肖红
- 作品数：5 被引量：3H指数：1
- 供职机构：内蒙古大学生命科学学院哺乳动物生殖生物学及生物技术教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：内蒙古自治区自然科学基金转基因生物新品种培育专项国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 人工合成启动子特异启动IGF-1真核载体的构建与绵羊成纤维细胞转染被引量：1
- 2010年
- 构建了肌肉特异表达IGF-1载体,并转染绵羊成纤维细胞获得了稳定整合外源基因可用于细胞核移植的转基因细胞.通过人工合成骨骼肌特异启动子SP片段,与羊IGF-1相连,最终连接到骨架载体pCDsRed2中构建成骨骼肌特异表达IGF-的真核表达载体pSPICDS.使用脂质体法转染绵羊成纤维细胞,通过红色荧光与G418双重选择,获得了转基因细胞.经PCR检测证实得到的细胞克隆外源基因稳定整合,可以作为供体细胞用于体细胞核移植.
- 袁建龙王玮金永肖红梁伟郭旭东仓明
- 关键词：胰岛素样生长因子基因转染
- 以体细胞核移植技术制备IGF1转基因白绒山羊的研究
- 究拟利用毛囊特异表达IGF1(Insulin like growth factor I)的真核表达载体pCDsR-KI转染绒山羊胎儿成纤维细胞(Caprine Fetal Fibroblast Cells, CFFCs)...
- 郭旭东朱兵仓明刘东军袁建龙王玮金永任宇温建勋肖红梁伟吴海青
- 关键词：体细胞核移植白绒山羊
- 小鼠KGF基因毛囊特异性表达载体的构建及mESC脂质体悬浮转染条件的优化被引量：1
- 2011年
- 旨在构建小鼠角质细胞生长因子(KGF)真核表达载体pCDsR-UKA,通过脂质体转染法转染小鼠胚胎干细胞(mESC),并进一步优化其转染条件,最终获得可以正常生长并稳定表达红色荧光蛋白的转KGF基因的ES细胞。利用RT-PCR技术扩增小鼠KGF基因cDNA并构建表达载体pCDsR-UKA(6.6 kb),经鉴定正确的重组质粒DNA用脂质体包裹后转染mESC。从小鼠成纤维细胞cDNA扩增出891 bp的KGF基因片段与UHS启动子和BGH polyA序列成功重组到pCDsRed2载体中。经酶切和DNA测序验证,插入载体的DNA片段为KGF基因且方向正确。采用脂质体法优化转染条件,mESC最高转染效率达到(34.4±4.1)%。经G418筛选的转基因ES细胞通过PCR鉴定证实外源基因已整合在ES细胞基因组中。成功获得了小鼠KGF基因片段,以及真核表达载体pCDsR-UKA,经优化的脂质体悬浮法转染条件,在六孔板中当DNA与脂质体比例为3∶10时,可获得最佳转染效率且不改变ES细胞的生长状态,经筛选获得了转基因ES细胞克隆。为下一步通过四倍体补偿技术获得ES小鼠提供了转基因ES细胞。
- 梁伟肖红高笑宇杜晓媛汪慧郭旭东刘东军
- 关键词：KGF胚胎干细胞毛囊红色荧光蛋白脂质体转染悬浮法
- 毛囊特异表达载体pCDsR-UI的构建以及绒山羊胎儿成纤维细胞的体外转染和筛选被引量：1
- 2012年
- 构建IGF1基因的毛囊特异表达载体,可为今后通过体细胞核移植技术建立转基因克隆绒山羊准备核供体细胞.将绵羊IGF1cDNA序列,连接到含有UHS启动子序列的克隆载体p19TU的SalI、SphI位点,获得过渡质粒载体p19TUI;pCDsRed2和过渡质粒载体分别经酶切和连接构成表达载体pCDsR-UI.以组织块贴附法分离和培养绒山羊胎儿成纤维细胞,外源性表达载体以脂质体方法转染所培养的第2代成纤维细胞,DMEM/F12+10%FBS、37℃5%CO2中培养,经添加G418筛选,获得了稳定表达红色荧光蛋白的细胞克隆,经特异性PCR鉴定证实外源基因已经整合在细胞基因组中.转基因前后分析细胞生长曲线和染色体核型证明转基因细胞的生长状态良好、各项参数正常.
- 肖红高圆梁伟高笑宇汪慧杜晓媛郭旭东刘东军
- 关键词：绒山羊胰岛素样生长因子I红色荧光蛋白胎儿成纤维细胞
- 脂质体法悬浮转染小鼠ES细胞条件优化及四倍体补偿技术的初探
- 角质细胞生长因子(KGF)及其受体在毛囊的发育和生长周期中起重要的调控及促进作用.本实验构建KGF毛囊特异性表达载体,以红色荧光蛋白为报告基因,通过脂质体悬浮转染法进行条件优化,将KGF导入小鼠ES细胞中,后期采用昆明小...
- 梁伟肖红刘东军郭旭东
- 关键词：角质细胞生长因子四倍体胚胎电融合
