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DNA甲基转移酶1对胆管癌细胞中端粒酶的调控作用: 2012年; 目的观察丙型肝炎病毒核心蛋白（HCVc）阳性肝内胆管癌细胞中人端粒酶逆转录酶（hTERT）的表达，并探讨DNA甲基转移酶1（DNMTl）对hTERT表达的影响。方法将HCVc质粒瞬转入肝内胆管癌细胞株RBE，5-氮杂-2’-脱氧胞嘧啶核苷（AZA）处理转染后细胞；Westernblot法及逆转录．聚合酶链反应（RT．PCR）检测细胞中hTERT及DNMTl的mRNA及蛋白表达。结果比较空白对照组，转染HCVc质粒后，RBE细胞株中hTERT及DNMTl的mRNA、蛋白水平分别上调3．457±0．081、1．684±0．020、1．826±0．060、2．513±0．119（P〈0．05）；AZA处理转染后细胞可逆转hTERT的升高，mRNA和蛋白水平分别下调2．755±0．098、1．491±0．045（P〈0．05）。结论DNMTl参与HCVc诱导的hTERT表达上调过程。; 程帝郭宁周嘉嘉廖巧芳陈汝福李志花; 关键词：丙型肝炎病毒核心蛋白 DNA甲基转移酶端粒酶

丙型肝炎病毒核心蛋白对胆管癌细胞NFAT1基因表达的影响被引量：5: 2012年; 目的探讨丙型肝炎病毒核心蛋白(HCV C)是否通过调控转录因子NFAT1的表达参与肝内胆管癌的发展及恶性生物学行为。方法构建表达HCV C核心蛋白的真核表达质粒pEGFP-N3-HCV C,通过瞬时转染pEGFP-N3-HCV C质粒,RT-PCR检测肝内胆管癌RBE细胞中NFAT1 mRNA的表达情况,Western blot检测NFAT1蛋白的表达情况,MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期变化情况。结果转染HCV C后胆管癌细胞NFAT1基因的mRNA及蛋白表达明显上升,差异具有显著性(P<0.05);HCV C能够促进细胞向G2/M期进展及使细胞增殖能力增加。结论 HCV C可上调胆管癌细胞中NFAT1基因的表达,促进细胞周期进展及胆管癌细胞增殖,可能与肝内胆管癌的发展有关。; 廖巧芳李志花陈汝福郭宁曾兵程帝郑礼平; 关键词：丙型肝炎病毒核心蛋白细胞周期细胞增殖

上调SMYD3对人胆管癌FRH0201细胞中DNMT3B表达及细胞增殖的影响被引量：1: 2012年; 目的:研究人胆管癌细胞株FRH0201中SET和MYND结构域含有蛋白3(SET and MYND domain-containing protein 3,SMYD3)过度表达对DNA甲基化转移酶3B(DNA methyltransferase 3B,DNMT3B)表达及细胞增殖能力的影响。方法:瞬时转染SMYD3真核表达质粒后,RT-PCR检测细胞中DNMT3B mRNA水平的变化;Western blotting检测细胞中DNMT3B蛋白水平的变化;CCK-8检测细胞增殖能力的改变;流式细胞术检测细胞周期的改变。结果:以未处理组为对照,胆管癌细胞FRH0201在转染pEGFP-C3-SMYD3质粒后,DNMT3B蛋白及mRNA表达均显著上升(P<0.01);细胞的增殖能力显著提高、细胞增殖速度加快(P<0.05);进入G_2/M期的细胞明显增多(P<0.05)。结论:过度表达SMYD3,可引起细胞中DNMT3B的表达上调并增强细胞增殖能力。; 程帝李志花陈汝福郭宁廖巧芳郑礼平周泉波周嘉嘉; 关键词：甲基化

NF-κB特异性抑制剂PDTC对人肝门部胆管癌细胞增殖及SMYD3表达的影响被引量：3: 2011年; 【目的】研究核转录因子-κB(NF-κB)特异性抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲盐酸对肝门部胆管癌QBC939细胞增殖及组蛋白甲基转移酶表达的影响。【方法】不同浓度的PDTC作用于QBC939细胞不同时间后,CCK-8测定其对QBC939细胞增殖的抑制率,流式细胞仪观察QBC939细胞的周期变化情况,RT-PCR检测PDTC作用下QBC939细胞中SMYD3 mRNA的表达情况,Western blot法检测QBC939细胞内SMYD3蛋白的表达。【结果】经PDTC处理的实验组,肿瘤细胞增殖活性明显受到抑制(P<0.05),呈时间和剂量依赖性;与对照组相比,PDTC作用后QBC939细胞G0/G1期细胞比例上升(P<0.05),并同时伴有癌细胞内SMYD3 mRNA和蛋白表达的降低(P<0.01),且呈明显的剂量依赖关系。【结论】PDTC具有显著抑制肝门部胆管癌QBC939细胞生长的作用,其机制可能与细胞增殖抑制、周期阻滞、以及NF-κB、SMYD3表达抑制有关。; 刘勇刚李志花陈汝福郭宁程帝廖巧芳; 关键词：胆管癌细胞QBC939 PDTC 核转录因子-KB 组蛋白甲基转移酶

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廖巧芳