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胆固醇酯酶高产菌株的筛选及动力学性质研究被引量：7: 2006年; 通过平板初筛和摇瓶复筛,得到一株胆固醇酯酶的高产菌株,研究了pH值、温度、底物浓度、一些有机和无机试剂对胆固醇酯酶酶促反应速度的影响。研究发现,胆固醇酯酶有较好的酸碱稳定性,pH值为5.0￣8.0;最适pH值和最适温度分别为pH7.0和40℃,该酶的动力学研究表明,对胆固醇亚油酸酯和胆固醇油酸酯都表现为典型的米氏规律,Km值分别为2.2×10-5mol/L3.1×10-5mol/L,同时研究了一些金属离子和有机化合物对酶活性的影响,发现Mg2+、EDTA对胆固醇酯酶有激活作用。; 武翠玲谭晓晶姚明明张锐卢戌孟尧孟延发; 关键词：RHODOCOCCUS 动力学特性

产朊圆酵母尿酸酶形成条件研究: 2005年; 择到一株产尿酸酶较高水平的产朊圆酵母(Torula utilisHenneb).对此菌株尿酸酶形成条件的研究表明:蔗糖、葡萄糖是酶形成的适合碳源;蛋白胨和酵母膏是产酶的适合氮源,另添加无机氮源对产酶略有帮助作用;尿酸、黄嘌呤和鸟嘌呤对酶形成起诱导作用,底物尿酸是适宜的诱导物.尿酸酶形成最适培养基组成为(%):蔗糖3,蛋白胨2,酵母膏0.5,(NH4)2SO40.05,尿酸0.05,KCl 0.04,Pb2+、Fe3+、Hg2+、Mg2+、Ag+、Ca2+、Zn2+不利于产酶.另对培养条件做了优化探索:最适pH为6.0,在250mL三角瓶中装30mL培养液,接种量10%,在200r/min的旋转摇床上28℃振荡培养23h.; 杨波余彩霞辛渝许晓燕谭晓晶卢戌喻堃武翠玲孟延发; 关键词：尿酸酶发酵

产朊圆酵母尿酸酶的分离纯化及其部分性质研究被引量：1: 2005年; 产朊圆酵母Y0401经尿酸诱导培养,菌体采用超声波处理,依次经过DEAE-Sepharose离子交换层析、Phenyl Sepharose CL-4B疏水层析和Xanthine-agarose亲和层析,尿酸酶比活力达到18U/mg,纯化倍数为409倍,回收率为19.2%.纯化后的酶经还原、非还原SDS-PAGE分析为单一蛋白染色带,HPLC显示纯度为98%以上.用HPLC和Superdex 200分子筛层析两种方法测得该酶的相对分子质量为127kDa,在还原条件下进行SDS-PAGE,测得表观分子质量为33kDa,综上结果推测该酶是由分子量相同的4个亚基组成的四聚体蛋白.等电聚焦显示其等电点在6.8～7.5之间.该酶具有较强的酸碱稳定性和热稳定性.最适pH为8.5,最适温度为40.0℃.在最适pH和温度条件下测得该酶Km值为3.34×10-5 mol/L.对某些金属离子和有机物对酶活性的影响也进行了研究.; 辛渝潭晓晶杨波卢戌余彩霞许晓燕孟延发; 关键词：尿酸酶

Rhodococcus sp.发酵条件及其胆固醇酯酶的部分性质被引量：2: 2006年; Rhodococcussp.经发酵培养可合成分泌胆固醇酯酶。对该菌种进行诱导及发酵条件的优化,确定其培养基为(%):蛋白胨1.3,KCl 0.5,牛肉膏0.1,Na2HPO40.632,MgSO40.06,油酸0.4,卵磷脂0.25,Triton X-100 0.16;最适培养条件为:pH7.4,250 mL三角瓶中装量40 mL,接种量6.0%,摇床转速180r/min,30℃培养24h。在最适培养基及最适培养条件下,胆固醇酯酶比活力可达到5.47 U/mg。酶学性质研究结果表明,该酶的最适温度为40℃,最适pH为7.0。; 武翠玲谭晓晶孟尧张锐姚明明卢戌孟延发; 关键词：RHODOCOCCUS 发酵正交实验

