杜丽娟
- 作品数：4 被引量：4H指数：1
- 供职机构：甘肃省医学科学研究院更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 金黄色葡萄球菌蛋白A单克隆抗体的制备被引量：1
- 2012年
- 为获得稳定性好、特异性强、效价较高的抗金黄色葡萄球菌蛋白A单克隆抗体,用热灭活的金黄色葡萄球菌wol-04菌体抗原免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0)融合,以金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA)为筛选抗原进行克隆筛选,并对各株单抗的生物学特性进行分析和鉴定.结果表明:试验获得了3株稳定分泌SPA单克隆抗体的杂交瘤细胞,其中单克隆抗体3B11、4F7为SPA表面抗原表位的单克隆抗体,与金黄色葡萄球菌wol-04菌体和SPA有较强的免疫反应性,免疫球蛋白亚类分别为IgG1和IgG3,具有稳定性好、特异性强、效价较高的特点.
- 彭洪江杜惠芬李克生马卫静杜丽娟袁明连晓雯
- 关键词：单克隆抗体杂交瘤细胞间接ELISA
- 单核细胞增生性李氏杆菌溶血素的原核表达及其McAb的制备
- 单核细胞增生性李氏杆菌（Listeriamonocytogenes,LMO）可引起人和动物的李氏杆菌病。该病是一种重要的常见食源性人畜共患病，是一种急性高致死率的传染病，严重的威胁到了人类的食品公共卫生安全。因此建立快速...
- 杜丽娟
- 关键词：溶血素原核表达单克隆抗体
- 文献传递
- 单核增生性李氏杆菌溶血素的原核表达及可溶性分析
- 2012年
- 对单核增生性李氏杆菌的主要毒力基因hlyA进行大肠杆菌原核表达,分析其表达蛋白的可溶性并纯化。根据hlyA基因设计特异性引物,细菌煮沸破裂提取基因组,PCR扩增出目的条带。连接转化至克隆载体pMD18-T,测序正确后连接表达载体pET-30a(+),酶切和PCR鉴定正确后转化至BL21(DE3),构建重组质粒pET-30a-hlyA。IPTG诱导表达蛋白,并分析其可溶性。PCR扩增的hlyA基因全长约1 600 bp,成功构建了重组质粒pET-30a-hlyA,转化大肠杆菌诱导表达了溶血素蛋白,SDS-PAGE分析表达产物,结果显示表达的蛋白分子量约为60 kD,以可溶性和包涵体2种形式存在,且以可溶性为主要形式。成功克隆和表达了单核细胞增生性李氏杆菌hlyA基因和溶血素蛋白,并得到纯化蛋白。
- 杜丽娟李克生杜惠芬付宝权连晓雯胡永浩
- 关键词：溶血素原核表达可溶性蛋白
- 抗阪崎肠杆菌LPS单克隆抗体的制备及初步应用被引量：3
- 2013年
- 为制备抗阪崎肠杆菌(ES)脂多糖(LPS)抗原单克隆抗体(MAb)及建立双抗夹心ELISA检测方法,本研究以热灭活的ES(ATCC51329)菌体抗原作为免疫原,ES菌体结合LPS作为筛选抗原,采用杂交瘤细胞技术筛选获得9株稳定分泌抗ES LPS特异性MAb的杂交瘤细胞株。采用改良的过碘酸钠法制备辣根过氧化物酶(HRP)酶标抗体,并建立检测ES的双抗体夹心ELISA方法,该方法对ES ATCC51329具有良好的特异性,最低检测限可达103cfu/mL,为食品中ES的检测提供特异性MAb及ELISA检测方法。
- 马卫静李克生杜惠芬彭洪江杜丽娟连晓雯
- 关键词：阪崎肠杆菌脂多糖单克隆抗体
