张俊克
- 作品数：8 被引量：20H指数：2
- 供职机构：苏州大学医学部细胞生物学系更多>>
- 发文基金：江苏省高校自然科学研究项目国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 血小板衍生生长因子对骨髓间充质干细胞向成神经细胞分化趋化性迁移的影响被引量：1
- 2010年
- 目的初步探讨血小板衍生生长因子(PDGF)对成神经细胞分化不同阶段骨髓间充质干细胞(BMSCs)趋化性迁移的影响。方法密度梯度离心和贴壁培养法分离培养BMSCs,并予以传代。用碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和丁羟基茴香醚(BHA)相结合的方法诱导BMSCs向成神经细胞分化,并用特异性标志物进行鉴定,利用Dunn chamber建立体外迁移模型,评估PDGF对不同分化阶段BMSCs定向迁移的影响。结果通过密度梯度离心和贴壁培养法获得了纯化的大鼠BMSCs。诱导组BMSCs变为神经元样细胞,而对照组的BMSCs形态无变化。Dunn chamber分析显示,分化不同阶段的BMSCs对PDGF的趋化程度不同:和对照组相比较,未诱导的BMSCs、预诱导24h和诱导5h的分化细胞的迁移速率得到明显提高(P<0.05);而未诱导的BMSCs、维持18h和维持48h的分化细胞的迁移效率明显升高(P<0.05)。结论 BMSCs可以被诱导分化为神经样细胞;分化不同时期的细胞有不同的迁移能力。
- 张俊克郑彦文吴丹周春雷刘靖王丹徐晓静张焕相
- 关键词：骨髓间充质干细胞血小板衍生生长因子分化迁移
- 成神经细胞分化的骨髓间充质干细胞向干细胞因子的趋化性迁移
- 2010年
- 目的研究成神经细胞分化不同阶段的骨髓间充质干细胞(BMSCs)向干细胞因子(SCF)的趋化性迁移。方法 Percoll密度梯度离心法分离培养SD大鼠BMSCs,体外传代并扩增纯化,通过免疫荧光染色及多向分化对其进行鉴定。采用碱性成纤维生长因子(bFGF)、丁羟基茴香醚(BHA)联合诱导剂对BMSCs进行成神经细胞诱导,观察分化各时期的细胞形态变化。利用Dunn chamber研究SCF对不同分化阶段BMSCs趋化性迁移的影响。结果 Dunn chamber迁移实验显示,SCF诱导实验组细胞的迁移速率和迁移效率明显高于对照组(P<0.05),表明SCF对BMSCs具有趋化作用。此外,分化不同状态的BMSCs向SCF的趋化迁移程度也不同。结论 BMSCs可以分化为神经样细胞,其对SCF的趋化性迁移与分化状态密切相关。
- 刘毅徐晓静张俊克郑彦文王兴凯张焕相
- 关键词：骨髓间充质干细胞干细胞因子迁移
- 肝细胞生长因子对骨髓间充质干细胞迁移的影响被引量：5
- 2010年
- 目的研究肝细胞生长因子(HGF)对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)迁移的影响。方法采用Percoll密度梯度离心法分离BMSCs,进行表面抗原表达及分化鉴定。使用Dunn chamber装置研究BMSCs的定向迁移。并且研究PI3K抑制剂LY294002对HGF诱导BMSCs迁移的影响。结果分离培养的BMSCs呈CD29、CD90、CD106阳性表达,CD34、CD45阴性表达,BMSCs可诱导分化为成骨细胞及脂肪细胞。Dunn chamber迁移实验显示,外槽加入不同浓度的HGF,BMSCs迁移速率没有变化,迁移效率随着HGF浓度的增加而增加,50ng/ml与100ng/mlHGF均显著提高了细胞迁移效率;内外槽同时加入50ng/mlHGF,迁移速率与迁移效率均没有变化;经30μmol/LLY294002预处理1h后,HGF诱导的BMSCs的定向迁移受到抑制。结论 HGF能够趋化BMSCs的定向迁移,PI3K信号通路参与介导这一过程。
- 郑彦文张俊克周春雷刘靖王丹吴丹徐晓静张焕相
- 关键词：骨髓间充质干细胞肝细胞生长因子迁移
- 丝素蛋白纳米纤维排列走向对星形胶质细胞生长发育的影响被引量：2
- 2010年
- 目的探讨家蚕丝素纳米纤维的排列走向对星形胶质细胞生长发育的影响。方法取新生大鼠大脑皮层,原代培养获得混合细胞培养体系,并通过反复传代对星形胶质细胞进行纯化。将纯化的星形胶质细胞以2.5×105/ml的密度接种至直径为800nm不同走向(平行、乱序)的丝素纳米纤维上,对细胞的存活、铺展以及迁移进行检测。设立多聚赖氨酸(PLL)包被组作为对照。结果成功地建立了新生SD大鼠大脑皮层原代混合细胞培养体系;传至第4代时,星形胶质细胞得到纯化,GFAP阳性率达到92%以上;接种到材料上之后,细胞和家蚕丝素纳米纤维之间表现出很高的亲和力,细胞的胞体和突起按照纤维的走向排列。家蚕丝素纳米材料上的星形胶质细胞的存活率和铺展面积与PLL对照组之间的差异具有统计学意义(P<0.05)。平行材料上细胞的突起长度比乱序材料上的要长(P<0.05),3种材料(平行、乱序、PLL)上的细胞迁移效率差异具有统计学意义(P<0.05),其中平行材料上的细胞迁移效率最高。结论家蚕丝素纳米纤维能支持星形胶质细胞的存活和生长,表现出良好的生物相容性;丝素纳米材料的走向影响了细胞的排布以及迁移。
- 吴丹王丹周春雷郑彦文张俊克左保齐张焕相
- 关键词：星形胶质细胞相容性迁移
- 血小板源性生长因子对成神经分化的间充质干细胞定向迁移研究
- 目的：目前恶性胶质瘤是最为盛行的原发性脑瘤,传统的方法,如化疗,放疗难以从根本上对其进行治疗,由于骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymalstem cells,BMSCs)在体内外均显示出很强的趋...
