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赵晓红: 作品数：13 被引量：39H指数：4; 供职机构：海南省妇幼保健院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金湖南省高校创新平台开放基金湖南省教育厅科研基金更多>>; 相关领域：医药卫生更多>>

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RORα高表达对人胃癌MGC803细胞增殖与迁移侵袭的影响被引量：6: 2016年; 目的观察RORα高表达对MGC803细胞增殖与迁移侵袭的影响。方法构建高表达RORα人胃癌MGC803细胞。Real-time PCR或RT-PCR和Western blot检测RORα、MMP-9与TIMP3 m RNA和蛋白表达。MTT、流式细胞术、迁移和侵袭实验检测RORα高表达对MGC803细胞增殖、细胞周期、迁移和侵袭能力的影响。结果 RORα高表达MGC803细胞RORαm RNA和蛋白表达显著上调。在48、72与96 h,RORα高表达细胞的增殖活性明显低于对照组和空载体组(P<0.05)。RORα高表达G_2/M期细胞明显高于对照组和空载体组(P<0.05)。高表达组细胞的迁移距离较对照组与空载体组明显减少(P<0.05)。高表达组穿膜细胞数较对照组与空载体组明显减少(P<0.05)。RORα高表达可明显下调MMP-9和上调TIMP3m RNA与蛋白。结论成功构建RORα高表达MGC803细胞,RORα高表达可抑制MGC803细胞增殖与迁移侵袭,将细胞阻滞于G_2/M期,其机制可能与下调MMP-9和上调TIMP3有关。; 赵晓红刘芳向姝霖夏红曾希苏波凌晖苏琦; 关键词：人胃癌MGC803细胞增殖

RORα高表达抑制人胃癌MGC803细胞Wnt／β-catenin信号通路靶基因表达被引量：13: 2016年; 该文探讨了RORα(retinoid acid receptor related orphan receptorα)高表达对人胃癌MGC803细胞Wnt/β-catenin信号通路靶基因的作用。采用MTT检测了MGC803细胞增殖。采用RT-PCR、Western blot与免疫共沉淀检测了Wnt/β-catenin信号通路相关分子与靶基因表达。荧光素酶报告基因方法检测c-Myc基因启动子活性。MTT结果显示,RORα高表达人胃癌MGC803细胞的增殖能力较对照组明显减弱(P<0.05)。RT-PCR与Western blot结果显示,RORα高表达组Wnt1m RNA与蛋白质水平较对照组下调(P<0.05),而β-catenin m RNA与蛋白质水平无差异(P>0.05)。免疫共沉淀结果显示,RORα高表达组RORα与β-catenin结合明显增加(P<0.05)。RORα高表达可显著下调核内β-catenin水平(P<0.05),同时可显著下调TCF-4(T cell factor-4)蛋白质水平(P<0.05)。RORα高表达可显著下调Axin、c-Myc、c-Jun m RNA与蛋白质水平(P<0.05)。荧光素酶报告基因实验结果显示,RORα高表达c-Myc启动子活性明显降低(P<0.05)。以上结果表明,RORα高表达可通过调控Wnt/β-catenin信号通路相关分子基因表达来抑制人胃癌细胞增殖。; 苏坚赵晓红刘芳夏红苏波曾希凌晖苏琦; 关键词：人胃癌MGC803细胞增殖 WNT/Β-CATENIN信号通路靶基因

DADS上调RORα抑制人胃癌MGC803细胞增殖与迁移侵袭被引量：3: 2016年; 目的研究二烯丙基二硫(DADS)是否通过上调维甲酸相关孤核受体α(RORα)表达抑制人胃癌MGC803细胞增殖、细胞周期与迁移侵袭。方法实验组分为6组,对照组,空载体组,RORα干扰组(miRRORα),DADS组,空载体联合DADS组,miR-RORα联合DADS组。Western blot检测RORα、MMP-9与TIMP3蛋白表达。MTT、流式细胞术、迁移和侵袭实验分别检测细胞增殖、细胞周期与迁移侵袭的改变。结果 DADS处理细胞24 h后,与对照组和空载体组比较,DADS上调RORα和TIMP3、下调MMP-9蛋白表达。干扰组较对照组与空载体组RORα表达明显下调。与DADS处理组比较,干扰RORα表达上调MMP-9、下调TIMP3蛋白表达。MTT实验显示,DADS抑制MGC803细胞增殖,而干扰RORα表达促进增殖。流式细胞术显示,DADS诱导G2/M期阻滞,下调RORα削弱其作用。迁移实验显示,DADS处理组迁移距离明显减少。RORα干扰组迁移距离明显高于对照组和空载体组。侵袭实验显示,DADS处理组较对照组和空载体组穿膜细胞明显减少。干扰组穿膜细胞明显多于对照组和空载体组。干扰RORα表达降低DADS对细胞迁移和侵袭的抑制作用。结论 DADS上调TIMP3表达,下调MMP-9表达,抑制MGC803细胞增殖与迁移侵袭,其作用机制与上调RORα表达有关。; 苏波向姝霖苏坚赵晓红夏红刘芳凌晖苏琦; 关键词：二烯丙基二硫人胃癌细胞增殖

