- 大肠杆菌ispB基因的克隆及鉴定被引量：7
- 2001年
- ispB基因编码八聚异戊二烯焦磷酸合成酶 ,是决定大肠杆菌CoQ8生物合成的关键因子。克隆ispB基因是构建产辅酶Q10 基因工程菌的前提。本实验从野生型大肠杆菌MC4 10 0出发 ,以 pUC18为载体 ,构建了大肠杆菌SspI限制性基因文库。筛选得到目的重组子 pXF98,其酶切鉴定图谱与实验期望值吻合。测序结果表明 。
- 周雪峰吴海珍范怡张惠展
- 关键词：重组质粒基因文库鸟枪法大肠杆菌基因克隆
- 大肠杆菌ispB基因的克隆、鉴定及其同源重组的研究
- 该课题构建了大肠杆菌野生株MC4100的限制性基因文库Ⅰ、Ⅱ,从中筛选 得到重组制质粒pXF98.测序结果证实其外源DNA片段包含ispB.体外灭活ispB并构建不具复制能力的环状DNA分子pTIK,转化EcoliJM8...
- 周雪峰
- 关键词：大肠杆菌同源重组基因文库基因表达
- 氧化葡萄糖杆菌ddsA基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达被引量：6
- 2002年
- 聚十异戊烯焦磷酸合成酶催化异戊烯二磷酸与丙烯基二磷酸发生连续的缩合反应生成聚十异戊烯焦磷酸 ,构成辅酶 Q1 0 的侧链。将氧化葡糖杆菌 ( Gluconobacter oxydans)的染色体 DNA用 Eco RI酶切 ,回收 5 .0 kb左右的片段为模板 ,通过 PCR扩增得到了聚十异戊烯焦磷酸合成酶基因 ( dds A)。测序分析表明该基因有一个 95 1 bp的开放型阅读框架 ,氨基酸序列与其他聚戊烯焦磷酸合成酶具有高度同源性 ( 30 %～ 5 0 %)。将 dds A基因克隆到 p UC1 9载体上得到 p UC- GZH表达质粒 ,将其转入大肠杆菌 JM83宿主 ,经 IPTG诱导表达融合蛋白 ,在聚丙烯酰胺凝胶电泳 ( SDS-PAGE)的
- 张安吴海珍周雪峰张惠展张嗣良
- 关键词：克隆大肠杆菌
- 大肠杆菌caiAB基因的克隆与表达被引量：1
- 2002年
- 从E.coli MC4100菌株的染色体DNA中利用鸟枪法克隆含编码巴豆甜菜碱还原酶和L-肉碱脱水酶的caiAB基因片段,并经序列分析验证。由重组质粒pZJD-1480亚克隆得到pT7-A以及pT7-B重组表达质粒,后者转入E.coliBL21（DE3）菌株中,经异丙基硫代半乳糖苷（IPT）诱导,在聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）上分子质量为40ku附近可见明显的表达蛋白带。
- 段世伟季岷岚周雪峰张惠展
- 关键词：大肠杆菌基因表达鸟枪法肉碱
