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与α1-肾上腺素受体相互作用的“非G蛋白”的筛选及其生理意义: 目的:α-肾上腺素受体(adrenergic receptor,AR)各亚型在心血管系统具有广泛的分布和重要的生理作用,它们不仅可以在心血管系统直接引起不同的生理和病理变化,而且对其他受体的功能调节也不尽相同。近年来的研...; 徐琦张坦陈光慧韩启德张幼怡; 文献传递

酵母中与α_1-肾上腺素受体C末端相互作用的蛋白质: 2003年; 张坦徐琦陈凤荣韩启德张幼怡; 关键词：酵母 Α1-肾上腺素受体 C末端相互作用蛋白质

肾上腺素受体的生物进化被引量：7: 2002年; 肾上腺素受体在生物进化的过程中最先出现的是β-肾上腺素受体,此后才出现了α-肾上腺素受体。肾上腺素受体亚型的多样化分化是伴随着大脑神经系统的发育而进行的,提示肾上腺素受体的各亚型的进一步分化很有可能是对高级神经系统的精细调节功能不断趋于完善的一种适应,同时也预示可能还有其它肾上腺素受体亚型存在。; 张坦陈凤荣张幼怡; 关键词：肾上腺素受体生物进化受体亚型分化

α1A-肾上腺素受体与细丝蛋白-C的相互作用研究: 目的:研究α-肾上腺素受体(α-AR)与细丝蛋白-C(filamin-C,FLN-C)的相互作用及其生理意义。方法:在人胚肾293A细胞(Human embryonic cell 293A,HEK293A)中采用激光共聚...; 张坦徐琦陈凤荣韩启德张幼怡; 文献传递

HEK293细胞中细丝蛋白-C对α_(1A)-肾上腺素受体介导细胞外信号调节激酶磷酸化作用的影响: 2004年; 目的　寻找与α1A 肾上腺素受体 (α1A AR)相互作用的胞浆内非G蛋白 ,研究蛋白对受体信号转导的影响。方法　应用酵母双杂交技术 ,以人α1A AR胞浆内C末端 (α1A AR CT)为诱饵 ,筛选人脑cDNA文库 ,用 5 溴 4 氯 3 吲哚半乳糖苷 (X Gal)定性分析及邻硝基苯基 β D 半乳糖苷 (ONPG)定量分析对筛选出的阳性克隆细丝蛋白 C(FLNC)进行确证。采用脂质体转染及蛋白免疫印迹技术探讨人胚胎肾 2 93(HEK2 93)细胞中FLNC对α1A AR信号转导通路的影响。结果　①缺陷培养基筛选出FLNC的C末端部分片段可以与α1A AR CT在酵母中结合。②X Gal定性分析中 ,FLNC与α1A AR CT的共转子菌落 6h即呈现蓝色 ,而对照菌落颜色无变化 ;经ONPG定量分析发现 ,FLNC与α1A AR CT的共转子中 β 半乳糖苷酶的活性大约是对照的 2～ 3倍(P <0 .0 1)。③编码FLNC的C末端片段的质粒瞬时转染于稳定表达全长α1A AR的HEK2 93细胞中 ,可以明显增强去氧肾上腺素 ( 10 μmol·L- 1,30min)激动α1A AR介导的细胞外信号调节激酶 (ERK1/ 2 )磷酸化作用。结论　FLNC的C末端部分片段可以与α1A AR CT在酵母中结合 ,并且增强HEK2 93细胞中α1A AR介导ERK1/; 张坦徐琦宋峣徐明陈凤荣韩启德张幼怡; 关键词：细丝蛋白

α_(1A)-肾上腺素受体与骨形成蛋白-1片段在人胚肾293细胞中的结合被引量：2: 2003年; 用酵母双杂交方法发现骨形成蛋白-1(bone morphogenetic protein-1,BMP-1)的片段可以与α1A-肾上腺素受体(adrenergic receptor,AR)的细胞内游离C末端结合。进一步探讨了二者在哺乳动物表达系统人胚肾293细胞(human embryonic cell 293,HEK293)中的相互作用。采用PCR方法构建含BMP-1片段eDNA的真核表达质粒PCP3HA,将其与含全长人α1A-AR eDNA的质粒PDT-α1A分别或共同转染HEK293细胞,用免疫印迹法检测到α1A-AR和BMP-1在HEK293细胞有相应的蛋白表达。用酶联免疫吸附实验对免疫印迹鉴定过的细胞裂解液进行检测,观察到空白对照组,单独转染PDTα1A-和单独转染PCP3HA的细胞,OD490值分别为0.034±0.027、0.042±0.019、0.030±0.0096,三者之间无显著性差异。共转染PDT-α1A和PCP3HA的细胞,OD490值为0.57±0.12,较其它三组具有显著性差异(均P<0.001)。免疫共沉淀结果显示,单独转染PDT-α1A或PCP3HA的细胞,免疫沉淀产物中均不能检测到BMP-1片段,只有共转染PDT-α1A和PCP3HA的细胞,在其免疫沉淀产物中能检测到BMP-1片段。ELISA和免疫沉淀结果均表明α1A-AR与BMP-1的片段在HEK293细胞中存在蛋白水平的相互作用。; 徐琦张坦韩启德张幼怡; 关键词：酶联免疫吸附实验

Filamin-C蛋白与α1A肾上腺素受体相互作用及功能研究: 目的探索心肌特异性表达蛋白 Filamin-C 与α肾上腺素受体的相互作用及其功能意义。方法利用酵母双杂交、免疫共沉淀、GST-pulldown 等方法明确 Filamin-C 与α肾上腺素受体之间的相互作用,继而利用激...; 蔡元斌张坦李子健张幼怡; 文献传递

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