邱炎
- 作品数：10 被引量：5H指数：1
- 供职机构：军事医学科学院生物工程研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 一种幽门螺杆菌尿素酶B抗原表位多肽及其应用
- 本发明公开了一种幽门螺杆菌尿素酶B抗原表位多肽及其应用。该抗原表位多肽，其氨基酸序列为序列表中序列31。它的编码基因序列为序列表中序列22。本发明提供的抗原表位多肽能刺激机体产生抗幽门螺杆菌保护性免疫反应，从而增强对幽门...
- 刘纯杰王艳春邱炎陶好霞
- 文献传递
- Cre-LoxP系统在炭疽芽胞杆菌基因敲除中的应用及eag基因的敲除被引量：4
- 2009年
- 将Cre-LoxP系统应用于Bacillus anthracis中并成功敲除eag基因.以B.anthracis基因组为模板扩增得到上下游同源臂,联合两端带有LoxP位点的壮观霉素抗性基因片段构建好同源重组载体,转化B.anthracisAP422,通过一系列筛选得到带有抗性标记的重组菌.然后,通过转入Cre重组酶表达质粒,去除抗性标记,得到eag基因缺失的重组菌,并在DNA水平、RNA水平和蛋白质水平进行了系统的鉴定.最终建立了Cre-LoxP系统在B.anthracis中的应用方法,并成功敲除eag基因.
- 王艳春姜娜展德文邱炎袁盛凌陶好霞王令春张兆山刘纯杰
- 关键词：炭疽芽胞杆菌同源重组基因敲除
- 幽门螺杆菌HP0762蛋白的原核表达纯化及多克隆抗体制备被引量：1
- 2010年
- 目的:表达和纯化幽门螺杆菌HP0762蛋白,并制备该蛋白的多克隆抗体。方法:从幽门螺杆菌SS1中经PCR扩增得到了hp0762基因,将其克隆至含有6×His编码序列的原核表达载体pET-28a(+)中,再将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG诱导下进行蛋白表达;用HiTrap Chelating HP亲和柱纯化重组蛋白,Western印迹进一步鉴定;以纯化后的蛋白为抗原免疫新西兰大耳白兔,制备该蛋白的多克隆抗体;用ELISA和Western印迹检测抗血清。结果:目的蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中获得了可溶性表达,纯化后纯度可达90%以上;制备了针对HP0762重组蛋白的抗血清,抗体ELISA效价为1:256000,Western印迹分析表明该抗体能特异性识别内源性HP0762。结论:完成了HP0762蛋白的原核高效表达与纯化,并制备了其高效价的多克隆抗体,为进一步对其进行疫苗研制与基因功能研究奠定了基础。
- 李丛胜邱炎王艳春韩秀萍陶好霞徐兴然刘纯杰
- 关键词：幽门螺杆菌原核表达多克隆抗体
- 一种幽门螺杆菌尿素酶B抗原表位多肽及其应用
- 本发明公开了一种幽门螺杆菌尿素酶B抗原表位多肽及其应用。该抗原表位多肽，其氨基酸序列为序列表中序列31。它的编码基因序列为序列表中序列22。本发明提供的抗原表位多肽能刺激机体产生抗幽门螺杆菌保护性免疫反应，从而增强对幽门...
- 刘纯杰王艳春邱炎陶好霞
- 幽门螺杆菌hp0596基因缺失突变体的构建
- 2010年
- 目的:构建幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)hp0596基因缺失突变体,为进行hp0596基因功能研究奠定基础.方法:利用PCR技术,从H.pylori 26695基因组分别扩增得到hp0596基因的上游同源臂和下游同源臂,与两端带有FRT位点的氯霉素抗性基因片段共同构建同源重组载体;以重组载体为模板扩增打靶片段,将其转化入H.pylori 26695;在抗生素选择压力下,打靶片段和菌体基因组发生同源重组,通过氯霉素抗性筛选得到带有抗性标记的重组菌.结果:构建的突变载体经限制性内切酶酶切分析显示,产生的条带与预计结果完全一致.PCR方法扩增突变株0596,cmr基因显示,0596基因已经被完全敲除,经DNA测序,RNA水平,蛋白质水平证实筛选得到了0596基因缺失的H.pylori26695△0596突变株.连续培养7代后,H.pylori26695△0596突变株具有良好的稳定性.结论:获得了H.pylori26695△0596基因缺失突变体.
