贾志远 作品数:48 被引量:903 H指数:12 供职机构: 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 更多>> 发文基金: “九五”国家科技攻关计划 国家科技重大专项 国家科技支撑计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
1998年水灾后受灾地区甲型肝炎血清流行病学调查 1999年 为了解水灾后甲型肝炎(甲肝)的流行动态,在湖北和内蒙古等7个受灾省(自治区,下同)中,于1999年1~4月采集1~25岁正常人群血清14322人份。用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测了甲肝抗-HAVIgG,部分抗-HAVIgG阳性血清过一步检查抗-HAVIgM。结果表明,灾区人群甲肝抗体平均阳性率(51.27%)明显高于非灾区(42.21%),首次证明甲肝流行与受灾有联系.甲肝抗体阳性率随年龄增长而升高.除湖北(72.7%)和江西(88.4%)两省外。其亡省的灾区和非灾区1~25岁人群甲肝抗体阳性率均<50%,属甲肝抗体低屏障区.在松花江流域甲肝抗体水平明显低于1992年的调查结果.首次用检测抗-HAVIgM的方法,在正常人群中证明有散在的甲肝亚临床病例存在(1.1%),7个省无一例外,是隐蔽的传染源。 曹惠霖 武桂珍 贾志远 鄂启顺 董杰 殷文武 李守邦 王建军 朱荣 雷激 周小凤关键词:水灾后 甲型肝炎 血清流行病学 河南省人民医院门诊患者戊型病毒性肝炎的阳性率调查 被引量:1 2014年 目的 通过检测部分门诊病例血清的戊型肝炎病毒标志物(HEV IgG),简要描述本地区的戊型病毒性肝炎的感染水平.方法 收集河南省人民医院内科门诊病例血清415份,应用万泰公司的戊型病毒性肝炎诊断试剂盒进行ELISA检测,检测结果进行统计学分析,对不同分组进行x2检验.结果 415例门诊病例的HEV阳性率为21.93%,在性别间、年龄分组间,差异有统计学意义,而在城乡间的差别无统计学意义.结论 我市的戊型病毒性肝炎阳性率处于全国HEV感染率的平均水平,成人的HEV阳性率显著性高于青少年.在低年龄阶段进行有效的疫苗接种,可以控制戊型病毒性肝炎在我省的流行. 许泼男 郭敏卓 伊瑶 田瑞光 余陶 贾志远 毕胜利关键词:流行病学 欧洲、北美国家乙型肝炎预防策略和实施现状 被引量:1 1999年 刘崇柏 贾志远 曹惠霖关键词:乙型肝炎 一种改良的环介导恒温扩增技术在甲型肝炎病毒核酸检测上的应用 被引量:1 2012年 目的建立一种更加快速简便的环介导恒温扩增技术(LAMP)检测甲型肝炎病毒(HAV)。方法本研究通过在传统LAMP的基础上加入加速引物建立了一种改进型的LAMP体系。结果精确性和可重复性实验证实改进后的HAVLAMP检测体系稳定可靠,重复性强,并且较传统的LAMP灵敏度更高,检测极限可以达到5TCID50/ml。当该方法用于甲型肝炎患者急性期血清临床样本的检测时,实验结果与TaqMan实时荧光定量PCR的检测结果一致。结论改进型的LAMP技术有望应用于HAV临床样本检测,同时也适用于HAV流行地区的病原学监测和调查。 邱丰 郭敏卓 丁军颖 伊瑶 贾志远 苏秋东 毕胜利关键词:核酸扩增技术 两种嵌合乙型肝炎病毒preSl中和表位的乙肝核心病毒样颗粒的制备与抗原性分析 被引量:1 2013年 目的构建嵌合preSl2147位氨基酸(aa)、以全长乙肝病毒(HBV)核心抗原(HBcAg)为骨架的病毒样颗粒H2和嵌合preSlaa37-45、以截断HBcAg为骨架的病毒样颗粒H3,并对比其抗原性。