马卫静
- 作品数:5 被引量:9H指数:2
- 供职机构:甘肃省医学科学研究院更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学更多>>
- 抗阪崎肠杆菌LPS单克隆抗体的制备及初步应用被引量:3
- 2013年
- 为制备抗阪崎肠杆菌(ES)脂多糖(LPS)抗原单克隆抗体(MAb)及建立双抗夹心ELISA检测方法,本研究以热灭活的ES(ATCC51329)菌体抗原作为免疫原,ES菌体结合LPS作为筛选抗原,采用杂交瘤细胞技术筛选获得9株稳定分泌抗ES LPS特异性MAb的杂交瘤细胞株。采用改良的过碘酸钠法制备辣根过氧化物酶(HRP)酶标抗体,并建立检测ES的双抗体夹心ELISA方法,该方法对ES ATCC51329具有良好的特异性,最低检测限可达103cfu/mL,为食品中ES的检测提供特异性MAb及ELISA检测方法。
- 马卫静李克生杜惠芬彭洪江杜丽娟连晓雯
- 关键词:阪崎肠杆菌脂多糖单克隆抗体
- 阪崎肠杆菌脂多糖抗原的制备及其生物学特性
- 2012年
- 目的采用不同方法提取并纯化阪崎肠杆菌(Enteobacter sakazaii,ES)脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)抗原,并对其生物学特性进行鉴定。方法常规培养ES,分别采用热酚水法和冷酚水法提取LPS抗原,收集水相和酚相LPS,采用蒽酮-硫酸法测定LPS多糖含量,紫外光谱法测定核酸含量,Bradford法测定蛋白含量,SDS-PAGE测定相对分子质量;以其免疫小鼠,间接ELISA法检测小鼠血清抗体效价,并检测其与各种肠道菌单价或多价血清的交叉反应性。结果 ES在相同条件下保存相同时间,采用冷酚水法提取LPS的产率高于热酚水法;所提取的水相和酚相LPS样品相对分子质量分布在14 400~45 000之间,均具有良好的免疫原性,且仅与ES单价血清反应,而与其他各种肠道菌单价或多价血清均不发生反应。结论热酚水法和冷酚水法均可制备免疫原性良好、特异性强的ES LPS抗原,但热酚水法所得样品的糖含量和蛋白含量均高于冷酚水法。
- 马卫静李克生杜惠芬
- 关键词:脂多糖生物学特性
- 阪崎肠杆菌检测技术的研究进展被引量:4
- 2012年
- 阪崎肠杆菌(Enterobactor sakazakii,ES)是近年来新发现的一种食源性条件致病菌,主要引起婴幼儿疾病。目前对该菌检测技术的研究除传统的生化检测方法之外,主要集中在分子生物学检测技术上。本文对ES检测技术的研究进展作一综述。
- 马卫静李克生杜惠芬
- 关键词:阪崎肠杆菌
- 抗阪崎肠杆菌LPS单克隆抗体的制备及双抗夹心ELISA方法的建立
- 阪崎肠杆菌(Enterobactorsakazakii,ES)是一种严重危害婴幼儿健康的食源性病原菌,在环境中广泛存在。该菌感染婴幼儿可引起新生儿严重的败血症、脑膜炎以及坏死性结肠炎,因此快速、简便、灵敏的检测方法是预防...
- 马卫静
- 关键词:阪崎肠杆菌脂多糖单克隆抗体双抗体夹心ELISA
- 文献传递
- 金黄色葡萄球菌蛋白A单克隆抗体的制备被引量:1
- 2012年
- 为获得稳定性好、特异性强、效价较高的抗金黄色葡萄球菌蛋白A单克隆抗体,用热灭活的金黄色葡萄球菌wol-04菌体抗原免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0)融合,以金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA)为筛选抗原进行克隆筛选,并对各株单抗的生物学特性进行分析和鉴定.结果表明:试验获得了3株稳定分泌SPA单克隆抗体的杂交瘤细胞,其中单克隆抗体3B11、4F7为SPA表面抗原表位的单克隆抗体,与金黄色葡萄球菌wol-04菌体和SPA有较强的免疫反应性,免疫球蛋白亚类分别为IgG1和IgG3,具有稳定性好、特异性强、效价较高的特点.
- 彭洪江杜惠芬李克生马卫静杜丽娟袁明连晓雯
- 关键词:单克隆抗体杂交瘤细胞间接ELISA