- 韩秀萍展德文王芃李丛胜袁盛凌陶好霞张丽邱炎李家奎刘纯杰
- 关键词：幽门螺杆菌突变体
- 炭疽菌保护性抗原受体结合区的表达及其多克隆抗体的制备
- 2009年
- 原核表达炭疽杆菌保护性抗原受体结合区并制备该蛋白的多克隆抗体。从炭疽芽胞杆菌A16R中经PCR扩增得到了炭疽菌保护性抗原(PA)受体结合区基因,即PA的第四结构域(PA-D4),将其克隆至含有6×His编码序列的原核表达载体pET-2b(+)中,将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG诱导下进行蛋白表达;用HiTrapTM Chelating HP柱纯化重组蛋白,Western blot进一步鉴定;以纯化后的蛋白为抗原,免疫新西兰大耳白兔制备该蛋白的多克隆抗体;用ELISA和Western blot检测抗血清。结果表明,目的蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中获得了可溶性表达,纯化后纯度可达90%以上;制备了针对PA-D4融合蛋白的高效价抗血清,ELISA抗体滴度为1∶102400;其抗体能特异性识别内源性的PA。PA-D4重组蛋白及其多克隆抗体的获得,为后续研究其功能和炭疽疫苗免疫保护机制奠定了基础。
- 邱炎王艳春展德文陶好霞姜娜韩秀萍李家奎刘纯杰
- 关键词：炭疽杆菌保护性抗原原核表达多克隆抗体
- 一种幽门螺杆菌抗原表位多肽及其应用
- 本发明公开了一种幽门螺杆菌尿素酶B抗原表位多肽及其应用。该抗原表位多肽，其氨基酸序列为序列表中序列34。它的编码基因序列为序列表中序列25。本发明提供的抗原表位多肽能刺激机体产生抗幽门螺杆菌保护性免疫反应，从而增强对幽门...
- 刘纯杰王艳春邱炎陶好霞
- 文献传递
- 幽门螺杆菌尿素酶B抗原表位多肽及其应用
- 本发明公开了一种幽门螺杆菌尿素酶B抗原表位多肽及其应用。该抗原表位多肽，其氨基酸序列为序列表中序列37。它的编码基因序列为序列表中序列28。本发明提供的抗原表位多肽能刺激机体产生抗幽门螺杆菌保护性免疫反应，从而增强对幽门...
- 刘纯杰王艳春邱炎陶好霞
- 幽门螺杆菌尿素酶B抗原表位多肽及其应用
- 本发明公开了一种幽门螺杆菌尿素酶B抗原表位多肽及其应用。该抗原表位多肽，其氨基酸序列为序列表中序列37。它的编码基因序列为序列表中序列28。本发明提供的抗原表位多肽能刺激机体产生抗幽门螺杆菌保护性免疫反应，从而增强对幽门...
- 刘纯杰王艳春邱炎陶好霞
- 文献传递
- 一种幽门螺杆菌抗原表位多肽及其应用
- 本发明公开了一种幽门螺杆菌尿素酶B抗原表位多肽及其应用。该抗原表位多肽，其氨基酸序列为序列表中序列34。它的编码基因序列为序列表中序列25。本发明提供的抗原表位多肽能刺激机体产生抗幽门螺杆菌保护性免疫反应，从而增强对幽门...
- 刘纯杰王艳春邱炎陶好霞
