郭张燕
- 作品数：27 被引量：56H指数：5
- 供职机构：第四军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划长江学者和创新团队发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 利用免疫磁珠分离鉴定miRNA靶基因的方法研究被引量：2
- 2011年
- 目的:利用免疫磁珠分离鉴定miRNA靶基因,建立一种经济、有效、快捷的miRNA靶基因鉴定方法。方法:直接提取细胞总RNA后加入生物素标记的miRNA分子共孵育,而后利用免疫磁珠分离与miRNA结合的mRNA,或将生物素标记的miRNA分子瞬时转染HeLa或HepG2细胞,48h后裂解细胞并在离心后应用链霉亲和素磁珠分离与miRNA特异性结合的mRNA。将分离获得的mRNA反转录获得cD-NA,并以其为模板,以特异性引物和Oligo(dT)进行PCR扩增,而后经过克隆测序,通过生物信息学方法比对测序结果,鉴定miRNA的靶基因。结果:利用已知的let-7靶基因证实了上述方法的有效性,并通过该方法鉴定出let-7的一个新的靶基因。结论:建立了免疫磁珠分离鉴定miRNA靶基因方法,为miRNA靶基因的研究提供新的实验学方法。
- 白久旭王涛赵智凝孟艳玲郭张燕杨安钢
- 关键词：MIRNA靶基因免疫磁珠
- 人CD4+T细胞活化相关的miRNA的筛选和功能鉴定
- 目的：筛选与T淋巴细胞活化相关的miRNA,利用生物信息学方法预测其靶分子,检测miRNA与靶分子之间的关系.意义：深入研究miRNA在T细胞活化过程中的作用有助于我们更好的调控适应性免疫应答.方法：用Exiqon mi...
- 薛茜李伟郭张燕王涛杨安钢
- 关键词：MIRNAT淋巴细胞活化
- 食管癌细胞Ezrin基因转录调控区克隆及其启动子活性的鉴定被引量：1
- 2008年
- 目的:克隆食管癌侵袭转移相关基因Ezrin的转录调控区序列,进行启动子活性鉴定及初步的生物信息学分析。方法:利用在线程序对Ezrin基因可能的转录调控区进行GC含量和CpG岛分析以及转录因子结合位点预测;采用PCR法从食管癌细胞基因组DNA中克隆Ezrin基因-1759/+134和-726/+134区段,构建萤火虫荧光素酶报告基因表达质粒pGLB-hE(-1759/+134)和pGLB-hE(-726/+134),检测所克隆片段的启动子活性。结果:Ezrin基因5′侧翼区为高GC含量区,存在CpG岛,无典型的TATA盒,然而转录因子Sp1结合位点却无处不在。与对照质粒pGLB相比,重组质粒pGLB-hE(-726/+134)具有较强的荧光素酶活性,pGLB-hE(-1759/+134)的荧光素酶活性约是pGLB-hE(-726/+134)的2倍。结论:Ezrin基因的-726/+134区段具有启动子活性,含有Ezrin基因的核心启动子区和调节性启动子区;-1759/-726区段具有增强启动子活性的作用,含有Ezrin基因增强子元件区。
- 高书颖许丽艳崔磊郭张燕蔡唯佳孟令英李恩民
- 关键词：食管肿瘤基因表达调控
- ImmunoAIF△1-480融合蛋白对HER2阳性肿瘤细胞的杀伤作用被引量：2
- 2008年
- 目的:观察免疫促凋亡分子ImmunoAIF△1-480对HER2阳性肿瘤细胞的杀伤作用。方法:利用PCR的方法将九聚精氨酸编码序列(R9)与AIFC-末端结构域编码区重组,然后将R9-AIF△1-480基因与pCMV-e23sFv载体重组,构建免疫促凋亡分子ImmunoAIF△1-480真核表达载体。用脂质体法转染CHO细胞,经G418筛选,建立稳定转染的细胞株,通过RT-PCR、Westernblot、流式细胞术(FCM)等方法检测重组基因在转染细胞中的表达及其对HER2阳性肿瘤细胞的特异性杀伤活性。结果:经过酶切鉴定与测序证实,带有Im-munoAIF△1-480基因的真核表达载体构建成功,经RT-PCR、Westernblot可检测到培养上清中免疫促凋亡基因的表达,用FCM检测发现融合蛋白ImmunoAIF△1-480对HER2阳性肿瘤细胞SGC-7901和SKBR-3有明显的促凋亡活性,而对不表达HER2分子的ECV-304细胞几乎没有影响。结论:Immuno-AIF△1-480可以特异性杀伤HER2阳性肿瘤细胞。
- 韩涛张勇孙书明任君琳李伟郭张燕孟艳玲杨安钢
- 关键词：凋亡诱导因子细胞凋亡
- 《免疫与感染基础》模块教学的总结和思考被引量：6
- 2016年