沉默RORα体内外对人胃癌MGC803细胞上皮-间质转化的影响被引量：2: 2017年; 目的在构建RORα沉默人胃癌MGC803细胞的基础上,探讨沉默RORα对MGC803细胞上皮-间质转化(EMT)的影响。方法 4周龄雄性裸鼠,分为MGC803细胞组与RORα沉默组,每组5只。相差显微镜观察RORα沉默MGC803细胞形态的改变。RT-PCR、Western blot、免疫荧光与免疫组化检测EMT相关分子表达。裸鼠实验检测沉默RORα对移植瘤生长的影响。结果相差显微镜显示,沉默RORα细胞大小与形状差异更明显,纤维母细胞样长梭形细胞增多,异型性更为显著。Western blot显示,沉默RORα可明显上调MGC803细胞Snail蛋白表达(P<0.05)。RT-PCR与Western blot检测显示,沉默RORα可上调Snail与Vimentin和下调E-cadherin mRNA与蛋白表达。免疫荧光显示,RORα沉默细胞Snail与Vimentin阳性表达较MGC803细胞组明显增强,而E-cadherin阳性表达显著减弱。裸鼠移植瘤实验显示,RORα沉默组移植瘤较对照组生长加快(P<0.05),RORα沉默组移植瘤体重较对照组增加14.12%(P<0.05)。RORα沉默组移植瘤组织的Ki-67、CD34与Vimentin阳性表达较MGC803细胞组明显增加,而E-cadherin阳性表达明显降低。结论沉默RORα可体内外促进人胃癌MGC803细胞EMT。; 刘芳赵晓红夏红苏坚曾希苏波凌晖苏琦; 关键词：人胃癌MGC803细胞 SNAIL VIMENTIN

DADS上调RORα抑制人胃癌MGC803细胞增殖与迁移侵袭作用: 目的：通过构建高表达维甲酸相关孤核受体α（Retinoid-related orphan receptor A, RORα）人胃癌MGC803细胞，观察RORα表达在二烯丙基二硫（diallyl disulfide，DA...; 赵晓红; 关键词：胃癌二烯丙基二硫; 文献传递

沉默RORα通过Wnt信号通路促进人胃癌细胞增殖与迁移侵袭: 2016年; 目的:在构建沉默RORα人胃癌MGC803细胞的基础上,观察沉默RORα对MGC803细胞增殖与迁移侵袭的影响。方法:软琼脂集落形成实验、流式细胞术、细胞迁移和侵袭实验检测RORα沉默对MGC803细胞增殖、细胞周期、迁移和侵袭能力的影响。RT-PCR与Western blot检测RORα、Wnt1、MMP-9与TIMP3 m RNA与蛋白表达。结果:集落形成实验显示,沉默组的集落形成率128.1%明显高于对照组和空载体组(P<0.05)。流式细胞术显示,沉默组S期细胞百分率39.9%较对照组26.1%和空载体组27.4%明显增加(P<0.05)。迁移实验显示,沉默组迁移距离(1.76±0.19)mm明显高于对照组(1.32±0.14)mm和空载体组(1.29±0.17)mm(P<0.05)。侵袭实验显示,沉默组穿膜细胞(172±27)个明显多于对照组(147±17)个和空载体组(149±14)个(P<0.05)。RT-PCR与Western blot表明,沉默RORα可显著上调Wnt1与MMP-9 m RNA与蛋白与下调RORα与TIMP3 m RNA与蛋白。结论:沉默RORα可通过Wnt信号通路上调MMP-9和下调TIMP3促进MGC803细胞增殖与迁移侵袭。; 刘芳赵晓红夏红苏坚曾希苏波凌晖苏琦; 关键词：人胃癌MGC803细胞 WNT通路

DADS上调RORa抑制人胃癌MGC803细胞增殖与迁移侵袭作用: 目的：通过构建高表达维甲酸相关孤核受体α（Retinoid-related orphan receptorA, RORα）人胃癌MGC803细胞，观察RORα表达在二烯丙基二硫（diallyldisulfide，DADS...; 赵晓红; 关键词：MGC803细胞二烯丙基二硫增殖迁移; 文献传递

