刘安民
- 作品数：69 被引量：253H指数：9
- 供职机构：中山大学孙逸仙纪念医院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生自动化与计算机技术更多>>
- 靶向MAG基因shRNA慢病毒载体的构建及其对MAG基因表达的沉默被引量：4
- 2013年
- 目的:设计以MAG基因为靶点的短发夹状RNA(shRNA),构建重组慢病毒载体并鉴定此RNA干扰体系对MAG基因表达的影响。方法:将3条靶向大鼠MAG基因的shRNA片段插入至慢病毒载体pWPI,与pCDNA3-MAG-FLAG质粒用Lipofectamine 2000共转染293T细胞,Western blotting法鉴定出最有效的shRNA。此重组质粒与pAX2和pMD2G经293T细胞包装后,产生的重组慢病毒感染少突胶质细胞,48 h后Western blotting法检测MAG蛋白的表达情况。结果:经双酶切后测序鉴定,构建了MAG shRNA慢病毒载体pWPI-MAG,鉴定出shRNA-2为最为有效的shRNA。重组慢病毒能明显抑制少突胶质细胞中MAG的表达。结论:慢病毒介导的shRNA干扰技术可特异性阻断MAG的表达,为进一步探讨MAG特异性shRNA治疗神经系统髓鞘损伤奠定了基础。
- 陈舒罗铭蔡望青李方成何志威刘安民
- 关键词：短发夹状RNA慢病毒
- 原发性巨大骶骨肿瘤的手术治疗被引量：1
- 2006年
- 目的探讨骶骨肿瘤手术治疗的方法。方法分析5例巨大骶骨肿瘤患者的手术治疗方式、术中出血、骶神经保护和骶骨重建等问题。结果5例患者通过适当的手术方法均得到肿瘤全切,术中出血量较少,大小便功能得到有效保护,术后骶骨-骨盆稳定性良好。结论恰当的手术方式、术前或术中行栓塞治疗、术中注意保护骶神经有利于提高骶骨肿瘤的治疗效果。全骶骨切除术后腰椎和骨盆内固定术有利于保持腰椎及骨盆的稳定性。
- 李方成刘安民蔡望青闵军宋卫东
- 关键词：骶骨肿瘤骶神经手术
- PDIA4基因沉默对胶质瘤细胞凋亡的影响被引量：1
- 2021年
- 目的探讨蛋白二硫键异构酶家族成员4(PDIA4)基因在胶质瘤细胞中的表达及对细胞凋亡的影响。方法下载并分析CGGA数据库RNAseq数据;收集人脑胶质瘤细胞系U251、U87和星形胶质细胞HA1800,用RT-qPCR法检测细胞系中的PDIA4表达水平;用siRNA转染U251细胞,沉默PDIA4的细胞株为si#768组和si#1829组,未转染为阴性对照组,转染siNC为空白对照组;用阿尔玛蓝(alarma blue)法、克隆形成实验检测转染细胞的增殖活力,流式细胞术检测细胞凋亡率;用蛋白免疫印记实验检测细胞中的cleaved-caspase3、cleaved-caspase 7蛋白表达水平。结果CGGA数据库中,PDIA4在不同级别胶质瘤中的表达水平不同(P<0.05),PDIA4高表达组较低表达组生存预后较差(Log-rank=264.32,P<0.001);与HA1800相比,PDIA4在U251和U87中相对表达量升高(F=58.44,P<0.05);与空白组、阴性对照组相比,si#768组和si#1829组增殖和克隆集落形成能力受到抑制(均P<0.01),凋亡率(17.67±0.11%、19.50±9.30%vs.3.72±7.11%、6.53±0.13%,F=51.06,P<0.05)明显升高;与阴性对照组相比,si#768组和si#1829组cleaved-caspase 7蛋白表达分别上调218.53%与169.68%,差异具有统计学意义(F=12.61,P<0.05)。结论沉默PDIA4基因可能通过激活caspase通路促进胶质瘤细胞凋亡。
- 朱传华谢琳刘安民
- 关键词：胶质瘤凋亡
- 头颅硬膜外增生性筋膜炎一例被引量：1
- 2003年
- 刘安民邓跃飞钟志光林吉惠
- 关键词：误诊开颅手术手术治疗
- 法舒地尔‑硫辛酸二联体的合成及其应用
- 本发明涉及合成法舒地尔‑硫辛酸二联体。具体结构如式(I)所示。本发明还提供上述二联体的合成路线。所述二联体可一定程度上提高法舒地尔血脑屏障透过率和神经保护作用，使其具有多靶点抗神经退行性疾病的作用。