方法将HBVadr血清型preSl中和表位aa2147和aa37-45分别插入到全长HBc(aa1—183)和截断HBc(8a1—144)的第78位天冬氨酸和第79位脯氨酸之间,密码子优化之后全基因合成,目的片段经双酶切(NdeI和XhoI)回收后连接到同样处理的pET43.1a载体上,在大肠埃希菌E.coliBL21(DE3)中表达,精细纯化后通过电镜观察蛋白形态、ELISA以及WesternBlott检测其抗原性。结果成功构建表达质粒H2和H3,并在BL21(DE3)中高效表达和自发组装成病毒样颗粒。纯化后电镜观察H2和H3形态为二十面体立体对称样病毒样颗粒,H2为实心颗粒,直径为(31.61±1.27)nm,H3为空心颗粒,直径为(28.46±1.16)nm。统计分析可得H2直径要比H3直径大(P〈0.01)。ELISA和WesternBlott检测结果证实其插入表位preSl以及载体蛋白HBc的抗原性。结论成功获得两种嵌合HBVpreSl中和表位的病毒样颗粒,为其在疫苗研究中的应用探索奠定基础。 苏秋东 郭敏卓 伊瑶 陈斯勇 贾志远 卢学新 邱丰 毕胜利关键词:肝炎病毒 乙型 表位 病毒核心蛋白质类 病毒样颗粒 表位依赖型急性期戊型肝炎诊断抗原的制备与抗原性分析 被引量:1 2017年 目的原核表达制备表位依赖型戊型肝炎诊断抗原,并对其抗原性及其在急性戊肝诊断的性能进行评价。方法以包含密码子优化的GST、HEV优势表位的H15质粒为模板,PCR获取GST-HEV优势表位片段,将其插人表达质粒pET43.1a中,在大肠杆菌中进行表达;利用亲和层析和阴离子交换层析纯化目的蛋白;利用Western Blotting技术对目的蛋白抗原性进行鉴定;建立HEV-IgM抗体检测ELISA方法,初步评价其对阴、阳血清样本的鉴别能力。结果获取高度均质的表位依赖型急性戊肝诊断抗原;WB实验表明目的蛋白不但可以被anti-GST单克隆抗体识别,还可以被戊肝急性期血清相应抗体所识别;分别对60份戊肝急性期血清、阴性血清进行检测,发现其与临床和实验室诊断结果一致性较高。结论原核表达与层析纯化可以获取抗原性优异的表位依赖型急性戊肝诊断抗原,偶联HRP后可应用于HEV-IgM ELISA血清学检测。 苏秋东 郭敏卓 伊瑶 邱丰 田瑞光 毕胜利 贾志远关键词:多表位抗原 戊型肝炎病毒 层析纯化 多表位丙型肝炎病毒抗原的表达和分析 被引量:2 2020年 目的目前常用的丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)血清学检测试剂都基于3~6个重组蛋白或合成多肽,抗原制备繁琐且诊断效果参差不齐。制备一种诊断效能优良的HCV抗原势在必行。方法利用原核表达系统和层析纯化技术制备涵盖我国HCV主要流行株(1b和2a)的6个免疫显性区域的多表位HCV抗原(命名为H65),并以此建立HCV-IgG的血清学检测方法,通过对部分HCV阴阳性血清的检测,初步评价了H65抗原的免疫活性。结果融合Trx标签的H65抗原为可溶性形式表达,纯化后蛋白浓度可达2.991mg/ml,纯度为94.53%;Western blot法检测实验初步证实了蛋白H65的抗原性;应用某商品化试剂盒与H65抗原血清检测方法,对50份HCV阴阳性血清进行检测,McNemer检验显示,新制备诊断抗原与“金标准”比较,P>0.05,Kappa>0.75,且与某商品化试剂盒比较,P>0.05,Kappa>0.75,提示一致性优异。结论H65具有良好的免疫活性,为进一步应用多表位HCV抗原为基础的HCV-IgG体外诊断试剂提供了依据。 苏秋东 郭敏卓 伊瑶 毕胜利 贾志远 邱丰关键词:免疫检测 单纯乙型肝炎疫苗免疫后携带者表面抗原氨基酸置换的频率和特征 被引量:28 2001年 目的 掌握中国单纯乙型肝炎疫苗免疫后携带者和未免疫携带者表面抗原基因变异的流行状况及特点。方法 以直接测序和特异基因序列固相聚合酶链反应 (SS SPPCR)方法 ,分别检测97例单纯乙型肝炎疫苗免疫后携带者、88例未免疫育龄妇女和 95例未免疫儿童携带者 ,乙型肝炎病毒α抗原决定簇氨基酸置换的流行率。