郭宁 作品数:16 被引量:35 H指数:3 供职机构: 中山大学孙逸仙纪念医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广东省医学科学技术研究基金 广州市医药卫生科技项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
载阿霉素葡聚糖纳米粒的制备及其对肝癌细胞的杀伤作用 被引量:2 2009年 目的制备载阿霉素葡聚糖纳米粒(DOX/DEX-PLA),观察其药物缓释规律,探讨其对人肝癌细胞的杀伤作用。方法以双乳化剂蒸发法制备DOX/DEX—PLA载药纳米粒,透射电镜观察纳米粒形态,分光光度法计算载药率,体外药物释放实验考察纳米粒对DOX的缓释作用。噻唑蓝(MTT)比色法观察对肝癌细胞的体外杀伤作用,动物实验观察其体内抑瘤效应。结果DOX/DEX—PLA纳米微粒呈球形,粒径约83nm,药物包封率约67.1%。体外释放实验提示,纳米制剂中约50%的药物持续缓慢释放,可持续达7d;DOX纳米制剂及DOX裸药均抑制HepG2细胞生长,两者抑瘤率相当(51.3%比50.7%,P〉0.05),而DEX-PLA纳米载体对HepG2细胞生长无抑制作用。体内抑瘤实验显示,DOX纳米制剂可抑制肝癌细胞抑制瘤的生长,抑瘤率达68.56%,优于DOX裸药(48.17%)。结论DOX/DEX—PLA纳米粒可有效抑制肝癌细胞的生长。 黄颖烽 古维立 李志花 陈汝福 周嘉嘉 周泉波 郭宁关键词:葡聚糖 阿霉素 肝细胞癌 丙型肝炎病毒核心蛋白对胆管癌细胞NFAT1基因表达的影响 被引量:5 2012年 目的探讨丙型肝炎病毒核心蛋白(HCV C)是否通过调控转录因子NFAT1的表达参与肝内胆管癌的发展及恶性生物学行为。方法构建表达HCV C核心蛋白的真核表达质粒pEGFP-N3-HCV C,通过瞬时转染pEGFP-N3-HCV C质粒,RT-PCR检测肝内胆管癌RBE细胞中NFAT1 mRNA的表达情况,Western blot检测NFAT1蛋白的表达情况,MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期变化情况。结果转染HCV C后胆管癌细胞NFAT1基因的mRNA及蛋白表达明显上升,差异具有显著性(P<0.05);HCV C能够促进细胞向G2/M期进展及使细胞增殖能力增加。结论 HCV C可上调胆管癌细胞中NFAT1基因的表达,促进细胞周期进展及胆管癌细胞增殖,可能与肝内胆管癌的发展有关。 廖巧芳 李志花 陈汝福 郭宁 曾兵 程帝 郑礼平关键词:丙型肝炎病毒核心蛋白 细胞周期 细胞增殖 改良T分期系统在肝门部胆管癌诊断和治疗中的应用价值 被引量:1 2012年 目的探讨改良T分期系统在肝门部胆管癌诊断和治疗中的应用价值。方法回顾性分析1995年12月至2010年1月中山大学孙逸仙纪念医院收治的95例肝门部胆管癌患者的临床资料,根据影像学检查结果,按照改良T分期系统标准进行术前分期。比较不同T分期患者的手术疗效和预后。计数资料组间比较采用x^2检验和Fisher确切概率法,生存曲线采用Kaplan—Meier法绘制,生存情况比较采用Logrank检验。结果超声联合MRCP检查的确诊率为93%(37/40),超声联合CT或螺旋CT检查的确诊率为66%(23/35),超声联合CT或螺旋CT和ERCP检查的确诊率为14/15,超声联合CT或螺旋CT和MRCP检查的确诊率为15/15。95例肝门部胆管癌患者中,44例行手术治疗(根治性切除术28例、姑息性切除术16例),35例行单纯性内外引流术,16例行剖腹探查。其中T1、T2、T3期患者肿瘤切除率分别为71%(30/42)、50%(12/24)和7%(2/29),3者比较,差异有统计学意义(x^2=30.182,P〈0.05)。T1、T1期患者的切缘阴性率分别为77%(23/30)和5/12,T,期的2例患者切缘均发现癌细胞残留,3期患者根治性切除率比较,差异有统计学意义(x^2:8.204,P〈0.05)。