肖宗慧
- 作品数：34 被引量：19H指数：3
- 供职机构：首都儿科研究所更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金国家自然科学基金北京市优秀人才培养资助更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 反义寡聚核苷酸抗柯萨奇A24病毒感染的研究
- 柯萨奇A组病毒Coxsackievirus A24，CVA24可引起人类多种疾病，特别是引起流行性急性出血性结膜炎，可对人类造成很大危害。目前对病毒感染尚缺乏特异、有效的预防和治疗手段，研究特异性抗病毒新药具有重要的现实...
- 孙红妹刘哲伟肖宗慧吴建新
- 关键词：反义寡聚核苷酸蛋白基因表达
- 文献传递
- 小鼠外周血心肌特异性microRNAs的变化与病毒性心肌炎相关关系初探被引量：3
- 2012年
- 目的:通过识别病毒性心肌炎小鼠和正常小鼠血浆中miR-1,miR-133,miR-206表达量的差异,分析外周血中心肌特异性microRNAs的变化与病毒性心肌炎相关关系,为探索miRNAs作为病毒性心肌炎诊断的生物标志物提供可行性的研究资料。方法:在小鼠病毒性心肌炎模型的基础上,采用荧光定量PCR方法,检测病毒性心肌炎急性期小鼠组和正常小鼠组血浆中相关miRNAs含量,并进行统计学分析。再于病毒注射后1d,3d,5d,7d,9d,11d,分别处死病毒小鼠,观察血浆miRNAs的动态变化规律。同时用Elisa检测心肌肌钙蛋白的变化,对目的 miRNAs与心肌肌钙蛋白进行相关性分析。结果:急性期时三种miRNAs血浆含量显著上调。病毒注射后3d开始上升明显,并持续保持在较高水平到7d,于9d时开始下降。发病期间,血浆miRNAs含量与心肌肌钙蛋白呈现良好的正相关性。结论:小鼠外周血中心肌特异性microRNAs在病毒性心肌炎发病过程中的呈现明显上调并与病程和相应指标存在相关关系,为miRNAs作为病毒性心肌炎诊断的生物标志物提供了重要线索。
- 黄丽颖肖宗慧姚海兰何峰张庆华刘哲伟
- 关键词：病毒性心肌炎血浆MIRNAS实时定量PCR
- 小干扰RNA在心肌细胞中对柯萨奇病毒B3复制的抑制作用研究被引量：2
- 2008年
- 目的通过在原代心肌细胞培养上研究小干扰RNA（small interfering RNA，siRNA）介导的基因干扰对病毒增殖的抑制和细胞内免疫清除作用，评价siRNA在治疗病毒性感染中的可能性。方法体外制备BALB／c乳鼠心肌细胞，利用脂质体和电穿孔转染方法转染siRNA后感染病毒，流式细胞术、中性红染色和病毒致细胞病变作用（CPE）保护实验评价转染效率和细胞生长状态，空斑形成减少实验、RT-PCR等方法检测抑制病毒程度。结果通过在HeLa细胞上的筛选，针对病毒不同区域的siRNA呈现出不同的抗病毒作用，靶序列位于2B区的siRNA-3753能显著抑制柯萨奇病毒B3（CVB3）感染。在原代培养的心肌细胞中，转染siRNA-3753后同样显示出很好的抗病毒效果，心肌的搏动、心肌细胞的生长状况保持着较好的状态。而病毒对照和非特异性siRNA-non感染24h后，细胞停止搏动，逐步变圆，皱缩死亡。测定培养上清和细胞内的病毒滴度，电转siRNA-3753对病毒抑制率可以达到98．1％，脂质体转染siRNA-3753对病毒抑制率为78.2％。电穿孔转染效率可以达到56.03％，脂质体为9.0％。结论针对CVB3基因组2B区的siRNA在保护心肌细胞抵抗CVB3病毒感染实验中具有抑制病毒复制作用。
- 刘哲伟任红雁姚海兰肖宗慧鲁杰何峰韩继生
- 关键词：小干扰RNA病毒性心肌炎心肌细胞
- 抑制Itk表达对Jurkat细胞分泌细胞因子的影响被引量：2
- 2010年
- 目的 研究在Jurkat细胞上敲减Itk蛋白的表达对细胞增殖及炎症相关的细胞因子产生的影响,为Itk作为小分子药物靶标提供可行性实验依据.方法 针对Itk基因设计合成三个shRNAs,通过与pEGFP-C1-hItk质粒共转染,观察其抑制Itk-GFP融合蛋白的表达情况,筛选有效序列包装成慢病毒颗粒.将慢病毒颗粒感染Jurkat细胞,观测Itk蛋白的表达水平、细胞增殖情况及细胞因子的变化.结果 Itk-shRNA1感染Jurkat细胞后Itk基因的mRNA水平与细胞对照组及感染shRNAnon的对照组相比,敲减率约55%,差异有统计学意义P＜0.05.Itk蛋白的敲减导致Jurkat细胞在受刺激时增殖降低,以未感染病毒的Jurkat细胞受刺激后酶标仪检测的A值为1,Itk-shRNA1感染组平均比值为0.54,shRNAnon对照组平均比值为0.83,两组差异有统计学意义,P＜0.05.Itk-shRNA1感染组中IL-2、IL-5、IL-10及IFN-γ等细胞因子水平均较shRNAnon对照组低,差异有统计学意义,提示Itk蛋白的表达减少导致Jurkat细胞产生细胞因子减少.结论 抑制Itk表达能有效降低淋巴细胞的增殖,同时减少与炎症相关细胞因子分泌.