- 皮荣标陈美惠文石军刘奇周世有刘安民刘培庆
- 文献传递
- 脑膜瘤129例的诊断及手术治疗分析
- 2001年
- 目的：探讨脑膜瘤早期诊断和提高手术疗效的方法。 方法：对我院1983年至2000年11月收治的129例脑膜瘤的临床表现﹑病理分型﹑影像学特征及手术治疗结果等结合文献复习进行回顾性分析。 结果：行脑膜瘤全切除术86例，次全切除术20例，大部分切除术12例，部分切除术11例。治愈84例，好转28例，加重6例，无变化3例，死亡8例（6．2％），治愈及好转率为86．8％。 结论：早期诊断﹑争取完全切除脑膜瘤是提高治愈率﹑降低病死率的关键；磁共振在显示颅底脑膜瘤及肿瘤与矢状窦及颅内重要血管毗邻关系方面优于CT；体积较大﹑血运丰富的脑膜瘤必须行脑血管造影或DSA检查。
- 钟志光邓跃飞刘安民蔡望青钟伟健谭平国陈由芝林吉惠
- 关键词：脑膜瘤外科手术CT磁共振成像
- 人参皂甙Rb1对脑缺血再灌注损伤半影区葡萄糖转运体1表达的影响被引量：14
- 2005年
- 目的 观察大鼠局灶性脑缺血 /再灌注后脑梗死体积的变化和葡萄糖转运体 1(GLUT1)在缺血半影区的表达情况以及人参皂甙Rb1对其的影响。方法 雄性成年SD大鼠 42只 ,随机分成 3组 :假手术组、对照组和人参皂甙Rb1干预组。用线栓法复制大脑中动脉阻塞 (MA CO)模型 ,在脑缺血 1h再灌注 5h时取材 ,用氯化三苯基四唑氮 (TTC)染色后 ,全自动图像分析系统进行图像分析脑梗死体积比 ;逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)测定GLUT1mRNA水平的变化 ;用免疫组织化学半定量测定GLUT1蛋白水平的变化。结果 假手术组、对照组和人参皂甙Rb1干预组的梗死体积百分比分别为 0、(0 .0 4± 0 .0 1) %和 (0 .0 2± 0 .0 1) % ;3组半影区的GLUT1mR NA水平分别是 (0 .2 3± 0 .14 )、(0 .5 5± 0 .0 4)和 (0 .79± 0 .19) ;蛋白表达的PU值分别为 (5 .1±1.2 )、(13 .1± 1.7)和 (19.0± 1.9)。结论 人参皂甙Rb1明显缩小缺血再灌注损伤后脑梗死的体积 ,Rb1通过上调半影区GLUT1表达以维持脑组织的能量供给可能是其发挥脑保护作用的机制之一。
- 李方成陶宗玉刘安民李军亮吴中华林吉惠
- 关键词：人参皂甙RB1GLUT1葡萄糖转运体脑缺血再灌注损伤逆转录一聚合酶链反应
- MiR-125a-3p通过MAPK信号通路影响胶质瘤细胞的增殖及凋亡的实验研究被引量：6
- 2018年
- 目的 探讨miR-125a-3p对胶质瘤细胞增殖及凋亡的影响及其在丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路中的作用.方法 (1)比较肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库中565例胶质瘤组织和10例正常脑组织中miR-125a-3p的表达.(2)收集中山大学孙逸仙纪念医院神经外科自2015年4月至2018年4月手术切除并经病理检查证实的胶质瘤标本30例,其中低级别脑胶质瘤7例,高级别胶质瘤23例.另外收集同期因手术入路需要和颅脑外伤切除的正常脑组织标本8例.应用反转录-实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测脑胶质瘤组织和正常脑组织中miR-125a-3p的表达.(3)体外培养正常胶质细胞HA1800及人脑胶质瘤细胞U251、U373、U87、U138、T98G,72 h后应用RT-qPCR检测6组细胞miR-125a-3p的表达;(4)取对数生长期的U251、U373细胞,分为无义序列组和miR-125a-3p模拟物组,应用LipofectamineTM 2000分别转染无义序列和miR-125a-3p模拟物.转染后72 h应用RT-qPCR检测2组细胞miR-125a-3p的表达,克隆形成实验检测2组细胞的增殖情况,流式细胞术检测2组细胞的凋亡情况,Western blotting检测2组细胞凋亡相关蛋白和MAPK信号通路相关蛋白的表达.