- 张俊克
- 关键词：原发性脑瘤充质干细胞细胞病理学
- 文献传递
- 不同直径家蚕丝素纳米纤维对星形胶质细胞生长与迁移的作用
- 2010年
- 目的通过研究3种不同直径的家蚕丝素纳米纤维对纯化的星形胶质细胞生长发育的影响,寻找理想的家蚕丝素纳米纤维的物理参数,为后期使用再生丝素纤维改变神经损伤后形成的物理屏障和化学屏障提供参考和借鉴。方法将混合培养纯化的星形胶质细胞接种在3种不同直径的家蚕丝素纳米纤维材料上,分别选取各时间段的细胞进行星形胶质酸性蛋白(GFAP)特异性免疫荧光染色和活细胞拍摄,并统计不同时间段星形胶质细胞的增殖、铺展和迁移状况。结果第6d时400nm材料上星形胶质细胞的增殖和铺展面积与1200nm相比差异有统计学意义(P<0.05),但是3种直径的材料对星形胶质细胞铺展的最大长度没有显著作用。800nm和1200nm的材料在细胞增殖、铺展面积和最大长度上的差异都不大。结论家蚕丝素纳米材料的直径能影响星形胶质细胞的增殖和铺展,尤其是直径为400nm的材料。
- 王丹吴丹郑彦文张俊克周春雷左宝齐张焕相
- 关键词：星形胶质细胞直径
- 干细胞因子诱导神经干细胞定向迁移
- 2010年
- 神经干细胞(neural stem cells,NSCs)能够定向追踪胶质瘤,然而其内在作用机制及影响因素尚不明了。本实验运用Boyden chamber及Dunn chamber来研究干细胞因子(stem cell factor,SCF)诱导C17.2神经干细胞的趋化性迁移。Boyden chamber结果显示,下室加入SCF后迁移至膜下方的C17.2细胞数显著多于对照组;Dunn chamber结果显示,仅在外槽加入SCF的C17.2细胞迁移速率及迁移效率显著高于内外槽均加入SCF的细胞,单个细胞迁移轨迹分析表明仅在外槽加入SCF后细胞朝着浓度梯度方向迁移而内外槽均加入SCF后细胞的迁移则无规律。这些结果表明,SCF能够诱导C17.2细胞的定向迁移,为进一步了解神经干细胞定向追踪胶质瘤提供了理论依据。
- 周春雷魏友华刘靖郑彦文张俊克王丹吴丹苏军张焕相
- 关键词：神经干细胞干细胞因子趋化性迁移
- 嗅鞘细胞与丝素蛋白纳米纤维生物相容性研究被引量：12
- 2009年
- 目的探讨嗅鞘细胞(olfactory ensheathing cells,OECs)与丝素蛋白纳米纤维复合的生物相容性,为修复脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)提供良好的组织工程支架材料。方法采用静电纺丝技术制备丝素蛋白纳米纤维,并行扫描电镜观察。将从SD大鼠新鲜分离的OECs经改良差速贴壁纯化培养后,取第1代以1×104个/cm2细胞密度分别接种至以左旋多聚赖氨酸(对照组)、丝素蛋白纳米纤维(实验组)包被盖玻片的培养皿中,复合培养不同时间点行倒置相差显微镜观察细胞形态、生长及与材料黏附情况,神经生长因子受体p75(nerve growth factor receptorp75,NGFRp75)免疫荧光染色鉴定OECs并计算其纯度,死活细胞染色试剂检测细胞生存率,MTT法测定支架材料上OECs的增殖情况并行毒性评价。结果扫描电镜观察示丝素蛋白纳米纤维直径为(260±84)nm,呈纤维状三维立体结构,纤维分布均匀,孔隙较均一。倒置相差显微镜示丝素蛋白纳米纤维上培养的OECs与对照组相比,细胞沿丝素纤维分布,细胞突起方向与丝素蛋白走向较一致,形态特征无显著差异。培养5d时,NGFRp75免疫荧光染色示实验组OECs纯度为74.21%±2.48%,对照组为79.05%±2.52%(P>0.05);OECs在丝素蛋白纳米纤维上仍保留其特有的表现型。培养3d死活细胞染色试剂检测示实验组细胞形态较对照组正常,成活率较高,两组死亡细胞数比较无显著差异。MTT检测示培养3、5d两组吸光度值比较差异有统计学意义(P<0.05)。培养1、3、5、7、10d,细胞相对增殖率分别为95.11%、90.35%、92.63%、94.12%和94.81%,根据GB/T16886标准,细胞毒性为1级,无毒。结论丝素蛋白纳米纤维与OECs生物相容性良好,有望成为修复SCI的组织工程支架材料。
- 钱玉强沈忆新陆政峰范志海刘暾张俊克张锋
- 关键词：嗅鞘细胞丝素蛋白纳米纤维生物相容性
