张志坚
- 作品数：18 被引量：33H指数：4
- 供职机构：郑州大学基础医学院更多>>
- 发文基金：河南省医学科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- CTX-M-38型超广谱β-内酰胺酶的表达、定位及其抗药活性分析被引量：3
- 2009年
- 目的:体外表达CTX-M-38型超广谱β-内酰胺酶(ESBL),并明确表达产物的分布及其抗药活性。方法:收集2006—2007年分离的产ESBL大肠埃希菌46株,采用PCR技术克隆目的基因,基因重组技术构建pET28a-CTX-M-38质粒,用BL21大肠杆菌作为宿主菌进行表达,测定培养基上清及菌体裂解液酶活性检测所表达ESBL的分布;采用液体稀释法检测所表达ESBL抗药活性。结果:PCR扩增条带约在900bp位置处;测序结果与预测CTX-M-38相一致;菌体裂解液抗药活性较强;转化子对青霉素类、头孢一代、二代及多数三代药物均耐药;对碳青酶烯类药物稳定敏感;对头孢他啶及氨曲南体外敏感;对酶抑制剂除哌拉西林/他唑巴坦敏感外,其余表现为耐药;对庆大霉素、美满霉素、环丙沙星及左氧氟沙星亦具有耐药性。结论:CTX-M-38型ESBL表达成功,表达产物主要分布于表达菌体内,具有广泛抗药活性。
- 郭小兵张志坚阎志勇张钦宪
- 关键词：Β内酰胺酶类临床对照试验
- 郑州大学第一附属医院临床分离鲍曼不动杆菌耐药性变迁被引量：5
- 2015年
- 目的了解郑州大学第一附属医院临床分离鲍曼不动杆菌分布及耐药性变迁特征。方法收集2011年1月—2014年10月该院细菌室分离的不重复鲍曼不动杆菌5 992株,分析探讨其分布特征、碳青霉烯酶产酶率及耐药性变迁规律。结果 2011—2014年度鲍曼不动杆菌占逐年总分离率分别为13.1%、14.7%、15.7%和12.2%;逐年细菌数排序居第3、3、2、4;菌株主要分离自痰(91.1%)和血液标本(3.6%),主要分布于重症监护病房(ICU)(77.3%)和呼吸科(10.4%)。该菌对碳青霉烯类药物耐药率逐年上升;除了米诺环素、多黏菌素B及头孢哌酮-舒巴坦外,对其他药物耐药率均超过50%。结论鲍曼不动杆菌的多重/广泛耐药细菌是该院临床用药的主要问题。米诺环素、多黏菌素B具有较好的抗菌作用,可以作为经验用药的候选药物。
- 郭小兵曹在秋代志峰闫虹李远张志坚
- 关键词：鲍曼不动杆菌耐药性碳青霉烯酶
- 郑州某医院多重耐药大肠埃希菌耐药性分析被引量：4
- 2010年
- 苟建军张志坚郭小兵
- 关键词：多重耐药大肠埃希菌最小抑菌浓度
- 河南地区大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶的研究
- 大肠埃希菌是目前社区获得性及院内感染的主要病原菌之一,在实验室检测过程中,有着较高的分离率。从临床上看,其临床感染类型多样,感染部位不一。对其所致感染治疗效果如何,直接影响到患者的预后及病程。基于此点,各地针对大肠埃希菌...