结果 (1)TCGA数据库中,胶质瘤组织中miR-125a-3p的表达低于正常脑组织,差异有统计学意义(P<0.05).(2)临床收集的正常脑组织、低级别胶质瘤、高级别胶质瘤标本中miR-125a-3p的表达依次降低,差异有统计学意义(P<0.05);(3)与HA1800细胞比较,U251、U373、U87、U138、T98G细胞中miR-125a-3p的表达均降低,差异有统计学意义(P<0.05),其中U251和U373细胞中miR-125a-3p表达下降得最明显.(4)与无义序列组比较,miR-125a-3p模拟物组U251和U373细胞中miR-125a-3p的表达增加,克隆形成率降低,凋亡率增加,凋亡相关蛋白活化的半胱氨酸蛋白酶(cleaved-caspase)-3、cleaved-caspase-9和cleaved-caspase-7的表达均增加,磷酸化(p)-P38/MAPK蛋白的表达增加,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 miR-125a-3p在脑�
- 谢琳黄佐於欧阳乐平何明亮刘家豪刘安民
- 关键词：神经胶质瘤细胞增殖丝裂原活化蛋白激酶
- 脑星形细胞瘤Fas和FasL的表达及细胞凋亡与肿瘤恶性程度相互关系的初步探讨被引量：7
- 2001年
- 目的:对脑星形细胞瘤Fas和FasL的表达水平及细胞凋亡与肿瘤恶性程度之间的关系进行初步探讨。方法:对41例脑星形细胞瘤标本采用免疫组化法(S-P法)检测Fas和FasL的表达率及表达强度,采用TUNEL法检测凋亡指数。结果:本组星形细胞瘤Fas和FasL的表达率分别为65.9%和78.0%;Fas和FasL的表达率与其病理分级有关(χ2分别为17.552和10.749,P均<0.05);Fas和FasL的表达强度也与其病理分级呈负相关(r分别为-0.660和-0.506,P均<0.01)。本组星形细胞瘤的凋亡指数为0.51～1.57,凋亡指数与肿瘤病理分级有关(F=18.828,P<0.05)。结论:本组大部分星形细胞瘤均有Fas和FasL的表达,表达率和表达强度均随肿瘤恶性程度增高而明显下降;星形细胞瘤的凋亡指数随肿瘤恶性程度增高而明显增高。
- 钟志光刘安民邓跃飞谭平国蔡望青李方成钟伟健陈由芝林吉惠
- 关键词：脑星形细胞瘤FASFASL细胞凋亡肿瘤恶性程度
- 葡萄糖转运体3在大鼠脑缺血/再灌注后海马中的表达被引量：1
- 2005年
- 【目的】研究大鼠局灶性脑缺血不同缺血时间和不同再灌注时间的脑梗死体积比、海马区葡萄糖转运体3(GLUT3)转录水平和蛋白水平的表达。【方法】健康雄性 SD(Sprague-Dawley)大鼠随机分成3组:①缺血1h 再灌注组(MCAO1h/R)28只;②缺血3h 再灌注组(MCAO3h/R)24只;③假手术组(pseudo operation)4只。用线栓法复制大鼠局灶性脑缺血模型,用 Kontron IBAS2.5全自动图像分析系统检测脑梗死体积比;剥取海马区皮质组织,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),测定 GLUT3 mRNA 水平的变化;用免疫组织化学半定量测定 GLUT3蛋白水平的变化。【结果】脑缺血1h 后再灌注(MCAO1h/R)较缺血3h 再灌注(MCAO3h/R)脑梗死体积明显减小。MCAO1h/R 组:GLUT3 mRNA 在6h 有1次升高,但以后各时相均低于正常对照组。MCAO3h/R 组:各时间点 GLUT3 mRNA 的表达均低于正常对照组,在72h、1周不能测到GLUT3 mRNA 的表达。GLUT3蛋白水平的表达与 mRNA 相符合。MCAO3h/R 组与 MCAO1h/R 组在相应的各时间点比较,GLUT3 mRNA 降低幅度差异有统计学意义。【结论】GLUT3在缺血海马区的表达下降,可能与脑缺血再灌注损伤后神经元退变或死亡有关。
- 李方成陶宗玉刘安民李军亮吴中华林吉惠
- 关键词：脑缺血-再灌注RT-PCR
