胡刚
- 作品数：19 被引量：19H指数：2
- 供职机构：暨南大学医学院血液病研究所更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目国务院侨办重点学科基金广州市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- DNA疫苗诱导白血病患者抗白血病免疫反应的研究
- 李扬秋杨力建林晨陈少华黄梅娟汤冀胡刚吴秀丽谭玉波等
- 构建TCR Vβ2、PML-RARα和PML-RARα与GM-CSF或IL-2等4种重组表达载体，经体外细胞表达和小鼠动物体内免疫实验研究证实所构建DNA疫苗的效应。研究成果提供了4种具有自主知识产权的产品，为开展白血病...
- 关键词：
- 关键词：白血病免疫治疗DNA疫苗免疫反应
- DNA疫苗免疫增强效应研究进展被引量：2
- 2007年
- DNA疫苗能够诱导机体产生特异性体液和细胞免疫反应,而且与传统疫苗相比具备诸多优点。DNA疫苗能够在小鼠体内诱导有效的免疫应答,但是其效力在灵长类动物和人体内却不尽人意。目前已经有很多方法用于增强DNA疫苗的免疫原性,本文就增强DNA疫苗免疫效应常用方法的最新进展作一综述。
- 胡刚李扬秋
- 关键词：DNA疫苗免疫原性
- PML-RARα系列重组质粒在BALB／c小鼠体内表达分析被引量：1
- 2008年
- 目的检测PML-RARα融合基因疫苗在小鼠体内的转录和表达。方法用成功构建的重组质粒(PML-RARα-hIL-2)免疫小鼠,于第0周、2周、4周在双侧股四头肌各注射1次,分离注射部位肌肉,用RT-PCR检测目的基因在小鼠骨骼肌中的转录;应用免疫组织化学染色法检测重组质粒蛋白表达。结果小鼠注射部位肌肉中检测到PML-RARα及hIL-2基因的转录,并可检测到hIL-2蛋白的表达。结论所构建的PML-RARα系列重组质粒可以在小鼠体内有效地表达基因产物,具有DNA疫苗的基本特性。
- 岑东芝周羽竝胡刚杨力建陈少华李扬秋
- 关键词：PML-RARΑHIL-2急性早幼粒细胞白血病DNA疫苗
- PML-RARα-hIL-2 DNA疫苗诱导BALB／c小鼠的细胞和体液免疫应答被引量：1
- 2008年
- 目的分析PML-RARα融合基因疫苗诱导小鼠特异体液和细胞免疫应答情况。方法用成功构建的重组质粒(pIRES-PML-RARα-hIL-2)免疫小鼠后,分别利用ELISA法检测小鼠血清中INF-γ生成情况;LDH释放法检测小鼠脾细胞特异性CTL细胞针对APL细胞株NB4的杀伤率;用间接免疫荧光法检测血清中抗PML-RARα抗体。结果免疫后第7周时,小鼠血清中INF-γ含量、抗PML-RARα抗体及脾脏CTL细胞针对NB4的杀伤率均高于对照组。结论所构建的pIRES-PML-RARα-hIL-2重组质粒可诱导小鼠产生了特异性体液和细胞免疫应答。
- 杨力建岑东芝周羽竝胡刚陈少华李扬秋
- 关键词：PML-RARΑHIL-2DNA疫苗细胞毒活性
- PML-RARα-hIL-2 DNA疫苗免疫BALB／c小鼠后胸腺初始T细胞水平变化被引量：1
- 2008年
- 目的了解PML-RARα-hIL-2基因疫苗免疫小鼠后胸腺初始(na(?)ve)T细胞变化情况。方法利用实时定量PCR检测小鼠胸腺组织DNA中T细胞受体删除DNA环(TRECs)的水平,从而评价小鼠胸腺中na(?)ve T细胞含量。结果利用PML- RARα-hIL-2 DNA疫苗免疫小鼠后胸腺中所含的TRECs拷贝数明显高于单个基因疫苗PML-RARα或hIL-2组及对照组。结论所构建的PML-RARα-hIL-2双表达质粒可诱导小鼠胸腺产生na(?)ve T细胞数量增加,可能与产生更强的细胞免疫应答有关。
- 周羽竝岑东芝杨力建陈少华胡刚李扬秋
- 关键词：PML-RARΑHIL-2TRECS
- pIRES-PML-RARα-IFN-γ重组质粒体外表达检测
- 2018年
