、总酚、柚皮苷和柚皮素含量的关系。结果:原果汁对照、酶处理对照和酶处理果汁清除DPPH自由基的IC50值分别为18.8,22.4,22.0 g/100 g;清除·OH自由基的IC50值分别为3.5,3.7,3.2 g/100 g;Fe3+还原能力值分别为18.8,14.2,14.3 mg抗坏血酸/100 g;它们的抗坏血酸含量分别为40.2,37.8,34.3 mg/100 g,总酚含量分别为44.4,31.4,38.9 mg/100 g,柚皮苷含量分别为56.9,48.0,0.8 mg/100 g,柚皮素含量分别为0,0,24.3 mg/100 g。抗坏血酸、总酚和柚皮素对琯溪蜜柚果汁的3种抗氧化活性有显著影响;柚皮苷对DPPH自由基清除能力和Fe3+还原能力具有显著影响,而对·OH自由基清除能力的影响不显著。结论:柚苷酶处理能显著增加柑橘果汁·OH自由基清除能力,同时柚苷酶处理过程中的热、光和氧等会引起抗坏血酸和总酚含量降低,从而导致DPPH自由基清除能力和Fe3+还原能力轻微下降。; 张素芳肖安风杨远帆胡阳姜泽东陈峰倪辉; 关键词：柚苷酶琯溪蜜柚果汁抗氧化活性

黑曲霉α-L-鼠李糖苷酶Rha1的二级结构预测及三级结构模拟被引量：3: 2017年; 本文研究了酶的结构,有利于进一步了解酶的功能,通过对α-L-鼠李糖苷酶Rha1二级结构分析及三级结构模拟,为该酶进行理性设计提供基础。采用GORⅢ、PHD等九个二级结构预测方法对Rha1的二级结构进行分析和预测。结果显示,Rha1二级结构为23.51%α-螺旋,29.77%β-折叠,46.71%无规则卷曲,具有一个与GH78家族相似的(α/α)6桶状结构域及两个β三明治折叠片结构域。利用Swiss-Model以单模板建模的方法构建了Rha1的三维结构模型。根据二级结构的结果,将Rha1分为三个结构域,利用Modeller 9.15以多模板分段建模、结构域拼接的方法构建了该酶的三维结构模型,并对其进行能量最小化优化。利用Ramachandran图以及Verify_3D评估对两种方法构建得到的Rha1的三维结构模型进行评价,其中Swiss-Model构建得到的模型未通过评价,Modeller9.15构建得到的Rha1的三维模型结构合理,通过评价。α-L-鼠李糖苷酶Rha1模型的构建为今后深入研究该酶的结构与功能奠定了基础。; 吴喆瑜于越巩建业李利君倪辉; 关键词：生物信息学同源建模

塔宾曲霉固态发酵产物中α-L-鼠李糖苷酶的分离纯化及酶学性质分析被引量：1: 2016年; α-L-鼠李糖苷酶是一种在食品、药品中有重要用途的糖苷酶,但其结构与功能关系尚不明确,限制了优良酶制剂的设计。本文通过硫酸铵分级沉淀、疏水层析和亲和层析从塔宾曲霉固态发酵柚皮产物中分离纯化得到了一种α-L-鼠李糖苷酶,纯化倍数和比活力分别为34和21105 IU/mg,SDS-PAGE测得该酶的分子质量为120 ku;纯化得到的α-L-鼠李糖苷酶最适反应p H为4.0,最适反应温度为50℃,p H稳定性和热稳定性好;Fe^(2+)对酶活有促进作用,Mn^(2+)、Ca^(2+)、Cd^(2+)对酶有抑制作用;该酶可水解柚皮苷,但对芸香苷和对硝基苯酚鼠李糖的转化率较低,不水解杨梅苷和柴胡皂苷C。以上结果表明纯化得到的α-L-鼠李糖苷酶在金属离子影响特性、底物特异性方面具有新颖性,丰富了α-L-鼠李糖苷酶的结构与功能关系研究素材。; 高庭李利君王耸吴喆瑜张文静倪辉; 关键词：固态发酵分离纯化酶学性质

