刘哲伟
- 作品数：63 被引量：173H指数：7
- 供职机构：首都儿科研究所更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金国家自然科学基金北京市优秀人才培养资助更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 反义寡聚核苷酸抗柯萨奇A24病毒感染的研究
- 柯萨奇A组病毒Coxsackievirus A24，CVA24可引起人类多种疾病，特别是引起流行性急性出血性结膜炎，可对人类造成很大危害。目前对病毒感染尚缺乏特异、有效的预防和治疗手段，研究特异性抗病毒新药具有重要的现实...
- 孙红妹刘哲伟肖宗慧吴建新
- 关键词：反义寡聚核苷酸蛋白基因表达
- 文献传递
- 小儿肺炎分泌型IgA含量与全身免疫状态的观察被引量：4
- 1991年
- 对160例住院重症肺炎病儿进行了急性期与恢复期痰液SIgA 含量检测,并与115例健康小儿的局部和全身免疫状态进行对照。急性期肺炎病儿痰SIgA 含量均有不同程度增加,其中呼吸道合胞病毒肺炎、葡萄球菌肺炎、阴性杆菌肺炎SIgA 含量与恢复期比较,P 值均<0.05,有显著性差异。提示由于抗原的刺激,局部SIgA分泌量增加,有利于阻止病毒和细茵在粘膜表面繁殖。3岁以上肺炎蛆急性期病儿SIgA 含量与正常同龄儿对照,明显低于对照组,P<0.05。提示3岁以上正常儿,可能SIgA 分泌水平已接近正常成人水平,使两组差异显著。对38例志性期肺炎病儿进行总E 玫瑰花细胞(ET)检测,其中30例明显低于正常对照值,降低范围在5～33%,提示ET 检测作为病毒肺炎细胞免疫功能的一项指标可能有一定参考价值。
- 卢竞张林杰张梓荆刘菁孙国贤沈淑瑾刘哲伟李桂荣赵小元
- 关键词：重症肺炎分泌型IGA儿童免疫
- 心肌特异性microRNA修饰型CVB3病毒诱导小鼠免疫保护作用的研究
- 2016年
- 利用基因组中含肌肉特异性miRNA互补序列的修饰型CVB3病毒感染小鼠,研究修饰型病毒在小鼠体内的复制状况以及诱导小鼠免疫保护作用的能力。前期我们在CVB3m株病毒基因组中插入miRNA-133和miRNA-206的互补序列获得修饰型CVB3病毒,命名为CVB-3*T。以对照组(CVB-CON)和紫外灭活野生型CVB3m株病毒组(UV-CVB3-WT)作为对照,测定各组病毒对小鼠的LD50剂量、CVB-3*T对小鼠的致死率、感染小鼠心脏和胰腺的病毒滴度以及心脏病理损伤情况,并检测小鼠血清中炎性细胞因子及中和抗体表达水平以及免疫后小鼠抗病毒能力。结果显示,CVB-3*T对小鼠的LD50明显高于对照组;以相同剂量病毒感染小鼠,CVB-3*T可以明显改善小鼠的生存率,心肌部位的病毒量较对照组明显降低,心肌处病理损伤减轻,而胰腺部位的病毒滴度无明显改变;CVB-3*T组小鼠血清中IFN-γ和TNF-α的含量较UV-CVB3-WT组明显升高,IL-4含量无差异;免疫后,CVB-3*T可诱发机体产生高效价抗CVB3中和抗体,可提高小鼠抵抗病毒再次感染的能力。修饰型CVB3病毒感染可以降低病毒对心肌的亲嗜性,激发小鼠抗病毒免疫,还可以诱导小鼠产生抵抗病毒再次感染的能力。本研究为探索制备CVB3疫苗新途径提供了实验证据。
- 何峰肖宗慧刘卓姚海兰冯淼刘哲伟
- 关键词：CVB3小鼠中和抗体
- 肺炎支原体P1蛋白抗原决定簇在大肠杆菌中的表达与纯化被引量：4
- 2004年
- 目的 得到肺炎支原体主要粘附蛋白 (P1蛋白 )的表达蛋白。材料与方法 用PCR产物限制性片段长度多肽性(RFLP)分析等方法鉴定实验用肺炎支原体菌株。针对P1蛋白基因设计上、下游引物 ,进行PCR扩增。对PCR产物进行回收、纯化 ,克隆入PET - 2 8C(+)表达载体 ,并转化入宿主菌BL2 1。对重组质粒进行酶切及PCR鉴定后 ,IPTG诱导目的蛋白在大肠杆菌BL2 1(DE3)中表达 ,并以Ni-Agarose亲和层析柱纯化。结果 1)本实验所用菌株为肺炎支原体 2型。 2 )经PCR扩增得到预期含有BamHI和XhoI的 5 33bp的目的片段。 3)完成目的基因片段的克隆与表达 ,得到 2 0kDa左右表达蛋白。经诱导阳性质粒的蛋白表达 ,得到较大量纯化的目的蛋白。结论 本研究以国际标准株FH为模板 ,成功获得纯化的近 2 0kDa的P1蛋白片段 ,其大小与目的片段理论值相符 ,且此片段在肺炎支原体 1型与 2型中的基因同源性为 98%。为在基因和蛋白水平进一步研究肺炎支原体P1蛋白成分在肺炎支原体粘附和引起机体免疫反应中的作用机制 ,打下了良好的基础。
- 孙红妹包怡华赵汉青吴建新刘哲伟张霆郭章溉曹玉璞
- 关键词：肺炎支原体P1蛋白抗原决定簇大肠杆菌纯化
- 两例中国半乳糖血症患儿半乳糖-1-磷酸尿苷酰转移酶(GALT)基因突变的鉴证与分析
- 目的:文章针对两例中国半乳糖血症患儿,从分子水平对引起经典型半乳糖血症的基因半乳糖-1 -磷酸尿苷酰转移酶(GALT)基因进行了研究。方法:(1)RT-PCR扩增GALT全长cDNA。(2)cDNA 的亚克隆及对阳性克隆...