- 目的:检测pIRES-PML-RARα-IFN-γ重组质粒在真核细胞中的表达情况,为急性早幼粒细胞白血病DNA疫苗的研发提供资料。方法:将构建成功的pIRES-PML-RARα-IFN-γ重组质粒转染A549细胞株,提取总RNA,逆转录合成c DNA,采用RT-PCR法检测PML-RARα和IFN-γ基因的表达情况。提取转染后A549细胞的上清液采用Western blot和ELISA法检测PML-RARα和IFN-γ蛋白的表达情况。结果:RT-PCR结果证明转染了重组质粒的A549细胞的c DNA中含有相应的目的基因。ELISA和Western blot结果表明,重组质粒能够在A549细胞中表达出相应的目的蛋白。结论:pIRESPML-RARα-IFN-γ重组质粒能够在真核细胞中进行正常的转录及翻译。
- 胡刚胡刚李扬秋
- 关键词：PML-RARΑIFN-Γ早幼粒细胞白血病DNA疫苗
- PML-RARα/pIRES和PML-RARα/pSecTag重组载体的构建和鉴定被引量：1
- 2006年
- 目的构建PML-RARα基因重组表达质粒,为发展PML-RARα基因疫苗提供实验依据。方法利用RT-PCR方法从急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4细胞中扩增出465bp的位于PML-RARα融合基因的框内结构的片段,克隆至真核表达载体pIRES和分泌载体pSecTag后,经酶切和序列分析鉴定重组质粒的构建情况。结果经酶切鉴定和序列测定表明,PML-RARα目的基因已正确插入真核表达载体中,构成了目的重组载体。结论成功构建了PML-RARα/pIRES和PML-RARα/pSecTag重组真核表达质粒,可进一步用于PML-RARα基因疫苗的实验研究。
- 汤冀李扬秋周羽竝杨力建陈少华胡刚罗更新
- 关键词：克隆急性早幼粒细胞白血病
- B-ALL患者外周血TCR Vβ1-Vβ8-Dβ1 sjTRECs的检测情况
- ＜正＞目的了解B细胞-急性淋巴细胞白血病（B-ALL）患者外周血T细胞中TCR Vβ1至Vβ8 等8种信号T细胞受体删除DNA环（sjTRECs）的存在情况,从而了解胸腺近期输出TCR Vβ1～Vβ8 naive细胞的功...
- 李闯李扬秋尹青松陈少华杨力建胡刚卢育洪
- 文献传递
- MDS患者外周血中TCR Vβ1-Vβ8-Dβ1sjTRECs的检测情况
- ＜正＞骨髓增生异常综合征（MDS）患者存在一定程度的细胞免疫异常情况。我们的近期研究结果提示MDS患者外周血T细胞TCR Vβ基因谱系存在缺失和出现克隆性增殖T细胞的现象。为进一步了解患者胸腺近期输出功能情况,本研究分析...
- 胡刚李扬秋尹青松陈少华杨力建李闯杜欣
- 文献传递
- PML-RARα245-hIL-2双基因表达载体的构建和表达研究
- 2012年
- 目的:采用长度为245 bp的PML-RARα融合基因片段构建一种新的PML-RARα融合基因与人白介素-2(hIL-2)基因真核双表达质粒。方法:利用RT-PCR从NB4细胞的RNA中扩增出包含PML-RARα基因融合点的长度为245 bp的基因片段,通过RT-PCR从Jurkat细胞中扩增hIL-2基因,并将两基因片段分别克隆到pIRES质粒中,通过酶切和测序验证重组质粒的正确性。将重组质粒转染A549细胞,通过RT-PCR检测该质粒在真核细胞中的转录情况,利用点杂交和ELISA技术检测目的蛋白的表达。结果:Nhe I/Mlu I和Sal I/Not I双酶切证明重组质粒中含有相应大小的PML-RARα融合基因片段和hIL-2基因,测序结果证明重组质粒中插入片段的碱基序列均完全正确。将构建的pIRES-PML-RARα245-hIL-2质粒转染A549细胞后经RT-PCR鉴定表明,插入到重组质粒中的PML-RARα和hIL-2基因能够在真核细胞中进行正常转录并翻译出相应蛋白。结论:成功构建了含有245 bp的PML-RARα基因与hIL-2基因的真核双表达载体,该载体能够在真核细胞中正常转录并翻译出PML-RARα和hIL-2蛋白,为利用DNA疫苗治疗急性早幼粒细胞白血病提供了更丰富的资料。
- 胡刚岑东芝杨力建陈少华周羽竝李扬秋
- 关键词：PML-RARΑ融合基因HIL-2急性早幼粒细胞白血病DNA疫苗
