仉元亭
- 作品数：5 被引量：4H指数：2
- 供职机构：苏州大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金江苏省普通高校研究生科研创新计划项目江苏省临床免疫学重点实验室基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- pIRES2-EGFP-4-1BBL质粒的导入对减毒沙门菌生物学行为的影响被引量：2
- 2009年
- 目的探讨真核表达质粒pIRES2-EGFP-4-1BBL转入对减毒鼠伤寒沙门菌SL3261生物学行为的影响。方法将真核表达质粒pIRES2-EGFP-4-1BBL通过两步电转化获得含pIRES2-EGFP质粒的SL3261,接种于LB培养基中观察其生长特性、革兰染色观察其形态和血清凝集试验检测其表面抗原变化。利用该重组菌体外感染HepG2细胞,观察其对细胞的侵袭能力的影响。结果含pIRES2-EGFP-4-1BBL质粒SL3261在体外生长繁殖较原细菌慢,革兰染色呈阴性丝状菌体,含pIRES2-EGFP-4-1BBL质粒的SL3261 A-F多价、O4菌体和H1鞭毛抗原和SL3261完全一致;体外感染HepG2能力,SL3261为201±46 CFU/200HepG2细胞,SL3261-pIRES2-EGFP为163±37,而SL3261-pIRES2-EGFP-4-1BBL为158±32,3组间的差异无统计意义(P>0.05)。结论导入pIRES2-EGFP-4-1BBL质粒对SL3261的生长和形态有部分影响,而表面抗原以及侵入HepG2细胞的功能不变,该结果为含pIRES2-EGFP-4-1BBL质粒SL3261疫苗菌的进一步研究奠定了实验依据。
- 仉元亭叶建新陈卫昌张学光任大明
- 关键词：减毒沙门菌生物学行为
- 口服含4-1BBL基因质粒疫苗菌对大鼠免疫功能的影响
- 2009年
- 利用减毒沙门氏菌为载体将4-1BBL体内转染抗原提呈细胞,观察体内4-1BBL基因转染对大鼠免疫功能的影响。构建含pIRES2-EGFP-4-1BBL质粒的减毒沙门氏菌(疫苗菌),通过体外感染HepG2细胞观察疫苗菌的侵袭功能和携带外源基因能力,验证疫苗菌作为4-1BBL基因转染载体的作用。疫苗菌2周内连续灌服大鼠3次,末次灌服后14 d心脏取血处死,RT-PCR和荧光显微镜检测报告绿色荧光蛋白(GFP)在脾脏细胞中的转录表达,流式细胞仪检测外周血和脾脏中细胞表型变化。疫苗菌在体外能成功的将外源基因携带至HepG2细胞进行表达,灌服疫苗菌的大鼠外周血和脾脏细胞4-1BBL和4-1BB表达明显升高,外周血中CD3+、CD3+CD8+和CD3+CD25+,脾脏细胞中CD3+CD8+、CD3+CD25+也有明显的增高。表明含4-1BBL基因的减毒沙门氏疫苗菌能实现体内基因转染,4-1BBL的高表达能增强机体的细胞免疫功能。
- 叶建新仉元亭陈卫昌张学光任大明
- 关键词：4-1BBL减毒沙门氏菌免疫功能
- 含pIRES2-EGFP-4-1BBL质粒减毒沙门氏菌株的构建与鉴定被引量：2
- 2009年
- 目的:构建含pIRES2-EGFP-4-1BBL质粒的SL3261(减毒鼠伤寒沙门氏菌)疫苗菌。方法:将质粒pIRES2-EGFP-4-1BBL转入LB5000(鼠伤寒沙门氏菌)进行甲基化,利用修饰后重组质粒转化终宿主菌SL3261,抗生素筛选后挑取单个菌落扩增进行抽提质粒和PCR鉴定,SL3261疫苗菌与HepG2细胞体外共培养,荧光显微镜和RT-PCR分别检测GFP(绿荧光蛋白)的表达和4-1BBL基因的转录。结果:导入pIRES2-EGFP-4-1BBL质粒的SL3261经抽提质粒电泳后获得了同原转化质粒相同大小的目的条带,质粒PCR获得了约930bp的条带,200个HepG2细胞感染SL3261为201±46CFU、SL3261-pIRES2-EGFP为163±37,而SL3261-pIRES2-EGFP-4-1BBL为158±32,含质粒SL3261在体外感染HepG2细胞的能力同原细菌基本相同(P>0.05)。感染含质粒SL3261的HepG2细胞观察到GFP表达,感染含重组质粒SL3261的HepG2细胞经RT-PCR检测到约930bp的目的条带。结论:成功构建了能携带大鼠4-1BBL基因真核表达质粒的SL3261疫苗菌。
- 叶建新仉元亭陈卫昌张学光任大明
- 关键词：4-1BBL基因减毒沙门氏菌DNA疫苗
- 实验性大肠癌对免疫功能的影响
- 2011年
- 目的探讨实验性大肠癌对机体免疫功能的影响。方法利用1,2-二甲肼诱导大鼠建立大肠癌模型,流式细胞术检测成瘤16、21周外周血淋巴细胞和21周脾细胞中CD3、CD4、CD8、CD25、4-1BB和4-1 BBL表达率,ELISA法检测成瘤21周时脾细胞经植物血凝素(PHA)刺激后分泌γ干扰素(IFN-γ)的能力。结果 21周时的诱癌率达100%(5/5)。16周时成瘤组外周血淋巴细胞CD3^+和CD3^+ CD4^+表达率较对照组略有降低,但差异无统计学意义(P>0.05);21周时成瘤组外周血淋巴细胞和脾细胞中CD3^+ CD4^+表达率较对照组明显降低(P<0.05),4-1BB和4-1 BBL的表达较对照组均降低,但差异均无统计学意义(均P>0.05);成瘤组脾细胞PHA刺激试验后分泌IFN-γ的能力较对照组显著下降(P<0.01)。结论实验性大肠癌同人类大肠癌具有类似的免疫功能降低,主要是细胞免疫功能的下降。
- 叶建新仉元亭刘强陈卫昌
- 关键词：大肠癌免疫功能
- 茶多酚对实验性大肠癌的免疫功能影响和成瘤预防作用
- 本研究分为二部分：
第一部分：实验性大鼠大肠癌机体免疫功能的改变
目的：模拟人类大肠癌的形成，建立一种大肠癌的模型并探讨实验性大肠癌时机体免疫功能变化。
方法：利用1，2-二甲肼(DMH)诱...
- 仉元亭
- 关键词：茶多酚大肠癌免疫功能
- 文献传递
