孟尧
- 作品数：27 被引量：78H指数：6
- 供职机构：成都医学院检验医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技型中小企业技术创新基金四川省教育厅科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学轻工技术与工程更多>>
- 重组肌氨酸氧化酶的制备和鉴定被引量：1
- 2014年
- 测定血清中肌酐的浓度是临床上诊断肾功能的一项重要指标。在利用偶联酶法测定的过程中,一种关键酶——肌氨酸氧化酶(SOX)(EC 1.5.3.1)的质量控制是我们首先要解决的一个重要问题。本文利用乳糖诱导重组肌氨酸氧化酶(r-SOX)基因在E.coli中高效表达,经300L发酵罐发酵培养,菌体终密度达到OD600值22,菌体湿重达30g/L,湿菌体含活性20U/g。重组肌氨酸氧化酶表达量占菌体可溶性蛋白的25%左右。菌体破碎液经55℃选择性热变性处理和Ni-Sepharose FF层析二步纯化,经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析酶的纯度达97%以上,比活力达25U/mg,纯化倍数为14.4,活性收率为92.4%。纯化的酶经SDS-PAGE和分子筛层析法测定,其分子量分别为53kD和55kD,提示该酶结构为单一肽链。纯化的酶液和冻干粉均呈黄色,经三氯乙酸和热变性处理,发现其与核黄素以共价键的方式结合。此外,对该酶的稳定性和其中的干扰酶过氧化氢酶也做了进一步的考察。以上所取得的研究结果为此酶的开发和利用奠定了基础。
- 蒲静王瑞姚明东何中杰赵明孟尧
- 关键词：高密度发酵
- MAP30-PEG结合物对A549体外细胞增殖作用的研究被引量：2
- 2012年
- 目的探讨苦瓜籽核糖体失活蛋白MAP30及其聚乙二醇修饰物对人肺腺癌细胞A549增殖、细胞凋亡的影响和caspase3相关凋亡途径的诱导作用。方法用MTT法测定MAP30和MAP30-PEG结合物对人肺腺癌细胞A549的抑制率;通过Hoechst33258荧光染色观察A549细胞凋亡形态,并用流式细胞术测定细胞凋亡率以及用western blot检测凋亡细胞caspase3表达。结果 MAP30和MAP30-PEG结合物均对A549有抑制作用,且呈时间和剂量依赖性关系;MAP30-PEG结合物对A549细胞增值抑制率约为MAP30的60%;Hoechst33258荧光染色后均呈典型凋亡形态;流式细胞术检测显示,MAP30和MAP30-PEG结合物作用于A549细胞48 h后均可使A549细胞呈现Sub-G1凋亡峰,凋亡率分别为58.7%、42.7%;MAP30和MAP30-PEG结合物对胞内caspase3在凋亡过程中显示有激活作用。结论 MAP30和MAP30-PEG结合物均对A549增殖有明显的抑制作用;两者均能通过caspase3途径诱导细胞凋亡。
- 邓缅刘双凤孟尧沈富兵吴民泸郑崛村孟延发
- 关键词：CASPASE3
- 胆固醇酯酶高产菌株的筛选及动力学性质研究被引量：7
- 2006年
- 通过平板初筛和摇瓶复筛,得到一株胆固醇酯酶的高产菌株,研究了pH值、温度、底物浓度、一些有机和无机试剂对胆固醇酯酶酶促反应速度的影响。研究发现,胆固醇酯酶有较好的酸碱稳定性,pH值为5.0￣8.0;最适pH值和最适温度分别为pH7.0和40℃,该酶的动力学研究表明,对胆固醇亚油酸酯和胆固醇油酸酯都表现为典型的米氏规律,Km值分别为2.2×10-5mol/L3.1×10-5mol/L,同时研究了一些金属离子和有机化合物对酶活性的影响,发现Mg2+、EDTA对胆固醇酯酶有激活作用。
- 武翠玲谭晓晶姚明明张锐卢戌孟尧孟延发
- 关键词：RHODOCOCCUS动力学特性
- PDCA循环在研究生医学技术专业英语课程教学中的应用实践
- 2024年
- 本文总结了成都医学院研究生医学技术专业英语课程教学中应用PDCA循环进行质量控制的4年教学实践经验,将以内容为基础的教学法引入教学全过程,取得了良好成效。从学生需求、教材选用和师资建设方面总结经验,提出建议。采用PDCA循环以构建教学质量保障体系可为其他专业课程教学提供参考。
- 程曦孙静孟尧江岩王逸敏张红
- 关键词：PDCA专业英语
- Rhodococcus sp.发酵条件及其胆固醇酯酶的部分性质被引量：2
- 2006年
- Rhodococcussp.经发酵培养可合成分泌胆固醇酯酶。对该菌种进行诱导及发酵条件的优化,确定其培养基为(%):蛋白胨1.3,KCl 0.5,牛肉膏0.1,Na2HPO40.632,MgSO40.06,油酸0.4,卵磷脂0.25,Triton X-100 0.16;最适培养条件为:pH7.4,250 mL三角瓶中装量40 mL,接种量6.0%,摇床转速180r/min,30℃培养24h。在最适培养基及最适培养条件下,胆固醇酯酶比活力可达到5.47 U/mg。酶学性质研究结果表明,该酶的最适温度为40℃,最适pH为7.0。
- 武翠玲谭晓晶孟尧张锐姚明明卢戌孟延发
- 关键词：RHODOCOCCUS发酵正交实验
- 长效尿酸酶（URICASE-PEG40KD结合物）的制备及基本性质研究
- 目的：制备尿酸酶-PEG结合物并考察其天然尿酸酶和尿酸酶-PEG的基本特性。
方法：本文采用蛋白质化学修饰技术，选择分子量40,000聚乙二醇作为专一性修饰剂来修饰尿酸酶/(60 KD/)。探讨pH、温度...