- 张志坚
- 关键词：大肠埃希菌质粒谱SHVCTX-MOXA
- 文献传递
- CTX-M-14型超广谱β-内酰胺酶原核表达载体的构建及其抗药活性分析被引量：2
- 2009年
- 目的分析头孢噻肟—水解酶-14(CTX-M-14)型超广谱β-内酰胺酶(ESBL)型菌抗药活性,为临床治疗提供参考。方法收集分离产ESBL大肠埃希菌46株,采用PCR克隆目的基因,采用基因重组技术构建pET28a-CTX-M-14质粒,采用BL21大肠埃希菌作为宿主菌进行表达,采用液体稀释法检测其抗药活性。结果PCR扩增条带在约900bp位置处,序列分析结果显示其与目的基因符合;转化子对青霉素类、头孢一、二代及三代中头孢噻肟、头孢曲松耐药,对庆大霉素、四环素、喹诺酮类药物、碳青酶烯类敏感;对头孢他啶体外试验敏感,对加有酶抑制剂的抗生素稳定敏感。结论本研究成功构建了CTX-M-14型ESBL原核表达载体,且具有广泛抗药活性;此为临床合理选择治疗药物提供了理论依据。
- 郭小兵张志坚阎志勇张钦宪
- 关键词：聚合酶链式反应
- 产超广谱β-内酰胺酶菌300株去巯基型基因检测被引量：1
- 2008年
- 张志坚郭小兵张钦宪
- 关键词：超广谱Β-内酰胺酶PCR
- 郑州地区大肠埃希菌中CTX-M型超广谱β-内酰胺酶的基因型分布被引量：4
- 2009年
- 目的了解郑州地区CTX-M型ESBLs在大肠埃希菌中的基因型分布。方法收集郑州大学第一、三附属医院2006-2007年临床分离产ESBLs不重复大肠埃希菌138株,小量提取菌株质粒,依据CTX-M型ESBLs基因同源性分析结果,设计4对简并引物,采用各对引物对所提质粒进行PCR扩增,阳性扩增产物纯化后直接测序,测序结果与blaCTX-M比对后明确流行型别。结果138株产ESBLs大肠埃希菌中共检出CTX-M型ESBLs80株,具有单一CTX-M型别者53株,同时具有两种CTX-M型别者25株,3种CTX-M型别者2株;CTX-M型ESBLs中,CTX-M-1(43株)、CTX-M-14(56株)、CTX-M-25(7株)及CTX-M-38(5株)。结论郑州地区大肠埃希菌CTX-M型ESBLs以CTX-M14型为主,且同一菌株可有多种CTX-M酶型。
- 张志坚郭小兵阎志勇张钦宪
- 关键词：CTX-M超广谱Β-内酰胺酶
- PCR介导的ret基因体外定点突变被引量：3
- 2007年
- 目的:利用PCR技术介导ret基因cDNA上第2753位碱基的体外定点突变。方法:利用PCR技术进行定点突变,采用DpnⅠ进行原始模板消化。经Amp抗性、PCR技术初步筛选,通过序列分析进行确证。结果:Amp抗性及PCR筛选结果均为阳性;序列分析提示,2753处碱基由T→C。结论:成功完成了ret基因的体外定点突变。
- 郭小兵张志坚张钦宪
- 关键词：RET基因PCR定点突变
- S1P与T淋巴细胞在主要免疫器官间迁移的关系
- 2023年
- 免疫应答由多种免疫细胞和免疫分子共同参与,受多种相关分子和细胞信号精确调控[1]。T细胞通过血液和淋巴循环在各个免疫器官之间迁移,在维持人体正常生理稳态及疾病发生发展过程中发挥重要作用[2]。T细胞在发育分化、成熟定居、活化和发挥效应等过程中,需要经历从骨髓到胸腺,从胸腺到淋巴结和脾脏等外周免疫器官,以及再循环等多次迁移。血管和淋巴管是T细胞迁移的通道[3-4],其中血管迁移机制已有较多的研究,但淋巴管运输的相关研究尚少。
- 李怡珂张伟卫王鹏轩小燕杜英张志坚雷宁静
- 关键词：T淋巴细胞细胞迁移
- 产ESBL大肠埃希菌质粒谱与耐药性分析被引量：2
- 2008年
- 目的：探讨产超广谱β-内酰胺酶（ESBL）大肠埃希菌质粒谱与耐药性的关系.方法：收集产ESBL大肠埃希菌100株,采用质粒提取试剂盒小量抽提质粒,琼脂糖凝胶电泳观察质粒条带,采用E-test试验检测最小抑菌浓度（MIC）,结果按照美国临床与实验室标准化协会（CLSI）规定标准执行.结果：所有菌株均含有1～5条质粒条带不等,分子质量大小依次约为21000,9000,7000,3000,2500bp.相同质粒条带菌株的质粒在电泳时条带分布一致.不同质粒条带的菌株均对青霉素类、头孢一、二代及三代中头孢噻肟、头孢曲松耐药（MIC≥256mg/L）,对头孢他啶表现为体外试验敏感（MIC≤4mg/L）,对四代头孢菌素头孢吡肟表现不一（MIC值分别为32,48,48,16,64mg/L）.对阿米卡星、亚胺培南对碳青酶烯类抗菌素稳定敏感（MIC分别为≤12,0.25mg/L）.各组间均P〉0.5/0.9,表明对抗菌药物耐药性无差异.结论：产ESBLs大肠埃希菌质粒谱的类别和数量与耐药性相关性不大.
- 张志坚郭小兵张钦宪
- 关键词：内酰胺酶类质粒