微生物来源α-L-鼠李糖苷酶的分子和结构生物学研究进展被引量：7: 2015年; α-L-鼠李糖苷酶(α-L-rhamnosidase(EC 3.2.1.40))是一种水解酶,分布在GH13、GH28、GH78和GH106家族,其中3种GH78家族的α-L-鼠李糖苷酶具有典型的(α/α)6桶状结构,它能够特异性地水解许多糖苷类物质末端的α-L-鼠李糖基,在食品饮料加工工业和医药业中具有重要的应用价值。介绍了微生物来源的α-L-鼠李糖苷酶的性质及应用,主要阐述了α-L-鼠李糖苷酶基因的克隆、表达及该酶晶体结构方面的研究进展。; 张霞李利君倪辉蔡慧农苏文金; 关键词：基因克隆基因表达晶体结构

海洋细菌NTa发酵产琼胶酶条件的初步优化被引量：4: 2014年; 利用选择性培养基从厦门红树林泥土样品中分离得到一株具有较高琼胶酶活力的海洋细菌NTa,通过16S rRNA分析,将该菌株归属为Stenotrophomonas sp.NTa.对该菌株发酵产琼胶酶的条件进行初步优化,结果表明:菌株NTa产琼胶酶的最佳碳源是琼脂,氮源是酵母浸膏,NaCl的质量分数为5%,在28℃发酵培养40 h,发酵液的酶活力达到1.98 U/mL,比优化前提高了37.35%.; 马芮萍朱艳冰倪辉肖安风蔡慧农; 关键词：琼胶酶 STENOTROPHOMONAS SP 发酵条件

黑曲霉α-L-鼠李糖苷酶与柚皮苷分子动力模拟研究被引量：1: 2019年; α-L-鼠李糖苷酶能够水解柚皮苷生产普鲁宁和L-鼠李糖,可用于柑橘类果汁的脱苦处理。对柚皮苷和黑曲霉α-L-鼠李糖苷酶进行分子对接,采用分子动力模拟和MM-PBSA结合的方法计算对接复合物的结合自由能,并分析了分子间相互作用以及各个残基对结合自由能的贡献。结果表明范德华作用力是黑曲霉α-L-鼠李糖苷酶与柚皮苷结合的主要驱动力,库伦电荷作用和非极性溶剂化能对结合贡献较小。Trp236、Ala340、Ile462、Phe461、Tyr516、Val522、Trp528等是黑曲霉α-L-鼠李糖苷酶和柚皮苷结合过程中形成疏水作用的重要氨基酸残基。在分子动力模拟平衡后的氢键分析中,黑曲霉α-L-鼠李糖苷酶Ser286、Phe465、Pro520残基和柚皮苷共形成了3个稳定的氢键。本研究分析了黑曲霉α-L-鼠李糖苷酶与柚皮苷结合的驱动力,以及结合过程中重要氢键及疏水性残基,为蛋白质工程改造α-L-鼠李糖苷酶提供了靶位。; 巩建业吴喆瑜刘嘉男廖辉李利君倪辉; 关键词：柚皮苷分子对接 MM-PBSA

3种福建省柚子汁挥发性成分及香气分析被引量：13: 2014年; 利用固相微萃取结合气相色谱质谱联用(GC-MS)技术检测了溪蜜柚汁、平和红柚汁、度尾文旦柚汁的挥发性成分,并计算了这3种柚汁中各挥发性成分的香气值.结果显示,溪蜜柚汁、平和红柚汁、度尾文旦柚汁中分别检测出了23种、17种、16种挥发性成分,其中溪蜜柚汁中含量最高的成分为反式-3-己烯-1-醇(765.26μg/L),平和红柚汁中含量最高的成分为正己醛(175.21μg/L),度尾文旦柚汁中含量最高的成分为d-柠檬烯(21.99μg/L).柚汁香气值计算结果显示,溪蜜柚汁香气值较大的成分为1-辛烯-3-醇、正己醛、2-甲基丁酸乙酯等,香气主要表现为蘑菇气味、青草气味、香甜气味等;平和红柚汁香气值较大的成分为正己醛、癸醛、顺式-3-己烯醛、辛醛、芳樟醇等,香气主要具有青草气味、水果气味、柑橘气味、香甜气味等;度尾文旦柚汁香气值较大的成分为癸醛和正己醛,香气主要由水果气味和青草气味组成.; 嵇海峰朱艳冰蔡慧农陈峰杨远帆肖安风; 关键词：固相微萃取气相色谱质谱联用挥发性成分

