李金波
- 作品数：8 被引量：3H指数：1
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- 发文基金：黑龙江省自然科学基金黑龙江省卫生厅科研项目国家自然科学基金更多>>
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- 大鼠SCN5A基因内含子1 +204 bp^+757 bp转录调控功能分析被引量：1
- 2007年
- 目的克隆大鼠心肌SCN5A基因5′端调控区,检测目的片段在HEK293细胞中的转录活性。方法扩增大鼠心肌SCN5A基因+204 bp^+757 bp、+204 bp^+385 bp和+204 bp^+329 bp片段,构建含目的片段的荧光素酶报告基因——pGL3-P0、pGL3-P1和pGL3-P2,比较HEK293细胞中荧光素酶活性,评价不同长度DNA片段的转录调控活性。结果成功构建大鼠心肌SCN5A基因5′端3个片断的荧光素酶报告基因,HEK293细胞中pGL3-P1相对荧光素酶活性分别为pGL3-P0、pGL3-P2的4.3倍和2.8倍。结论SCN5A基因内含子1目的片段在HEK293细胞中具有较强的转录调控活性;SCN5A基因+329 bp^+385 bp为正调控区,软件分析MZF1、USF、C-ETs-1等因子能与这些正调控区域结合并可能参与SCN5A基因的表达调控。
- 刘宇李晖董钦张振明李凤兰李金波马宁
- 关键词：SCN5A基因转录调控顺式作用元件
- μ-芋螺毒素-KIIIA的基因工程制备方法
- 本发明公开了一种μ-芋螺毒素--KIIIA的基因工程制备方法，包括：将μ-芋螺毒素KIIIA基因插入带有Trx-tag的原核表达载体构建得到重组原核表达载体；将所述的重组原核表达载体转化大肠杆菌，诱导目的蛋白的表达；收集...
- 李晖董钦李凤兰管荟苓李金波马健慧赵雪娇蒋倩倩
- 文献传递
- SCN5A基因启动区+495bp～+584bp片段的克隆与功能分析
- 2007年
- 目的为了研究大鼠心肌SCN5A基因启动区+495bp^+584bp区域内的顺式作用元件对转录调控的影响。方法应用聚合酶链反应扩增大鼠心肌SCN5A基因启动区+495bp^+584bp片段,与荧光素酶报告基因载体pGL3-promoter重组,以pGL3-promoter空载体为对照,瞬时转染人胚肾母细胞(HEK293)和小鼠胚胎心肌细胞(H9C2),检测荧光素酶活性。结果成功构建的pGL3-P1重组载体的荧光素酶活性与pGL3-promoter对照载体相比,在HEK293细胞无明显差别(P>0.05),在H9C2细胞荧光活性增高(22.5±5.4)倍(P<0.01)。结论大鼠心肌SCN5A基因启动区+495bp^+584bp区域存在对基因的转录调控活性具有增强作用的组织特异性顺式作用元件。
- 张振明李晖董钦刘宇李凤兰马宁李金波刘端阳舒畅逄淑超
- 关键词：SCN5A基因转录调控顺式作用元件荧光素酶报告基因
- 钠离子通道阻断剂μ-芋螺毒素KIIIA的表达、纯化及活性测定
- 本研究旨在利用基因工程方法,构建高特异性钠通道阻滞剂μ-芋螺毒素 KIIIA,诱导表达芋螺毒素(CTX)和硫氧还蛋白(Thioredoxin,Trx)的融合蛋白,经纯化制备高纯度融合蛋白,为进一步获
- 李金波马建会李凤兰舒畅程禾逄淑超李晖
- 文献传递
- 低氧对大鼠心肌细胞PKA活性与SCN5A基因表达影响的研究
- 目的通过观察大鼠心肌细胞低氧培养不同时间段的细胞蛋白激酶 A(Protein kinase A,PKA) 活性与心肌细胞 Na+通道基因 SCN5A 的表达情况,探讨低氧环境对心肌 Na+通道基因表达及 PKA 活性的
- 马宁李凤兰陈诗慧李金波刘端阳李晖
- 文献传递
- 低氧对大鼠心肌细胞蛋白激A活性与SCN5A基因表达的影响被引量：2
- 2009年
- 目的研究低氧对培养大鼠心肌细胞蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)与SCN5A基因表达的影响。方法将原代培养的大鼠乳鼠心肌细胞随机分为5组:对照组、低氧(5%CO2+2%O2+93%N2)培养1h组、6 h组、12 h组和24 h组,利用非放射性方法测定各组细胞内PKA活性,利用RT-PCR和Western blot等方法检测各组SCN5A基因表达情况。结果各组PKA活性:低氧1h组和低氧6 h组高于正常组(P<0.01),低氧12 h组和24 h组低于正常组(P<0.01)。SCN5AmRNA相对表达量与蛋白质表达量:低氧1h组和低氧6h组显著高于对照组;低氧12 h组和低氧24 h组显著低于对照组。结论低氧对培养细胞内PKA活性与SCN5A基因的表达有一定调节作用,且对PKA的作用早于对SCN5A基因表达的作用,PKA可能参与影响大鼠心肌细胞缺氧后SCN5A基因的表达。
- 马宁李凤兰陈诗慧李金波刘端阳李晖
- 关键词：蛋白激酶A心肌细胞低氧SCN5A
- μ-芋螺毒素-KIIIA的基因工程制备方法
- 本发明公开了一种μ-芋螺毒素-KIIIA的基因工程制备方法，包括：将μ-芋螺毒素-KIIIA基因插入带有Trx-tag的原核表达载体构建得到重组原核表达载体；将所述的重组原核表达载体转化大肠杆菌，诱导目的蛋白的表达；收集...
- 李晖董钦李凤兰管荟苓李金波马健慧赵雪娇蒋倩倩
- 钠离子通道阻断剂μ-芋螺毒素KⅢA的表达、纯化及活性测定
- 目的：本研究旨在利用基因工程方法,构建高特异性钠通道阻滞剂μ-芋螺毒素KⅢA原核表达质粒,诱导表达芋螺毒素(CTX)和硫氧还蛋白(Thioredoxin,Trx)的融合蛋白,经纯化制备高纯度融合蛋白,为进一步获得目的小肽...
- 李金波
- 关键词：芋螺毒素活性测定生物学活性镇痛作用