- 姚海兰何峰肖宗慧韩继生张阳德黄伯云刘哲伟
- 关键词：蛋白质酪氨酸激酶RNA慢病毒属
- 重组葡激酶对家兔颈动脉血栓的溶栓作用
- 2001年
- 目的 :探讨重组葡激酶对颈动脉血栓的溶栓作用。方法 :将 34只兔制成富纤维蛋白的颈动脉血栓 ,分组静脉滴注生理盐水、重组链激酶和不同剂量的重组葡激酶 ,记录并分析血流量描记幅值、溶栓开始时间等指标。结果 :重组葡激酶组溶栓开始时间较生理盐水组明显缩短 ,溶栓后血管开放的时间显著延长。结论 :在本实验剂量范围内的重组葡激酶具有一定的溶解富纤维蛋白血栓的效果 ,其药效及副作用相似于阳性对照药。
- 邱楠肖宗慧赵汉青张叔伦徐广峰
- 关键词：颈动脉血栓溶栓治疗
- 多关节型幼年特发性关节炎患儿血浆微小RNA-766表达的意义被引量：3
- 2018年
- 目的探讨微小RNA（miR）-766在多关节型幼年特发性关节炎（poly-JIA）患儿血浆中的表达及临床意义。方法选取2014年11月至2016年9月在首都儿科研究所附属儿童医院风湿免疫科住院治疗的poly-JIA患儿23例为研究组，以同期收治的24例少关节型幼年特发性关节炎（oligo-JIA）和19例幼年强直性脊柱炎（JAS）患儿为病例对照组，以24例同年龄健康儿童为健康对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应（qPCR）方法测定各组研究对象血浆miR-766的表达水平。采用受试者工作特征曲线（ROC）分析miR-766表达水平的临床诊断价值。运用Pearson相关系数分析miR-766表达量与临床和实验室检查参数之间的相关性。结果miR-766在poly-JIA患儿血浆中的表达水平显著低于健康对照组（t＝6.897，P〈0.001）及oligo-JIA和JAS（t＝6.446、6.218，均P〈0.001）2个病例对照组，差异均有统计学意义。病例对照组患儿血浆miR-766表达水平与健康对照组儿童相比差异无统计学意义（P〉0.05）。与健康对照组相比，血浆miR-766水平预测poly-JIA的ROC下面积（AUC）为0.938（95%CI：0.872～1.000），当其截断值为6.083 pmol/L时，敏感度为87.0%，特异度为91.7%。与oligo-JIA和JAS患儿相比，AUC分别为0.908（95%CI：0.819～0.996）和0.927（95%CI：0.865～1.000）。相关性分析显示，poly-JIA患儿血浆中miR-766表达量与血红蛋白水平呈正相关（r＝0.651，P〈0.001），与28处关节疾病活动度评分（DAS28）和1型辅助性T淋巴细胞（Th1）百分比（Th1%）均呈负相关（r＝－0.434，P＝0.038；r＝－0.417，P＝0.008）。结论miR-766在poly-JIA患儿血浆中的表达水平显著降低，其表达水平对poly-JIA的诊断和鉴别诊断具有一定的参考价值。
- 冯淼姚海兰康闽吴凤岐何峰肖宗慧刘哲伟
- 关键词：儿童
- 柯萨奇病毒B组3型通过AMPK/MEK/ERK和Ras/Raf/MEK/ERK通路诱导细胞自噬
- 目的 研究柯萨奇病毒B组3型(Coxsackie virus,CVB3)感染细胞后,HeLa细胞内自噬体增多诱发自噬的机制.方法 利用Western Blot技术检测CVB3感染HeLa细胞后及用U0126(有丝分裂原活...
