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Noggin定点整合打靶载体的构建及其体外转染小鼠成纤维细胞和成肌细胞的研究: 目的：为研究小鼠Noggin基因的功能和作用,我们拟克隆小鼠Noggin基因,构建了定点整合型毛囊特异性表达载体pDs-MSKTLNE,进而对小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)和小鼠成肌细胞(C2C12)进行转染,之后通过G4...; 汪慧; 关键词：成纤维细胞成肌细胞 NOGGIN 细胞克隆; 文献传递

毛囊特异表达载体pCDsR-UI的构建以及绒山羊胎儿成纤维细胞的体外转染和筛选被引量：1: 2012年; 构建IGF1基因的毛囊特异表达载体,可为今后通过体细胞核移植技术建立转基因克隆绒山羊准备核供体细胞.将绵羊IGF1cDNA序列,连接到含有UHS启动子序列的克隆载体p19TU的SalI、SphI位点,获得过渡质粒载体p19TUI;pCDsRed2和过渡质粒载体分别经酶切和连接构成表达载体pCDsR-UI.以组织块贴附法分离和培养绒山羊胎儿成纤维细胞,外源性表达载体以脂质体方法转染所培养的第2代成纤维细胞,DMEM/F12+10%FBS、37℃5%CO2中培养,经添加G418筛选,获得了稳定表达红色荧光蛋白的细胞克隆,经特异性PCR鉴定证实外源基因已经整合在细胞基因组中.转基因前后分析细胞生长曲线和染色体核型证明转基因细胞的生长状态良好、各项参数正常.; 肖红高圆梁伟高笑宇汪慧杜晓媛郭旭东刘东军; 关键词：绒山羊胰岛素样生长因子I 红色荧光蛋白胎儿成纤维细胞

以四环素调控表达系统调节LEF1基因在绒山羊成纤维细胞中的表达: 本研究利用Tet-on系统构建毛囊特异性的LEF1表达载体，调节和控制LEFT基因在绒山羊胎儿成纤维细胞中的表达，为今后转基因绒山羊新品种的培育提供基础数据。本研究获得了转染pcDNA4-KL表达载体后稳定整合LEF1基...; 杜晓媛汪慧许腾张志鹏薛娜高笑宇梁浩郭旭东刘东军; 关键词：遗传育种成纤维细胞基因表达; 文献传递

不同类型苜蓿品种（材料）遗传多样性的初步分析: 本研究采用形态学和RAPD分子标记技术，以9个不同类型苜蓿品种(材料)为实验材料，从形态学水平和DNA分子水平对苜蓿的遗传变异以及亲缘关系进行了分析。对苜蓿的9个形态学性状变异的研究发现，不同品种(材料)的遗...; 汪慧; 关键词：苜蓿形态学性状 RAPD分子标记; 文献传递

小鼠KGF基因毛囊特异性表达载体的构建及mESC脂质体悬浮转染条件的优化被引量：1: 2011年; 旨在构建小鼠角质细胞生长因子(KGF)真核表达载体pCDsR-UKA,通过脂质体转染法转染小鼠胚胎干细胞(mESC),并进一步优化其转染条件,最终获得可以正常生长并稳定表达红色荧光蛋白的转KGF基因的ES细胞。利用RT-PCR技术扩增小鼠KGF基因cDNA并构建表达载体pCDsR-UKA(6.6 kb),经鉴定正确的重组质粒DNA用脂质体包裹后转染mESC。从小鼠成纤维细胞cDNA扩增出891 bp的KGF基因片段与UHS启动子和BGH polyA序列成功重组到pCDsRed2载体中。经酶切和DNA测序验证,插入载体的DNA片段为KGF基因且方向正确。采用脂质体法优化转染条件,mESC最高转染效率达到(34.4±4.1)%。经G418筛选的转基因ES细胞通过PCR鉴定证实外源基因已整合在ES细胞基因组中。成功获得了小鼠KGF基因片段,以及真核表达载体pCDsR-UKA,经优化的脂质体悬浮法转染条件,在六孔板中当DNA与脂质体比例为3∶10时,可获得最佳转染效率且不改变ES细胞的生长状态,经筛选获得了转基因ES细胞克隆。为下一步通过四倍体补偿技术获得ES小鼠提供了转基因ES细胞。; 梁伟肖红高笑宇杜晓媛汪慧郭旭东刘东军; 关键词：KGF 胚胎干细胞毛囊红色荧光蛋白脂质体转染悬浮法

3种苜蓿形态特征及变异分析被引量：23: 2008年; 以紫花苜蓿(Medicago sativa),黄花苜蓿(M.falcata)和杂花苜蓿(M.varia)为试验材料,从形态学水平对苜蓿的遗传变异以及亲缘关系进行分析发现,不同品种的变异十分丰富,叶面积和叶宽具有较高的变异水平。相关性分析表明,除节间数和节间长度两个指标与叶形态指标没表现出相关性外,其他指标大多数都表现出显著的相关性;主成分分析表明,形态学性状的主要变异来源于叶宽、主茎长、节间数、节间长、叶型指数。不同类型苜蓿的总变异依次为:紫花苜蓿>黄花苜蓿>杂花苜蓿。; 于林清汪慧张旭婧贾志斌张利军; 关键词：苜蓿形态学性状

不同花色苜蓿遗传多样性的比较研究: 应用RAPD分子标记对9个不同苜蓿品种进行了遗传多样性分析。结果表明:9个品种10条引物共扩增出96个位点,平均每条引物扩增9.6条带,变幅在7～13之间。平均多态位点数为64.22,平均多态位点百分率为66.90%。N...; 于林清汪慧贾志斌张旭婧张利军张春友; 关键词：苜蓿 RAPD; 文献传递

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汪慧