44例行手术治疗的患者中,联合肝切除率为68%(30/44);T1、T2期患者联合肝切除率分别为70%(21/30)、9/12,两者比较,差异无统计学意义(x^2=0.101,P〉0.05);单纯肿瘤切除率为32%(14/44)。两者的并发症发生率分别为53%(16/30)和5/14,围手术期病死率分别为10%(3/30)和1/14,上述指标比较,差异无统计学意义(x^2=1.188,0.094,P〉0.05)。联合肝切除的患者中位生存时间为29个月,长于单纯肿瘤切除患者的19个月(x^2=11.317,P〈0.05)。本组患者随访率为91%(86/95),中位随访时间为15.6个月(3—70个月) 周泉波 赖东明 杨斌 林青 郭宁 王捷 陈积圣 陈汝福关键词:术前评估 肝切除术 纳米载体介导热诱导启动子调控内皮抑素基因治疗肝细胞癌 被引量:1 2009年 目的探讨加热诱导调控下纳米载体介导内皮抑素(Endo)基因治疗对肝癌细胞HepG2的体内外杀伤作用。方法双酶切法构建热诱导启动子(HSP70B)调控Endo基因的重组质粒pcDNA3.1(+)/HSP70-Endo/EGFP。溶剂挥发法制备载DNA的葡聚糖接枝聚乳酸纳米粒,透射电镜观察载DNA纳米粒的形态,并介导转染HepG2细胞,转染24h后予以37℃、39℃、41℃、43℃、45℃加热诱导30min,荧光显微镜和流式细胞术检测不同温度下EGFP表达,ELISA检测转染细胞上清Endo蛋白浓度,MTT法检测热诱导后Endo对HepG2和ECV304细胞生长的影响,动物实验观察热诱导后Endo对肝癌移植瘤的抑制作用。结果载DNA纳米粒呈圆形或椭圆形,粒径约90~120nm,转染效率约30.65%。低温加热可增强HepG2细胞中Endo/EGFP表达,43℃组EGFP表达强度达37℃组的3.3倍。43℃热诱导后转染细胞上清中Endo浓度为(177±28)μg/L,高于不加热组(41±10)μg/L。Endo抑制ECV304的生长,72h时热诱导后细胞抑制率为96.3%,对HepG2细胞的生长却无影响。体内实验显示热诱导后Endo显著抑制肝癌移植瘤的生长,肿瘤抑制率为58.5%,高于不加热组(34.9%)。结论纳米载体可介导Endo基因转染HepG2细胞,低温加热可增强HepG2细胞内Endo基因的表达和分泌,抑制肝癌移植瘤的生长。 周嘉嘉 陈汝福 李志花 周泉波 唐启彬 贺晓玉 卢红伟 郭宁关键词:肝细胞癌 基因治疗 内皮抑素 纳米粒 上调SMYD3对人胆管癌FRH0201细胞中DNMT3B表达及细胞增殖的影响 被引量:1 2012年 目的:研究人胆管癌细胞株FRH0201中SET和MYND结构域含有蛋白3(SET and MYND domain-containing protein 3,SMYD3)过度表达对DNA甲基化转移酶3B(DNA methyltransferase 3B,DNMT3B)表达及细胞增殖能力的影响。方法:瞬时转染SMYD3真核表达质粒后,RT-PCR检测细胞中DNMT3B mRNA水平的变化;Western blotting检测细胞中DNMT3B蛋白水平的变化;CCK-8检测细胞增殖能力的改变;流式细胞术检测细胞周期的改变。结果:以未处理组为对照,胆管癌细胞FRH0201在转染pEGFP-C3-SMYD3质粒后,DNMT3B蛋白及mRNA表达均显著上升(P<0.01);细胞的增殖能力显著提高、细胞增殖速度加快(P<0.05);进入G_2/M期的细胞明显增多(P<0.05)。结论:过度表达SMYD3,可引起细胞中DNMT3B的表达上调并增强细胞增殖能力。 程帝 李志花 陈汝福 郭宁 廖巧芳 郑礼平 周泉波 周嘉嘉关键词:甲基化 多柔比星葡聚糖纳米粒的制备及其对卵巢癌细胞SKOV3的杀伤作用 2008年 目的:制备载多柔比星葡聚糖纳米粒(DOX/DEX-PLA),观察其药物缓释规律,探讨其对卵巢癌细胞的杀伤作用。