王学军
- 作品数：22 被引量：69H指数：5
- 供职机构：军事医学科学院放射与辐射医学研究所更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家自然科学基金国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学经济管理更多>>
- 结核分枝杆菌诊断技术研究进展被引量：9
- 2009年
- 近年来,结核病的诊断方法逐渐得到完善,将传统细菌学检验方法、免疫学方法和分子生物学的方法相结合,加速了对结核病的诊断研究。特别是分子生物学技术的发展,对于阐明分枝杆菌和结核分枝杆菌的遗传变异规律及分子进化等都有重要的意义。我们结合近年来结核分枝杆菌诊断在免疫学检测、PCR技术、基因技术等方面的进步,从细菌学检测、免疫学检测、分子生物学检测等3个方面做简要综述。
- 付晓燕王学军刘石泉王升启
- 关键词：结核分枝杆菌细菌学检测血清学检测分子生物学诊断
- 丁型肝炎病毒复制包装载体的构建
- 2017年
- 目的构建一种可以实现丁型肝炎病毒(HDV)复制包装的HDV转座子载体。方法采用分子克隆方法构建含HDV复制子和乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)表达框的转座子(PB)载体PB126I3,将构建好的载体转染HuH-7细胞,转染48 h后用荧光显微镜观察绿色荧光蛋白(GFP)的表达,转染48 h后收集细胞上清用酶联免疫吸附法(ELISA)检测HBsAg的表达,质粒转染细胞8.5 d后提取病毒用逆转录荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测HDV核糖核酸(RNA)的含量;同时细胞上清病毒浓缩后感染HBV受体钠离子/牛磺胆酸共转运蛋白(Na^+/NTCP)稳定转染的HepG2.N9细胞系并于感染后第7天用免疫荧光检测细胞内HDVδ抗原的表达。结果 HDV复制包装载体PB126I3瞬时转染HuH-7后细胞上清可检测到HBsAg的表达和较高滴度的HDV颗粒,并且该病毒颗粒感染HepG2.N9细胞7 d后细胞内可检测到HDVδ抗原。结论 HDV复制包装转座子载体构建成功,为未来HDV的大规模复制包装以及尝试建立HDV稳定转染细胞系提供前期基础。
- 李颖张五星周伟王学军
- 关键词：丁型肝炎病毒瞬时转染
- 新型小发卡RNA慢病毒表达载体的构建及抗乙型肝炎病毒应用评价
- 2015年
- 目的:设计用于表达新型小发卡RNA(sh RNA)的慢病毒载体,并考察其用于抗乙型肝炎病毒(HBV)的可行性。方法:对慢病毒载体骨架SapⅠ位点进行突变,并将用于表达新型sh RNA的结构亚克隆到改造后的慢病毒载体;设计靶向HBV保守序列的sh RNA并克隆到该慢病毒载体,包装含有sh RNA序列的重组慢病毒并定量,考察单个及多个sh RNA结构串联对慢病毒滴度的影响;将重组慢病毒感染HBV稳定转染肝细胞系Hep G2.CW(MOI=3),用杀稻瘟菌素筛选稳定克隆1周后,将其重新消化,并以1×105/孔接种于24孔板,于铺板96 h后取细胞上清检测HBs Ag、HBe Ag表达水平和HBV DNA的含量。结果:构建了一种用于表达新型sh RNA的慢病毒载体,并通过设计靶向HBV保守序列的sh RNA实现了HBV复制的高效抑制;发现多个sh RNA串联效果优于单个sh RNA。结论:构建的新型sh RNA慢病毒表达载体可作为防治慢性病毒感染如HBV感染的潜在有效手段之一,值得进一步研究。
- 张婷玉张秀娟毛莹莹胡伟王学军王升启
- 关键词：慢病毒载体乙型肝炎病毒
- 人工microRNA技术研究进展被引量：2
- 2012年
- RNA干扰(RNAi)是由双链RNA触发的在mRNA水平进行的特异靶序列的基因沉默现象,广泛存在于动物、植物和病毒中,主要包括小干扰RNA(siRNA)及微小RNA(miRNA)两种作用途径。人工miRNA(amiRNA)是将天然miRNA的成熟序列替换成人工设计的靶向其他感兴趣基因的反义序列,通过天然miRNA的生成和作用途径达到RNAi的效果,具有干扰效果明显、作用迅速、毒性低等优点,拥有广阔的应用前景。我们对基于amiRNA的基因沉默技术进行了较为系统的介绍和总结,梳理了该技术的优缺点和适用范围,并展望了其进一步发展的方向和应用前景。
- 李英胡伟崔修亮王学军王升启
- 关键词：RNA干扰基因治疗
- 乙型肝炎病毒侵染肝细胞相关表面蛋白结构域的鉴定
- 乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)属嗜肝DNA病毒科,是已知感染人类最小的DNA病毒。HBV感染不仅可以引起急、慢性肝炎,而且还与肝硬化、肝癌的发生、发展密切相关。自二十世纪六十年代HBV发现以来...