二烯丙基二硫上调RORα抑制人胃癌细胞Wnt/β-catenin通路靶基因被引量：2: 2017年; 目的观察DADS上调RORα对人胃癌MGC803细胞Wnt/β-catenin通路相关分子与靶基因表达的影响。方法RT-PCR、Western blot与免疫共沉淀检测Wnt/β-catenin通路相关分子与靶基因表达。荧光素酶报告基因检测c-Myc基因启动子活性。结果 RT-PCR与Western blot显示,DADS处理后各组RORαmRNA与蛋白表达上调(P<0.05),而沉默RORα较对照组明显下调(P<0.05)。DADS处理后各组Wnt1 mRNA与蛋白表达下调(P<0.05)。沉默RORα较对照组Wnt1 mRNA与蛋白明显上调(P<0.05)。DADS处理前后各组β-catenin mRNA与蛋白表达差异无显著性(P>0.05)。免疫共沉淀显示,DADS处理组RORα与β-catenin结合明显增加,而沉默组与β-catenin结合明显减少(P<0.05)。DADS可明显下调核内β-catenin与p-β-catenin(P<0.05),而沉默RORα可明显上调β-catenin与p-β-catenin(P<0.05)。同时,DADS可明显下调TCF-4表达(P<0.05),而沉默RORα可明显上调TCF-4(P<0.05)。DADS可明显下调Axin、c-Myc、c-Jun mRNA与蛋白表达(P<0.05),而沉默RORα作用相反(P<0.05)。荧光素酶报告基因检测显示,DADS处理后,各组c-Myc启动子活性明显低于处理前(P<0.05)。沉默组c-Myc启动子活性明显高于对照组(P<0.05)。结论 DADS可上调RORα抑制Wnt/β-catenin通路相关分子与靶基因表达。; 苏坚赵晓红向姝霖刘芳夏红苏波凌晖曾希苏琦; 关键词：二烯丙基二硫人胃癌细胞靶基因启动子活性

稳定高表达RORα基因的人胃癌MGC803细胞系的构建与鉴定被引量：3: 2016年; 目的构建维甲酸相关孤核受体α(RORα)基因的真核表达载体,并建立稳定高表达RORα的人胃癌MGC803细胞,为研究RORα的功能奠定基础。方法根据RORα基因的c DNA全序列,设计一对带有限制性酶切位点的引物。从人胃癌MGC803细胞中提取mRNA作为模板合成RORαc DNA第一链,并用上述引物扩增目的基因全序列,然后经双酶切插入到真核表达载体pc DNA3.1(+),转化大肠杆菌DH5α;用氨苄青霉素筛选pc DNA3.1(+)-RORα的阳性菌株,双酶切和测序进行鉴定。用经鉴定的重组质粒pc DNA3.1(+)-RORα转染MGC803细胞,G418筛选获得RORα/MGC803细胞株;Real-time PCR和Western blot检测该细胞株RORα的表达情况。结果经双酶切鉴定,构建的真核表达载体pc DNA3.1(+)-RORα包含有大约1 640 bp的插入片段,与预期大小一致;表达载体经测序鉴定,其插入片段碱基序列与RORα基因的c DNA序列完全一致。用构建的真核表达载体pc DNA3.1(+)-RORα转染MGC803细胞后,筛选到可稳定传代的RORα/MGC803细胞株。Real-time PCR与Western blot检测显示,RORα/MGC803细胞RORαmRNA和蛋白表达增高。结论成功构建真核表达载体pc DNA3.1(+)-RORα和建立高表达RORα基因的RORα/MGC803细胞。; 赵晓红向姝霖刘芳夏红曾希苏波凌晖苏琦; 关键词：真核表达转染人胃癌MGC803细胞

RORα高表达对二烯丙基二硫抑制人胃癌MGC803细胞上皮-间质转化的影响被引量：4: 2017年; 背景与目的:二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)具有抗肿瘤的作用。该研究在DADS上调人胃癌MGC803细胞RORα的基础上,观察DADS与RORα高表达对MGC803细胞上皮-间质转化(epithelialmesenchymal transformation,EMT)的影响。方法:相差显微镜观察MGC803细胞形态的影响。采用反转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)、蛋白[质]印迹法(Western blot)、免疫荧光与免疫组织化学检测EMT相关分子表达。裸鼠实验检测对移植瘤生长的影响。结果:相差显微镜显示,DADS组与RORα高表达组细胞大小较MGC803细胞一致,呈圆形或椭圆形,梭形细胞少见,异型性降低。RORα高表达加DADS后,上述改变更为明显。Western blot检测结果显示,DADS组与RORα高表达组Snail蛋白表达明显下调,DADS+RORα高表达组更明显(P<0.05)。RT-PCR与Western blot检测显示,DADS与RORα高表达可明显下调Vimentin和上调E-cadherin m RNA与蛋白表达,DADS+RORα高表达组更为显著(P<0.05)。免疫荧光显示,DADS组与RORα高表达组细胞Snail与Vimentin表达较对照组明显减弱和E-cadherin表达显著增强,DADS+RORα高表达组更为显著,与Western blot结果一致。裸鼠实验显示,DADS组、RORα高表达组与RORα高表达+DADS组移植瘤较对照组生长减慢(P<0.05),并且,移植瘤体重较对照组明显降低,抑瘤率分别为15.07%、26.55%与49.27%(P<0.05)。免疫组织化学检测结果显示,DADS组、RORα高表达组与RORα高表达+DADS组较对照组的Ki-67、CD34与Vimentin表达均明显降低,E-cadherin表达明显增强。结论:RORα高表达可增强DADS体内外抑制人胃癌细胞EMT的作用。; 夏红苏坚赵晓红刘芳苏波凌晖曾希苏琦; 关键词：二烯丙基二硫人胃癌MGC803细胞上皮-间质转化 SNAIL VIMENTIN

赵晓红

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