杨亦代 作品数:9 被引量:38 H指数:3 供职机构: 吉林大学 更多>> 发文基金: 教育部科学技术研究重点项目 国家基础科学人才培养基金 全国教育科学“十五” 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 历史地理 天文地球 更多>>
新疆圆沙古城遗址古代人群线粒体DNA多态性研究 本文以新疆克里雅河下游圆沙古城遗址出土的古代样品作为研究对象,进行分子遗传学的研究,以探讨这个人群的起源、迁徙过程。
通过分子生物学方法,获得了圆沙古城古代个体线粒体遗传信息。对圆沙古城、新疆其它地区古人群、北... 杨亦代关键词:古城遗址 分子遗传学 线粒体 基因多态性 文献传递 新疆沙古城遗址古代人群粒体DNA多态性研究 杨亦代新疆克里雅河下游圆沙古城古代居民线粒体DNA多态性研究 被引量:10 2008年 圆沙古城位于新疆塔克拉玛干沙漠的中心地区,地处古丝绸之路的南线.本实验以距今2000~2500年前的圆沙古城15例古代居民的线粒体DNA(mtDNA)为研究对象.系统发育及多维度分析结果表明圆沙古城古代人群与现代中亚南部人群、印度河流域人群以及新疆察吾呼古代人群间存在着相对较近的遗传距离. 高诗珠 崔银秋 杨亦代 段然慧 伊弟利斯.阿不都热苏勒 朱泓 周慧关键词:古代DNA MTDNA 绿色荧光蛋白标记HIV融合蛋白基因表达载体 被引量:2 2006年 目的利用基因工程技术,构建携带绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)标记的HIV(ENV-6C)基因的表达载体,并在E.coliBL21中高效表达。方法经核酸内切酶酶切、连接,构建重组表达载体pRSETB-HIV(ENV-6C)-GFP,通过十二烷基磺酸钠-聚丙稀酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、Western印迹杂交技术(Western blot)分析重组结果,转化到E.coliBL21中,荧光分光光度计检测含有重组质粒的大肠埃希菌培养物中重组蛋白的表达情况。结果成功构建重组原核表达载体pRSETB-HIV(ENV-6C)-GFP,并在E.coliBL21中实现高效表达,检则到发绿色荧光的融合蛋白GFP-HIV(ENV-6C)。结论融合蛋白具有人类免疫缺陷病毒(HIV)外壳蛋白的抗原活性,可用绿色荧光蛋白标记抗原,对制备HIV抗体及免疫诊断新技术有一定价值。 孟庆繁 逯家辉 高朝辉 杨亦代 蒋静 滕利荣一种新型HBsAg真核表达载体的构建 被引量:1 2004年 目的 在CHO细胞中高效表达HBsAg。方法 通过PCR方法扩增出S和dhfr基因片段 ,分别克隆到T载体上。然后分别将S和dhfr基因克隆到pCI载体上 ,构建pCI S dhfr真核表达载体。转染CHO(dhfr )细胞 ,并用ELISA方法检测HBsAg表达量。结果 S和dhfr基因经测序与Genbank报道一致。PCR和测序结果与预期一致。转染后检测结果呈阳性。结论 已成功构建在CHO(dhfr )细胞中高效表达的pCI S 孔双泉 时成波 单连慧 张连忠 李洋 杨亦代 盛军关键词:HBSAG 真核表达载体 细胞 PCR 基因克隆 替换稀有密码子提高HBsAg在CHO细胞中的表达量 被引量:10 2004年 目的 通过替换S基因稀有密码子 ,提高HBsAg在CHO细胞中的表达量。方法 利用重叠PCR技术 ,将S基因上 3个稀有密码子替换成哺乳动物细胞偏爱的密码子 ,得到Sm 基因。把S和Sm 基因分别克隆到pCI载体上 ,并转染CHO(dhfr )细胞 ,利用ELISA方法检测HBsAg的表达量。结果 获得预期的Sm 基因。在CHO细胞中 ,Sm 基因表达量明显高于S基因。 单连慧 时成波 孔双泉 田晓乐 杨亦代 盛军关键词:重叠PCR 稀有密码子 HBSAG CHO细胞 基因 北京市石景山区老山汉墓出土人类遗骸的线粒体DNA分析 被引量:2 2004年 Ancient DNA molecules were successfully extracted from remains of Laoshang t omb. PCR amplification and sequencing analysis of mitochondrial hypervariable re gion Ⅰ (16035-16398) were carried out to determine its haplogroup. The results indicate the sequence belongs to M haplogroup attributed to Asian which consist s with the study of physical anthropology. The project acertained its lineage an d meanwhile enriched the database of ancient populations in China. 杨亦代 高诗珠 段然慧 周慧 赵福生 朱泓关键词:老山汉墓 线粒体DNA 新疆罗布诺尔地区铜器时代古代居民mtDNA多态性分析 被引量:13 2004年 目的 :通过新疆罗布诺尔地区铜器时代古代居民 m t DNA多态性分析 ,探讨新疆境内古代欧洲人种成分的来源。方法 :从孔雀河古墓沟墓地古代居民人骨中提取出古 DNA。用 4对套叠引物对线粒体基因组的调控区(36 3bp)进行扩增、测序。结果 :10个个体中具有 10个 DNA序列 ,系统发育分析表明罗布诺尔古代居民的核酸多样性及平均配对差异均与欧洲群体接近。结论 :早在 380 0年前的铜器时代 ,罗布诺尔地区已有单一的欧洲人种构成的人群存在。 崔银秋 许月 杨亦代 谢承志 朱泓 周慧关键词:DNA DNA 新型瞬时报告载体pRSET-EGFP的构建及表达 2004年 目的 :利用分子生物学技术和方法将pRSET -B质粒改建为带有绿色荧光蛋白 (GFP)突变体基因 (GFP -S6 5T)的新型瞬时表达载体pRSET -EGFP ,并在E .coli.BL2 1中得到GFP基因的高效表达。方法 :PCR法从pEGFP质粒克隆GFP -S6 5TcDNA并在 5’末端引入KpnI的位点。将扩增出来的GFP -S6 5T基因和pRSET -B质粒用HindIII和KpnI双酶切后连接构成重组质粒。用化学法把重组质粒转化到E .coli.BL2 1中 ,培养发酵液OD540 =0 .4时加入IPTG诱导GFP -S6 5T基因转录和表达 ,合成绿色荧光蛋白。还对诱导条件进行了优化 ,发酵液OD540 =0 .4加入IPTG可以得到最优表达。结果 :通过Ni2 + 柱亲和层析 ,纯化得到绿色荧光蛋白 ,SDS-PAGE电泳检测 ,分子量为 2 7kDa ,与文献报道值一致。这说明Ni2 + 柱能够有效的纯化表达产物。结论 :成功构建了新型瞬时表达载体pRSET -EGFP ,并且在E .coli.BL2 逯家辉 孟庆繁 高朝辉 王艳平 王校楠 徐岩 麻越佳 杨亦代 滕利荣关键词:绿色荧光蛋白 基因表达