- 姚海兰辛乐肖宗慧何峰刘哲伟
- 反义寡聚核苷酸对CVB3蛋白基因表达的抑制作用及量效关系的研究被引量：3
- 2004年
- 目的 观察病毒基因组 5′端非编码区内与翻译起始有关的位点和结构蛋白编码区的特异性反义核酸对病毒蛋白表达的影响及其量效关系。方法 应用病毒致细胞病变作用保护实验、空斑形成实验和空斑形成减少实验、Westernblot实验等方法 ,观察特定的反义核酸抑制病毒感染的效果。结果 针对IRES位点、AUG区域和VP1区的 3条反义核酸Scb5 6 1、Scb733、Scb2 785 ,对病毒感染有明显的抑制作用。病毒的感染量为 0 0 1MOI时 ,3种反义核酸在 5 μmol L时对病毒的抑制率均在90 %以上 ,当病毒增加到 10MOI时 ,抑制率仍在 5 0 %以上。Scb5 6 1和Scb733可明显的抑制病毒基因表达 ,当Scb5 6 1的浓度在 0 6 2 5 μmol L时感染后的细胞内病毒蛋白量明显减少 ,增加到 2 5 μmol L时病毒蛋白表达几乎看不到。另外Scb5 6 1、Scb733剂量与抗病毒效果呈现正相关关系。随着Scb5 6 1和Scb733浓度的增加 ,其抗病毒活性也随之增加直到抑制率达到 90 %以上 ,有效剂量在 0 6～ 5 μmol L之间 ,且对细胞无毒性作用。非特异寡聚核苷酸对照实验显示 ,5 μmol L浓度时对病毒感染无明显抑制作用。结论 针对核糖体进入位点和翻译起始位点的反义核酸 ,有明显的特异性抑制病毒基因表达的作用。
- 刘哲伟孙红妹肖宗慧邱南张霆赵锦铭
- 关键词：反义寡聚核苷酸基因表达量效关系
- 高蛋氨酸饮食诱导大鼠H型高血压
- 2023年
- 目的:观察高蛋氨酸饮食对大鼠血压和血同型半胱氨酸(Hcy)水平的影响。方法:8周龄雄性SD大鼠24只,随机分为3组:对照组、高蛋氨酸饮食组和高蛋氨酸饮食后叶酸回补组。对照组大鼠予普通饲料喂养16周,高蛋氨酸饮食组大鼠予蛋氨酸饲料(蛋氨酸为7.7 g/kg)喂养16周,高蛋氨酸饮食后叶酸回补组予蛋氨酸饲料喂养16周后,继续给予蛋氨酸叶酸饲料(蛋氨酸为7.7 g/kg,叶酸为100 mg/kg)喂养4周。每周记录各组大鼠的收缩压(SBP)。喂养结束后处死大鼠,检测血浆Hcy浓度。结果:实验结束时,对照组、高蛋氨酸饮食组和高蛋氨酸饮食后叶酸回补组的Hcy测值分别为4.03、6.16和4.91μmol/L,3组间比较差异有统计学意义(P=0.004)。喂养16周后,高蛋氨酸饮食组(149.8 mmHg)及高蛋氨酸饮食后叶酸回补组(150.0 mmHg)的SBP水平均高于对照组(120.0 mmHg)。叶酸喂养4周后高蛋氨酸饮食后叶酸回补组大鼠的血压降为115.5 mmHg,与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:高蛋氨酸饮食可诱导大鼠发生H型高血压,叶酸可能有一定的治疗作用。
- 刘凌云肖宗慧白宝玲张勤
- 关键词：蛋氨酸同型半胱氨酸叶酸H型高血压
- 儿童高血压代谢组学研究进展
- 2022年
- 高血压作为心血管疾病中常见的疾病之一,严重影响人类身心健康,合理调控高血压患者的血压水平可明显降低脑卒中、心力衰竭、主动脉夹层、终末期肾病等各种疾病的发生几率[1]。既往研究表明,儿童高血压可潜在预测成人高血压[2]。然而,人们对儿童高血压的认识并不充分与成人高血压不同的是,儿童和青少年均处于生长发育期,诊治儿童和青少年高血压也应结合多种因素综合考虑。
- 王心雨白宝玲肖宗慧刘凌云张勤
- 关键词：儿童高血压代谢组学