结果 直接测序检测的乙型肝炎疫苗免疫后携带者氨基酸置换流行率显著高于未免疫育龄妇女和儿童携带者对照 ,流行率分别为 30 9% (30 97) ,10 2 % (9 88)和5 3% (5 95 )。 145、12 6和 133是最常见的氨基酸酸置换位点。应用更为敏感的SS SPPCR法分别检测145和 12 6位氨基酸点突变的流行率 ,各组间差异不明显 ,其中 145位氨基酸置换的流行率分别为39 2 % ,33 0 %和 32 6%。经直接测序法检测 ,免疫后携带者基因变异流行率高于未免疫携带者 5 41倍。按基因型和血清亚型分层分析 ,基因型B和adw2血清亚型携带者受免疫选择后出现基因变异的风险显著较高 ,分别为 34 5 5和 33 39;而基因型C和adr血清亚型携带者基因变异风险较低 ,分别为2 73和 2 45。结论 单纯乙型肝炎疫苗具有免疫选择表面抗原基因变异株的作用 ;基因变异株在未免疫携带者中主要是弱势准种 ;基因变异风险与病毒基因型和血清亚型? 夏国良 OmanaV.Nainan 贾志远 王继杰 刘洪斌 李荣成 曹惠霖 刘崇柏 HaroldS.Margolis关键词:乙型肝炎疫苗 基因变异 聚合酶链反应 乙型肝炎 我国研制的乙型肝炎基因重组疫苗近期免疫效果观察 被引量:9 2002年 目的 考察新生儿接种国产乙型肝炎 (乙肝 )中国仓鼠卵巢细胞 (CHO)表达的基因重组疫苗的近期免疫效果。方法 1997年 1月 1日至 1999年 8月 31日 ,在河北省正定县选择 7个乡 ,对2 96 9名新生儿按出生后 2 4h及 1、6个月免疫程序接种 3剂乙肝CHO疫苗 ,每剂 10 μg。每季度对新生儿的乙肝疫苗接种情况进行调查核实。 2 0 0 0年 4月对完成全程免疫的观察对象采集血清 ,检测HBsAg、抗 HBs和抗 HBc三项乙肝病毒标志。结果 新生儿乙肝疫苗全程接种率为 93 74 % (2 783/2 96 9) ,第 1剂在出生 2 4h内接种的及时接种率为 95 4 2 % (2 833/ 2 96 9)。 2 0 0 0年 4月采血率为6 8 4 % (190 6 / 2 783)。新生儿乙肝CHO疫苗全程免疫后第 1年内抗 HBs阳性率 [样本值 /阴性对照值(S/N)≥ 2 1]为 98 2 5 % ,有效抗 HBs阳性率 (S/N≥ 10 0 )为 94 2 6 % ,抗体几何平均滴度 (GMT)为77 6 4 ;其后抗体水平随时间延长逐渐降低 ,第 3年时抗 HBs阳性率为 92 31% ,有效抗 HBs阳转率为6 8 96 % ,GMT为 2 2 86。 3年中HBsAg阳性率均小于 1% ,抗 HBc阳性率和HBV感染率在 1%~ 3%之间 ,未见随年限延长而增加的趋势。 刘洪斌 马景臣 孟宗达 张英林 韩常全 张玉伟 赵卉 刘玉忠 邢占春 陈吉朝 贾志远 夏国良 曹惠霖 李志强 刘崇柏关键词:乙型肝炎 预防接种 免疫原性 b型流感嗜血杆菌D蛋白原核可溶性表达研究 被引量:1 2013年 目的通过原核表达系统可溶性表达重组D蛋白,为多糖结合疫苗的制备提供蛋白载体。方法将HibCMCC株基因组DNA中去除信号肽的hpd基因片段插入pET43.1a表达质粒,转化人感受态大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达的重组蛋白,经过硫酸铵沉淀和DEAE阴离子交换柱层析纯化后,用WesternBlot的方法鉴定其免疫反应原性。结果表达的重组蛋白以可溶性形式存在,表达量约占菌株总蛋白的44%,经过初步纯化后的重组蛋白可以和Hib抗血清发生特异性反应。结论成功构建了D蛋白重组表达质粒,并在原核细胞中以可溶性形式表达出具有良好免疫反应原性的D蛋白。 尹梦梦 苏秋东 郭敏卓 寸怡娜 普元倩 贾志远 杨景然 汤洋 廖国阳 伊瑶 毕胜利 李卫东关键词:蛋白质