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重组尿激酶型纤溶酶原激活物受体在酵母系统中的表达及鉴定被引量：1: 1998年; 构建截断型可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体（ｕ－ＰＡＲ）的原核及酵母表达质粒并分别在大肠杆菌和Ｐｉｃｈｉａｐａｓｔｏｒｉｓ酵母中高效表达．利用ＰＣＲ扩增截断型可溶性ｕ－ＰＡＲｃＤＮＡ片段，并分别连入酵母及原核表达载体中，构建成表达质粒．后者经诱导表达的蛋白被用于免疫家兔，获得抗ｕ－ＰＡＲ的抗血清，用于对酵母表达产物的鉴定．前者在甲醇的诱导下表达，产物分泌至培养液中．结果表明，原核表达的ｕ－ＰＡＲ蛋白免疫家兔后获得高效价的抗血清，利用此抗血清所作Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ证实酵母表达蛋白具有ｕ－ＰＡＲ的免疫原性，表观分子量４０ｋＤ左右．Ｍｕｔ－表型在第５ｄ为最高（２．５μｇ／ｍｌ），Ｍｕｔ＋表型在第４ｄ为最高（７．５μｇ／ｍｌ）．因此，构建的可溶性ｕ－ＰＡＲ表达质粒在Ｐｉｃｈｉａｐａｓｔｏｒｉｓ酵母细胞获得表达，为进一步竞争拮抗受体功能的研究奠定了基础．; 唐辉滨何诚彭鲁英于伟英应其龙朱运松; 关键词：肿瘤酵母

肿瘤浸润、转移与UPA和PAI-1的关系被引量：9: 1995年; 探索肿瘤转移的分子生物学机制已成为当前人们研究的热点。UPA/UPAR系统与纤溶酶原作用,激活局部纤溶机制,导致肿瘤的浸润转移,UPA的生理性抑制剂PAI-1在其中起到调节作用。PAI-1能否作为一种抑制肿瘤转移的作用物,尚待进一步研究。本文就肿瘤浸润转移与UPA及PAI-1的关系作一综述。; 唐辉滨朱运松宋后燕; 关键词：肿瘤 UPA PAI-1

乳腺肿瘤组织中Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制剂的表达被引量：2: 1996年; 探查乳腺肿瘤组织中Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制剂（ＰＡＩ－１）的表达，并比较乳腺恶性肿瘤组织与良性纤继腺瘤及正常组织中ＰＡＩ－１的差异。用免疫组织化学和原位杂交的方法，确定了乳腺癌、乳腺纤维腺瘤及瘤旁正常组织中ＰＡＩ－１的分布；用发色底物法检测组织提取液中ＰＡＩ－１的活性；用图象分析的方法对组织切片上的ＰＡＩ－１进行灰度定量。结果：ＰＡＩ－１主要分布在乳腺正常腺上皮细胞、瘤上皮细胞和腺癌细胞的胞浆中，但恶性组织中的成纤维细胞、巨噬细胞以及癌旁纤维组织也有染色。癌组织中ＰＡＩ－１的活性（Ｐ＜０．００１）和含量（Ｐ＜０．００５）均高于良性乳腺纤维腺瘤及瘤旁正常组织。结论：ＰＡＩ－１在乳腺恶性肿瘤组织中明显升高，ＰＡＩ－１的检测可能为临床乳腺肿瘤的诊断、预后提供新的指标。; 唐辉滨周仲文张晓华孙东风宋后燕朱运松; 关键词：乳腺肿瘤 T-PA

尿激酶受体的结构和功能及在肿瘤组织中的表达被引量：8: 1995年; 尿激酶受体的结构和功能及在肿瘤组织中的表达唐辉滨，朱运松，宋后燕近年来，尿激酶（ＵＰＡ）及尿激酶受体（ＵＰＡＲ）系统正愈来愈多地受到人们的关注。ＵＰＡ／ＵＰＡＲ系统介导的细胞外基质降解在细胞发育、分化、组织重建、排卵及肿瘤侵袭转移中具有重要的作用。而...; 唐辉滨朱运松宋后燕; 关键词：尿激酶受体肿瘤病理

t PA、u PA/u PAR及其抑制剂PAI 1在乳腺肿瘤的表达被引量：4: 1999年; 目的　研究组织型纤溶酶原激活剂（ｔＰＡ）、尿激酶型纤溶酶原激活剂（ｕＰＡ）及其受体ｕＰＡＲ、１型纤溶酶原激活剂抑制剂ＰＡＩ１在乳腺肿瘤中的分布及酶学活性。　方法　用免疫组织化学ＡＢＣ方法，分析４种因子在乳腺肿瘤组织中的定位及半定量表达，用发色底物法测定乳腺肿瘤组织提取物中的ｔＰＡ和ｕＰＡ的活性。　结果　ｔＰＡ、ｕＰＡ、ＰＡＩ１主要分布在正常腺上皮及癌上皮细胞的胞质中，ｕＰＡＲ则在癌细胞的胞膜及胞浆中；总ＰＡ活性和ｔＰＡ活性在乳腺良、恶性组织中均无显著性改变，但ｕＰＡ，ｕＰＡＲ和ＰＡＩ１在乳腺癌组织中的表达明显高于良性组织及癌旁组织；ｕＰＡ／ｕＰＡＲ在转移灶中的表达较原发灶有不同程度的下降，而ＰＡＩ１在转移灶中却较原发灶中为高。　结论　ｔＰＡ可能与乳腺癌的恶性表型无关。而ｕＰＡ／ｕＰＡＲ与恶性表型相关；ｕＰＡ／ｕＰＡＲ和ＰＡＩ１的相互制约及平衡在调节肿瘤原发灶癌细胞的移动中可能起到重要作用。; 唐辉滨何诚廖劲晖田昱应其龙宋后燕朱运松; 关键词：U-PA U-PAR 抑制剂

Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制剂cDNA在P.pastoris酵母菌中的表达和鉴定: 1998年; 将编码３７９个氨基酸残基的ＰＡＩ－１ｃＤＮＡ插入到含ＡＯＸ１启动子和ＰＨＯ１分泌信号肽序列的甲醇营养型酵母载体中，构建成表达质粒ｐＹＩＳ－１．表达质粒转化Ｐ．ｐａｓｔｏｒｉｓ甲醇营养型酵母细胞，筛选Ｈｉｓ＋Ｍｕｔ－表型的转化子，经低密度摇瓶培养，１％甲醇诱导表达７ｄ后，培液经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析，ＰＡＩ－１生物活性测定和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ证实表达出分子量为４３～５１ｋＤ的４条ＰＡＩ－１条带．表达的ＰＡＩ－１能有效地分泌到培液中，占培液总蛋白的２６％左右，达４ｍｇ／Ｌ培液；其比活性为１．１６×１０４ＡＵ／ｍｇ．; 何诚唐辉滨田昱宋后燕朱运松; 关键词：PAI-1

尿激酶受体在大肠杆菌中的表达及其多克隆抗体的制备: 1998年; 目的构建尿激酶受体（ｕｒｏｋｉｎａｓｅ－ｔｙｐｅｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎａｃｔｉｖａｔｏｒｒｅｃｅｐｔｏｒ，ｕＰＡＲ）表达质粒并在大肠杆菌中表达，用纯化的表达产物ｕＰＡＲ蛋白制备多克隆抗体并初步应用于肿瘤标本的检测。方法用基因工程的方法构建ｕＰＡＲｃＤＮＡ表达质粒ｐＬＹ４－ｕＰＡＲ，转化重组大肠杆菌在４２℃条件下诱导表达；利用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ进行纯化并用纯化后的抗原免疫新西兰兔制备多克隆抗体，应用制备的抗体对乳腺癌和肝癌中ｕＰＡＲ的分布进行检测。结果ｕＰＡＲ表达质粒在大肠杆菌中高效表达，表观Ｍｒ为３０×１０３左右。表达的ｕＰＡＲ占全菌蛋白的２０％左右；获得了效价为１∶３２的ｕＰＡＲ多克隆抗体；发现ｕＰＡＲ主要分布在癌细胞的表面及胞质内，而在癌旁组织中则较弱。结论ｕＰＡＲ在大肠杆菌获得高效表达，并制备得到多克隆抗体。ｕＰＡＲ在癌组织（乳腺癌及肝癌）与癌旁组织间的表达差异提示可将其应用到临床肿瘤的诊断与肿瘤转移的实验性研究中。; 唐辉滨于伟英何诚廖劲辉田昱田昱朱运松; 关键词：尿激酶受体多克隆抗体大肠杆菌肿瘤血管

尿激酶型纤溶酶原激活物及其特异受体和抑制物与肝细胞癌浸润转移及预后被引量：22: 1998年; 目的研究尿激酶型纤溶酶原激活物（ｕＰＡ）及其特异受体（ｕＰＡ－Ｒ）和抑制物（ＰＡⅠ－１）与肝细胞癌（ＨＣＣ）的关系及其在ＨＣＣ浸润转移中的作用。方法用ｕＰＡ、ＰＡⅠ－１单克隆抗体和ｕＰＡ－Ｒ多抗分别检测ｕＰＡ、ＰＡⅠ－１和ｕＰＡ－Ｒ在４８例ＨＣＣ和１２例对照组中蛋白水平的表达。结果癌与癌周及对照组比较，ｕＰＡ、ｕＰＡ－Ｒ和ＰＡⅠ－１膜上免疫染色阳性率明显升高，Ｐ＜０．０５。在侵袭性病例中，ｕＰＡ和ｕＰＡ－Ｒ阳性为１６／２２和１９／２２，与非侵袭性７／２６和１０／２６相比，Ｐ分别＜０．０１和＜０．００１。癌栓形成和淋巴结转移病例ｕＰＡ－Ｒ阳性分别为８／８和６／６。术后复发病例ｕＰＡ－Ｒ阳性为１５／１７，与无复发组１４／３１相比，Ｐ＜０．０１。术后２年死亡患者ｕＰＡ－Ｒ和ＰＡⅠ－１阳性分别为１２／１２和９／１２，与生存组１７／３６和１５／３６相比，Ｐ分别＜０．０１和＜０．０５。在ｕＰＡ、ｕＰＡ－Ｒ和ＰＡⅠ－１同时阳性病例中，侵袭性肿瘤和术后２年死亡分别占１１／１５和７／１５，与阴性组２／８和０／８相比，Ｐ＜０．０５。结论ｕＰＡ、ｕＰＡ－Ｒ和ＰＡⅠ－１在ＨＣＣ中表达明显升高，ｕＰＡ和ｕＰＡ－Ｒ与ＨＣＣ浸润转移密切?; 郑起汤钊猷吴志全施达仁唐辉滨施达仁宋后燕; 关键词：肿瘤浸润力 UPA 肝细胞癌

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唐辉滨

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