红毛五加多糖的分离纯化和表观分子质量测定被引量：7: 2005年; 红毛五加经热水浸提,用Sevag法脱蛋白,经DEAE cellulose32离子交换层析和SephacrylS 200HR凝胶层析纯化得到3个主要多糖组分:AHP I、AHP II、AHP Ⅲ.经HPLC和SephacrylS 300HR凝胶层析鉴定,3种多糖均为均一组分.HPLC测定AHP I、AHP II、AHP Ⅲ的表观分子质量分别为:7.0kD、59.5kD和12.9kD,SephacrylS 300HR凝胶层析进行验证,得到相似结果.; 陈永卢戌谭晓晶孟尧辛渝许晓燕杨波李强于彩霞孟延发; 关键词：红毛五加多糖分离纯化

链球菌产磷酸甘油氧化酶的基本特性被引量：2: 2006年; 介绍了经筛选的链球菌（StreptococcusSP．）产磷酸甘油氧化酶的分离纯化及部分性质的研究．发酵培养液经离心收集菌体，用超声波破碎，40％～75％硫酸铵沉淀法进行粗分级，再通过Q-Sepharose FF、Phenyl—Sepharose CL-4B、Chelating Sepharose FF和Sephacryl S-200HR层析纯化，纯化的磷酸甘油氧化酶在还原、非还原SDS-PAGE中显示单一条蛋白着色带并测得该酶的表观分子质量为67．6kDa，用HPLC测得其天然状态酶的表观分子质量为121kDa，据此推测该酶由两个分子质量相同的亚基组成．酶学动力学研究结果表明，该酶的最适温度为35℃，最适pH为8．0，最适条件下测得Km为3．22×10^-2mol／L．一些金属离子和某些有机物对酶活性的影响也进行了讨论．; 卢戌赵兴秀张锐孟尧武翠玲孟延发; 关键词：磷酸甘油氧化酶 STREPTOCOCCUS 动力学特性

Enterococcus faecalis磷酸甘油氧化酶基本性质的研究: 核糖体小亚基RNA(16S rRNA)基因为所有的细菌共有，且其与细菌整个基因组的变化相比，具有高度的保守性。因此用16S rDNA保守区引物进行PCR扩增，可快速检测细菌。本文用16S rDNA的PCR方法并结合其它形...; 卢戌; 关键词：磷酸甘油氧化酶粪肠球菌酶活性; 文献传递

短杆菌属产胆固醇氧化酶的发酵条件优化被引量：7: 2006年; 短杆菌属(Brevibacterium sp.)是胆固醇氧化酶高产菌,对其进行底物诱导及发酵条件的优化,其最适培养基为蔗糖0.3%,酵母膏0.2%,蛋白胨0.3%,牛肉膏0.3%,K2HPO4 0.1%,MgSO4 0.05%,pH6.8。最适培养条件为接种量5%,24℃培养20h,通气量为50mL培养基/250mL三角瓶,200r/min。结果表明,胆固醇氧化酶的酶活力可达到2439U/L,比未优化前195U/L提高了12倍。在pH6.5和温度54℃条件下测得酶米氏常数Km值为7.1×10-5 mol/L。; 张锐许晓燕孟尧卢戌武翠玲姚明明孟延发; 关键词：胆固醇氧化酶短杆菌属

红毛五加多糖的基本性质研究被引量：15: 2004年; 本文从红毛五加中分离得到了三种多糖 ,并对它们的基本性质进行了研究。红毛五加经热水浸提 ,用Sevag法脱蛋白 ,经DEAE cellulose 32离子交换层析和SephacrylS 2 0 0HR凝胶层析纯化得到三个主要多糖组分 :AHP I、AHP II和AHP III。HPLC测定AHP I、AHP II和AHP III的表观分子质量分别为 7.0kD、5 9.5kD和 12 .9kD。红外光谱分析三种多糖具有多糖类物质的一般特征。经纸层析和GC结果综合分析得知 ,AHP I含有阿拉伯糖、岩藻糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖 ,其摩尔比为 1.0 0∶1.4 0∶0 .6 4∶3.13∶2 .0 9;AHP II含有鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖 ,其摩尔比为 0 .36∶1.0 0∶0 .15∶0 .2 0∶1.10 ;AHP III含有鼠李糖、阿拉伯糖、岩藻糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖 ,其摩尔比为 1.2 2∶1.0 0∶0 .4 0∶0 .2 8∶0 .2 6∶1.0 3。咔唑硫酸法测得AHP II、AHP III的糖醛酸含量分别为 6 .7%和 6 .0 % ;AHP I不含糖醛酸。体内试验表明 ,红毛五加粗多糖对小鼠S180 肉瘤有明显抑制作用。; 陈永李强谭晓晶卢戌许晓燕辛俞杨波余彩霞孟延发; 关键词：红毛五加多糖甘露糖 S180肉瘤糖醛酸鼠李糖硫酸法

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卢戌