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非甾类抗炎药通过β-catenin/TCF4-survivin通路诱导结肠癌细胞凋亡被引量：25: 2004年; 背景与目的Wnt信号传导通路异常导致的细胞增殖加快和凋亡抵抗,在结肠癌发生发展中发挥重要作用。本研究探讨Wnt信号传导通路在结肠癌细胞中拮抗凋亡的作用机制。方法将survivin的启动子区克隆到荧光素酶报告基因表达系统,与pRL-SV40共转染HCT116细胞,利用双荧光检测系统检测启动子区活性;以非甾类抗炎药物indomethacin刺激HCT116细胞,细胞PI染色后,利用流式细胞仪检测细胞的凋亡状态;Westernblot检测蛋白表达。结果Survivin作为β-catenin的靶基因受到Wnt通路的调节;Indomethacin通过β-catenin/TCF4信号通路在转录水平抑制survivin的表达;Survivin过表达可以部分逆转Indomethacin诱导的HCT116细胞凋亡。结论β-catenin/TCF4-survivin通路作为拮抗细胞凋亡的重要途径,在结肠癌的治疗方面具有重要的应用前景。; 朱红霞张果王益华周翠琦白瑾峰徐宁志; 关键词：Β-CATENIN SURVIVIN 凋亡结肠癌

Neu RNAi对卵巢癌细胞生长、凋亡及药物敏感性的作用被引量：1: 2010年; 目的探讨neu RNAi对卵巢癌耐药细胞株SKOV3/DDP细胞生长、凋亡及药物敏感性的作用,寻找下调基因表达并逆转化疗耐药的方法 ,为卵巢癌的基因治疗探索新途径。方法应用含有U6启动子的pSilencer 1.0-U6表达载体构建neu基因的小干扰RNA(siRNA)表达载体(pSilencer-neu),用脂质体方法将pSilencer-neu转染卵巢癌顺铂耐药细胞株SKOV3/DDP,另设未转染组及转染pSilencer-control组为对照。显微镜下观察转染前后细胞的变化;用RT-PCR及Western Blot检测neu基因mRNA及蛋白的表达;MTT法检测细胞生长情况;流式细胞仪检测细胞凋亡及周期的变化;加入顺铂后检测RNAi对SKOV3/DDP顺铂药物敏感性的影响。结果 neu RNAi可明显下调卵巢癌耐药细胞株SKOV3/DDP中neu的基因表达;使其细胞生长受到抑制,生长速度减慢,生长曲线低平;细胞凋亡增加且细胞周期发生变化,G_1/G_0期细胞增多,S期细胞则减少;顺铂耐药实验显示,转染RNAi的SKOV3/DDP细胞IC_(50)明显下调,细胞凋亡率显著增加。结论应用RNAi可以部分阻抑neu基因在卵巢癌顺铂耐药细胞株SKOV3/DDP中的表达,使SKOV3/DDP细胞生长减慢、凋亡增加,而且对顺铂的敏感性增强。; 张欣杨尚斌张果朱红霞吴令英徐宁志; 关键词：NEU基因 RNAI 卵巢癌

突变型Survivin逆转HeLa细胞恶性表型的研究被引量：25: 2003年; 背景与目的:在大多数肿瘤组织中都发现了survivin的异常高表达现象,这说明survivin在肿瘤发生中具有重要作用。本文的目的在于研究突变型survivin对肿瘤细胞恶性表型的影响,并初步探讨其可能机制。方法:构建突变型survivin的表达载体,转染HeLa细胞,通过G418筛选,得到稳定表达的细胞克隆;利用流式细胞仪分析HeLa细胞的凋亡;通过Westernblot检测突变型survivin对细胞周期蛋白的影响。结果:突变型survivin表达质粒在HeLa细胞中表达良好,利用相应的抗体可以检测到其表达的蛋白;表达突变型survivin的HeLa细胞与正常对照相比,克隆形成能力明显减弱;瞬时转染突变型survivin的HeLa细胞可以自主发生凋亡;而且,突变型survivin还可以使多核HeLa细胞增多,survivin-N端的作用比survivinT34A更明显;突变型survivin可以影响周期蛋白的cyclinD1,使其蛋白水平分别下降了68%和12%。结论:突变型survivin可以部分逆转HeLa细胞的恶性表型,cyclinD1蛋白水平下降可能是其发挥作用的重要机制之一。; 朱红霞周翠琦张果周晓波刘爽白瑾峰全兰平董志伟徐宁志; 关键词：逆转肿瘤细胞

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张果