棘孢曲霉固态发酵柚皮产柚苷酶的条件优化被引量：7: 2015年; 【目的】以柚皮为原料,优化棘孢曲霉利用柑橘加工副产物固态发酵柚苷酶的条件。【方法】采用高效液相色谱法检测酶活力,通过单因素试验考察固水比、装样量、接种量、温度对柚苷酶发酵的影响,用正交试验优化发酵条件。【结果】单因素试验结果的显著性分析表明培养基的固水比、装样量和培养温度对柚苷酶产量有显著性影响,而接种量影响不显著;经正交试验确定的优化条件是:固水比1:1(质量体积比),装样量5 g/250 m L三角瓶,温度为30°C,接种1 m L孢子悬浮液,发酵8 d。在此优化条件下,柚苷酶酶活力为8.19 IU/g干物质,比初始培养基产柚苷酶活力提高7.38倍。【结论】通过对固水比、装样量和发酵温度进行优化,大幅度提高了棘孢曲霉固态发酵柑橘加工副产物的柚苷酶产量,为柚苷酶的生产提供了一种高产发酵工艺。; 王耸刘艳苓姜泽东倪辉蔡慧农肖安风朱艳冰李利君; 关键词：柚苷酶棘孢曲霉柚皮固态发酵发酵条件

采用HS-SPME-GC-MS分析蜂蜜中的5-羟甲基糠醛衍生物: 2022年; 以3种原蜜及其加热浓缩蜂蜜为实验材料,利用顶空固相微萃取联动气质色谱(head space solid phase micro-extraction gas chromatography-mass spectrometry,HS-SPME-GC-MS)分析技术对比分析其中的5-羟甲基糠醛衍生物的含量。结果表明,利用HS-SPME-GC-MS方法从蜂蜜样品中鉴定出3种5-羟甲基糠醛衍生物;3种物质在质量浓度范围内均呈良好的线性关系,相关系数r^(2)>0.990;检出限低于3.33×10^(-2)μg/L,定量限低于3.33μg/L,加标回收率在80.76%~115.5%。研究发现,糠醛在3种加热浓缩蜂蜜中的含量显著高于对应的3种原蜜,而3-甲基-2-戊酮及2-乙基-1-己醇含量在3种加热浓缩蜂蜜与对应原蜜之间没有显著差异。说明,采用HS-SPME-GC-MS法测定蜂蜜中的糠醛含量可以区分原蜜及加热浓缩的蜂蜜。; 陈路芳李丹丹倪辉杨远帆; 关键词：蜂蜜顶空固相微萃取

α-L-鼠李糖苷酶高密度发酵及其固定化: 2018年; 在5 L发酵罐中对α-L-鼠李糖苷酶进行小试发酵,制备酶液;以聚乙烯醇-海藻酸钠为包埋载体,以戊二醛为交联剂对该酶进行固定化。经5 L罐高密度发酵96 h,α-L-鼠李糖苷酶酶活为2 766 U/g,生物量为228g/L。经过固定化后,α-L-鼠李糖苷酶的酶活为20 U/g,酶活回收率为32.88%,固定化α-L-鼠李糖苷酶的最适反应温度为35~50℃,最适反应p H值为4.0,该固定化酶在连续使用6次后酶活仍然保留98.22%。高密度发酵能显著提高酶的产量,同时固定化技术提高了酶的重复利用率,为该酶利用芦丁酶法转化制备异槲皮苷提供了依据。; 刘嘉男巩建业高庭李利君倪辉; 关键词：高密度发酵酶固定化异槲皮苷

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