- 作为生命科学领域的前沿学科和一门重要的交叉学科,医学免疫学在所有医学类院校的基础医学课程体系中占据着重要位置,在基础医学与临床医学教学间起着桥梁作用。近年来科学技术的飞速发展,带动了医学免疫学学科本身的迅猛发展,加之我国目前的医学教育模式正在积极推进改革,医学免疫学作为基础医学教育中的支柱学科,如何使之顺应医学教学改革的新方向,如何使医学生摆脱免疫学单一学科的晦涩难懂及学科本身抽象枯燥的难题，使学生在掌握医学免疫学理论的基础上，全面系统了解疾病发生发展过程中的免疫调控规律，同时提高授课内容的丰富性及趣味性，是目前免疫学教学改革的重点。
- 郭张燕陈丽华温伟红杨琨刘侃杨安钢
- 关键词：模块教学基础医学教育基础医学课程医学教育模式医学教学改革临床医学教学
- 参与T淋巴细胞活化的microRNA的筛选和鉴定
- 筛选与T淋巴细胞活化相关的microRNA,构建microRNA的表达载体,检测其与T淋巴细胞活化的关系。用抗CD3的单克隆抗体和抗CD28的单克隆抗体诱导Jurkat细胞,
- 薛茜李伟郭张燕王涛杨安钢
- 文献传递
- 过表达前列腺特异性膜抗原和荧光素酶的PC3稳定细胞系的建立及成瘤性鉴定被引量：2
- 2017年
- 目的利用慢病毒感染的方法建立能稳定表达前列腺特异性膜抗原(PSMA)和荧光素酶的PSMA^+-PC3细胞系,并将其接种到裸鼠皮下检测其成瘤能力。方法包装表达PSMA的慢病毒和表达荧光素酶的慢病毒,将其感染PC3细胞后,用嘌呤霉素进行筛选,建立能够稳定表达PSMA和荧光素酶的PSMA^+ -PC3细胞和仅表达荧光素酶的PSMA--PC3细胞;利用流式细胞术检测PSMA的表达情况。将PSMA^+ -PC3和PSMA^- -PC3细胞接种于裸鼠皮下建立荷瘤模型,利用生物发光成像法观察其在体内的成瘤情况,利用免疫组织化学染色法检测PSMA^+ -PC3和PSMA^- -PC3肿瘤组织中PSMA的表达情况。结果成功建立了能够稳定表达PSMA和荧光素酶的PSMA^+ -PC3细胞和仅表达荧光素酶的PSMA^- -PC3细胞,流式细胞术检测证实PSMA^+ -PC3细胞上PSMA呈阳性表达,小动物活体成像结果显示PSMA^+ -PC3和PSMA^- -PC3细胞均可有效成瘤,免疫组织化学染色检测证实PSMA^+ -PC3肿瘤上PSMA的表达为阳性。结论成功建立了能稳定表达PSMA和荧光素酶的PSMA^+ -PC3细胞系,并在裸鼠体内证实其可有效成瘤,为靶向PSMA的研究提供了有用的细胞和动物模型。
- 张玲玲吴介恒韩东晖史圣甲杨发谢品席文锦郭张燕秦卫军杨安钢温伟红
- 关键词：PSMA
- TRBP及其截短体真核表达载体的构建与表达被引量：1
- 2009年
- 目的:构建TRBP及其截短体真核表达载体,并检测其在HeLa细胞中的表达。方法:设计引物扩增TRBP全长及其截短体TAB、TAC、TBC基因序列,然后将各基因片段克隆入真核表达载体pFlag-CMV4。用脂质体法转染HeLa细胞,经Western blot方法检测目的基因在转染细胞中的表达。结果:经过酶切鉴定与测序证实,TRBP全长及其截短体TAB、TBC、TAC基因真核表达载体构建成功,经Western blot可检测转染细胞中各基因的表达。结论:成功构建了TRBP全长基因及其截短体TAB、TAC和TBC基因真核表达载体,在转染细胞中可以检测到目的基因的表达。
- 韩涛张勇孙书明孟艳玲李伟郭张燕杨安钢
- 关键词：RISCMIRNA真核表达
- 人食管癌细胞Fascin基因启动子区调控元件
- 本发明涉及基因表达调控，公开了一种人食管癌细胞Fascin1基因启动子区调控元件。本发明首次鉴定了人食管癌细胞Fascin1基因启动子，并将5′端序列逐渐缺失的启动子序列插入报告基因上游构建了一系列真核表达质粒，转染哺乳...
- 许丽艳郭张燕高书颖杨章民谢剑君李恩民
- 文献传递
- E盒锌指结合蛋白1基因沉默抑制结肠癌HCT116细胞增殖并促进其凋亡被引量：3
- 2014年
- 目的使用针对E盒锌指结合蛋白1(ZEB1)的siRNA在结肠癌HCT116细胞中下调ZEB1的表达,研究其对HCT116细胞增殖和凋亡的影响。方法根据人ZEB1的mRNA序列设计并合成2对针对ZEB1的siRNA,瞬时转染HCT116细胞后,利用实时荧光定量PCR,Western blot法分别在mRNA和蛋白水平检测siRNA对ZEB1的抑制效果;利用MTT法检测细胞增殖;AnnexinⅤ-FITC/PI染色结合流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果与对照组相比,针对ZEB1的siRNA可在mRNA和蛋白水平有效抑制ZEB1的表达,ZEB1的表达下调可有效抑制HCT116细胞的增殖,并促进细胞凋亡。结论 ZEB1对结肠癌细胞的生存和增殖具有重要作用,可能参与结肠癌的发生发展过程。
- 郑国旭史圣甲魏铭席文锦郭张燕杨帆孟艳玲温伟红杨安钢
- 关键词：结肠癌细胞增殖