- 王宇阳刘哲伟王立文
- 文献传递
- 原核增强子样序列的研究被引量：7
- 1990年
- 本文采用启动子检测载体和增强子检测载体发现来自大肠杆菌JM103 DNA的一个1.0kb左右的片段能在痘苗病毒启动子上游增强细菌CAT和β-半乳糖苷酶基因在大肠杆菌中的表达,这种增强效应无明显的方向性,一般可使基因表达水平提高3—6倍,此原核增强子样序列同时也具有启动子功能。此外还测定了增强片段的部分DNA序列。
- 潘卫吴淑华金奇宇文镐刘哲伟金冬雁杜平侯云德
- 关键词：增强子
- 具有抑制病毒感染作用的反义核酸
- 本发明针对柯萨奇A24病毒基因组5’端非编码区核糖体结合位点(病毒蛋白翻译起始信号区)所设计的一组反义寡核苷酸序列，在病毒感染细胞中，所述反义寡核苷酸序列与病毒mRNA的碱基互补，特异性阻断病毒遗传信息流动，抑制该病毒颗...
- 刘哲伟孙红妹张霆肖宗惠
- 文献传递
- 柯萨奇B组病毒IgM抗体特性研究被引量：11
- 2001年
- 目的 研究柯萨奇B组病毒 (CVB)感染后患者急性期CVB IgM抗体的反应特性。 方法 对临床确诊为CVB感染的患者急性期血清用免疫印迹法检测CVB IgM抗体。结果 患者的急性期血清IgM抗体均仅针对CVB的VP1抗原反应。经ELISA与免疫印迹方法的比较表明 :用免疫印迹法检测的CVB IgM抗体可对CVB各型病毒抗原反应 ,具有CVB各型病毒之间的交叉反应性。而同时 ,在 16例ELISA检测反应阴性的健康人血清中未见有CVB的VP1特异性的IgM抗体存在。结论 临床感染CVB的患者急性期 ,其血清中的特异性的IgM抗体是针对CVB的VP1抗原 ,而且 。
- 张霆马官福马连华刘哲伟崔小岱许诤
- 关键词：柯萨奇病毒B组免疫印迹法IGM
- 抑制Itk表达对人PBMC和病毒性心肌炎小鼠炎症性反应的影响
- 目的利用RNA干扰的方法抑制人PBMC(外周血单个核细胞)及病毒性心肌炎小鼠体内Itk基因的表达,探讨Itk受到抑制后人PBMC以及小鼠体内炎症性反应的变化。方法前期实验已针对人鼠Itk基因同源部分设计出siRNA序列,...
- 何峰韩继生肖宗慧姚海兰刘哲伟
- 文献传递
- 短双链RNA在病毒性心肌炎小鼠模型中的抗病毒研究
- 2010年
- 目的:通过在小鼠病毒性心肌炎动物模型研究短双链小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对病毒感染和复制的抑制作用,研究RNAi在治疗病毒性疾病的可行性。方法:利用质粒载体将siRNA转染至HeLa细胞和Balb-c小鼠后感染病毒,荧光显微镜观察GFP表达量观察细胞内质粒转染效率和持续时间,通过病毒致细胞病变作用(CPE)保护实验病毒空斑形成实验检测病毒受抑制程度,动物模型中观察动物死亡率和易感组织病理变化评价siRNA的保护作用。结果:在HeLa细胞中针对CVB3 2B区的siRNA能显著抑制柯萨奇病毒B3的感染和复制,抑制率可达90%。动物模型中siRNA质粒可改善动物存活率(30%),并降低易感脏器中病毒含量,减轻病理反应。结论:针对CVB3基因组2B区的siRNA在病毒性心肌炎动物模型中具有保护作用。
- 王彩虹姚海兰刘哲伟
- 关键词：质粒载体COXSACKIEVIRUS抗病毒作用