- 王学军
- 关键词：假病毒侵染
- 文献传递
- Gaussia分泌型萤光素酶的研究进展及其应用被引量：2
- 2013年
- Gaussia分泌型萤光素酶是近年发现的一种来源于海洋桡脚类动物Gaussia princeps的新型分泌型萤光素酶,是目前已知的可自然分泌的最小萤光素酶,因其分子小、灵敏度高、半衰期短和可高效分泌,而成为一种理想的报告基因,广泛应用于体内外研究。我们就Gaussia分泌型萤光素酶的发光原理、荧光特性及其应用等进行简要综述。
- 张秀娟黄海谢佩雯王学军王升启
- 关键词：报告基因荧光特性
- 补中益气丸等中成药的辐射防护作用被引量：19
- 2006年
- 郝晓玲吕秋军周喆苗爱东王学军苗明三王升启
- 关键词：辐射防护作用补中益气丸中成药辐射防护药WR-2721临床药物
- 丁型肝炎病毒研究进展
- 2017年
- 丁型肝炎病毒(HDV)是乙型肝炎病毒(HBV)的卫星病毒,呈世界性流行,其感染和复制与HBV感染存在密不可分的联系。我国是HBV感染的高发国家之一,HBV相关研究较多,但对其卫星病毒HDV的研究较少。我们较全面地梳理了HDV的分子生物学特征、流行病学特点、实验研究模型、检测、预防及治疗几个方面的最新进展,期望对未来HDV的研究起到一定的推动作用。
- 李颖张五星周伟王学军
- 关键词：丁型肝炎病毒乙型肝炎病毒
- 人工microRNA抗乙型肝炎病毒效果初探被引量：4
- 2011年
- 目的:设计靶向乙型肝炎病毒(HBV)基因保守区的人工microRNA(amiRNA),考察其对HBV基因表达的抑制作用。方法:比对HBV全基因组现有序列,选择保守区设计amiRNA,定向克隆到pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR载体,将amiRNA载体与HBV复制载体pHBV1.31共转染HepG2细胞,72 h后收取细胞上清,ELISA检测HBV表面抗原(HBsAg)及e抗原(HBeAg)的含量,荧光定量PCR检测HBV DNA含量。结果:amiRNA可显著抑制细胞上清HBsAg、HBeAg和HBV DNA的水平。结论:amiRNA作为防治HBV感染的潜在有效手段之一值得进一步深入研究。
- 赵海峰李丹丹李英胡伟王学军王升启
- 关键词：乙型肝炎病毒RNA干扰
- 抑制核转录因子PPARα的反义寡核苷酸的抗乙型肝炎病毒活性研究被引量：6
- 2011年
- 目的:研究靶向过氧化物酶体增殖活化受体α(PPARα)的寡核苷酸是否具有抑制乙型肝炎病毒(HBV)复制的活性作用。方法:反义寡核苷酸作用于能稳定表达HBV丹氏颗粒的HepG2.2.15细胞,ELISA检测细胞上清中HBV表面抗原(HBsAg)及e抗原(HBeAg)的分泌;实时荧光定量PCR考察反义寡核苷酸对HBV DNA复制水平的影响;通过反转录PCR和Western印迹考察反义寡核苷酸作用于细胞后靶基因及靶蛋白的差异表达情况。结果:抑制PPARα表达的反义序列PPARα-2可剂量依赖且特异性地抑制肝癌细胞中HBsAg和HBeAg的表达,且显著降低细胞中PPARαmRNA水平和蛋白水平。结论:通过筛选初步确定了基于PPARα设计的反义寡核苷酸有较好的抗HBV活性,同时也验证确定了PPARα可能成为抗HBV药物的新型作用靶点。
- 吴小桃杨静王学军李丹丹李英鲁丹丹王升启
- 关键词：乙型肝炎病毒反义寡核苷酸