- 孟尧
- 关键词：尿酸酶
- 文献传递
- 抗体催化水的氧化对大鼠血管平滑肌细胞过氧化损伤作用
- 2023年
- 目的通过观察抗体催化水的氧化作用对大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)的过氧化损伤,探讨其在动脉粥样硬化致病过程中的作用和机制。方法体外分离培养大鼠VSMCs,随机分为4组:空白组、中性粒细胞(Neu)+IgG组、Neu+PMA组、Neu+PMA+IgG组。以佛波酯(PMA)激活大鼠中性粒细胞产生单线态氧(^(1)O_(2)),促进抗体发挥催化水的氧化作用;采用台盼蓝法检测VSMCs的死亡率,CCK-8法检测VSMCs的增殖能力,实时荧光定量PCR及免疫组化法检测细胞内增殖细胞核抗原(PCNA)的表达水平,丙二醛(MDA)法检测细胞内脂质过氧化产物。结果VSMCs在培养过程中,当与中性粒细胞和PMA共同孵育时,细胞的死亡率、增殖能力、细胞内PCNA的表达水平及胞内脂质过氧化产物均显著增高,但增加大鼠IgG共同孵育后,其增高水平得到更进一步增强。结论抗体催化水的氧化可能参与了血管平滑肌细胞的过氧化损伤作用。
- 彭克军李丹孟尧邓峰美
- 关键词：动脉粥样硬化平滑肌细胞过氧化损伤
- 高纯度诊断用重组甘油激酶的制备和鉴定
- 2013年
- 用乳糖诱导重组甘油激酶(r-GK)在E.coli中高效表达,经300L发酵罐发酵培养,建立了高效、低成本的r-GK发酵生产工艺。发酵菌体终密度OD600值达到42,r-GK表达量占菌体可溶性蛋白的30%左右。菌体破碎液经选择性热变性处理,Ni Sepharose FF层析二步纯化,产物纯度大于97%。经梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳(GradientPAGE)、聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)和十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定,r-GK分子量为120kDa,由分子量相同的2个亚基组成。甘油激酶中2种NADH氧化酶和过氧化氢酶干扰酶未被检出。保存稳定性实验表明纯化后酶液在4℃条件下保存30d可保留约85%的活性,而冻干粉剂在4℃条件下保存1年活性仍可保留93%以上。
- 孟尧王振伟王帅坤郝杰清师慧孟延发刘双凤
- 关键词：乳糖高密度发酵
- 黑曲霉脂肪酶的分离纯化及酶学性质的研究被引量：1
- 2014年
- 目的以黑曲霉发酵液为原料，分离纯化脂肪酶，并研究其酶学性质。方法以硫酸铵沉淀、Q—SepharoseFastFlow和SephacrylS-200凝胶层析等方法分离纯化脂肪酶，利用SDS—PAGE、PAGE、IEF—PAGE等方法进行鉴定。结果所得脂肪酶为单一条带，等电点为3．2，天然分子质量为43．7kDa。以P—NPP为底物，在pH6、50℃条件下，K。=15．67mmol·L^-1；脂肪酶对多种油脂均有水解作用；此酶在65℃以下，pH3—12稳定，在50℃、pH4表现出相对高的酶活性；Ca^2＋、Co^2＋、Mn^2＋、Ni^2＋、卵磷脂、胆酸钠对脂肪酶活性有激活作用，Hg^2＋有抑制作用；PMSF对此脂肪酶有特异性修饰作用。结论确定了黑曲霉脂肪酶的部分酶学性质，为脂肪酶的应用提供了理论依据。
- 师慧孟尧范翔李刚锐孟延发
- 关键词：黑曲霉脂肪酶分离纯化
- 重组人促红细胞生成素的基本特性研究被引量：2
- 2004年
- 重组EPO细胞灌注法培养的收获液,用Q SepharoseXL,C4反相疏水和Superdex75层析柱纯化表达的EPO.经SDS PAGE、PAGE和HPLC分析纯度达98%以上,总回收率为17%.经SDS PAGE分析其表观分子量为32～40kD.用IEF方法测得pI为3.75～4.15.网织红细胞计数法测得体内比活大于1.5×105IU,用ELISA测得体外活性为1.5×106～1.6×106IU.纯化的EPO的氨基酸组成和其它一些性质也进行了研究.
- 李强葛永红孟尧姚明明刘兰军沈富兵王黔川孟延发
- 关键词：EPO重组人促红细胞生成素网织红细胞计数体外活性IEFSDS-PAGE分析