方法:以双乳化剂蒸发法制备DOX/DEX-PLA载药纳米粒,透射电镜观察纳米粒形态,分光光度法计算载药率,体外药物释放实验考察纳米粒对DOX的缓释作用。MTT法观察对卵巢癌细胞的体外杀伤作用,动物实验观察其体内抑瘤效应。结果:DOX/DEX-g-PLA纳米微粒呈球形,粒径约83 nm,药物包封率约67.1%。体外释放实验提示,纳米制剂中约50%的药物持续缓慢释放,可持续达7 d;体内抑瘤实验显示,纳米缓释制剂间隔给药疗效优于未包载药物每日给药的疗效。结论:DOX/DEX-PLA纳米粒可有效抑制卵巢癌细胞的生长。 李霞 周嘉嘉 周泉波 郭宁 李丹关键词:葡聚糖 纳米微粒 多柔比星 丙肝感染导致肝门部胆管癌中HCVc-SMYD3-RASSF1A途径的研究 研究证明,丙型肝炎病毒(HCV)的感染是促进肝门部胆管癌的发生的因素之一,而在此过程中,丙型肝炎病毒核心蛋白(HCVc)为HCV作用的重要组成部分。对丙肝发生的机制研究中,越来越多的学者将目光投向了其中的表观遗传变化机制... 郭宁 陈汝福 林青 唐启彬 周泉波 周嘉嘉 王捷关键词:胆道肿瘤 丙肝病毒 病理细胞学 文献传递 载阿霉素葡聚糖纳米粒的制备及其对肝癌细胞的杀伤作用研究 被引量:2 2008年 目的制备载阿霉素葡聚糖纳米粒(DOX/DEX-PLA),观察其药物缓释规律,探讨其对人肝癌细胞的杀伤作用。方法以双乳化剂蒸发法制备DOX/DEX-PLA载药纳米粒,透射电镜观察纳米粒形态,分光光度法计算载药率,体外药物释放实验考察纳米粒对DOX的缓释作用。MTT法观察对肝癌细胞的体外杀伤作用,动物实验观察其体内抑瘤效应。结果DOX/DEX-PLA纳米微粒呈球形,粒径约83nm,药物包封率约67·1%。体外释放实验提示,纳米制剂中约50%的药物持续缓慢释放;体内抑瘤实验显示,纳米缓释制剂间隔给药疗效优于未包载药物每日给药的疗效。结论DOX/DEX-PLA纳米粒可有效抑制肝癌细胞的生长。 黄颖烽 古维立 李志花 陈汝福 周嘉嘉 周泉波 郭宁关键词:葡聚糖 阿霉素 肝癌 抗肿瘤 常见胰头部肿块的外科治疗 2010年 胰头部肿块可能是胰腺的炎症或良性肿块,也可能是潜在恶性及低度恶性肿瘤或恶性肿瘤。绝大部分的胰头部肿块需要外科手术治疗。但由于肿块的性质、预后和肿瘤分期不同,手术的方式及范围也不尽相同,包括胰胆管引流术、单纯肿块切除术、保留十二指肠的胰头次全或全切术、切除第二部十二指肠的胰头切除术(PHRSD)、保留幽门胰头十二指肠切术、 陈汝福 林青 唐启彬 周泉波 周嘉嘉 郭宁 王捷关键词:胰腺炎 胰腺肿瘤 外科手术 重组质粒pcDNA3.1(+)/HSP70-Endo/EGFP的构建及在HepG2细胞的表达 2009年 目的构建热休克蛋白70(HSP70)启动子调控内皮抑素(Endo)基因的重组质粒pcDNA3.1(+)/HSP70-Endo/EGFP,观察其在HepG2细胞中的表达规律。方法用聚合酶链反应(PCR)法体外扩增HSP70启动子(350bp);用EcoRI、SalI双酶切法切取质粒pSP—Endo/EGFP中Endo/EGFP,克隆到pcDNA3.1(+)中获得重组质粒pcDNA3.1(+)/HSP70-Endo/EGFP。脂质体介导转染HepG2细胞,转染24h后予以37、39、41、43、45℃加热诱导30min,荧光显微镜和流式细胞术检测EGFP的表达,逆转录(RT)-PCR法检测细胞内EndomRNA的表达;ELISA法检测转染细胞上清中Endo蛋白浓度。结果合成HSP70启动子序列测序结果与GeneBank中AL671762所提供序列完全一致。低温加热可增强HepG2细胞中Endo/EGFP表达,43℃组EGFP表达强度达37℃组的3.3倍。43℃组EndomRNA表达水平高于不加热组。43℃组上清Endo蛋白浓度为(177±28)μg/L,高于不加热组(43±11)μg/L。结论成功构建HSP70启动子调控Endo基因的重组质粒,低温加热可增强HepG2细胞中Endo基因的表达。 陈汝福 李志花 周嘉嘉 唐启彬 周泉波 吴畏 郭宁 彭宁福关键词:热休克蛋白