陈欣虹
- 作品数：15 被引量：37H指数：4
- 供职机构：扬州大学医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省高校自然科学研究项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生文化科学更多>>
- 秀丽线虫野生株系和缺氧敏感株系的差异蛋白质组学研究
- 2012年
- 目的研究秀丽线虫(Caenorhabditis elegans)野生株系N2和缺氧敏感株系(ia04)的差异蛋白质,为进行线虫在缺氧环境下的应答机制研究奠定基础.方法同步化培养2种株系的线虫,培养至L4期时,常规方法提取总蛋白,采用双向电泳分离和串联质谱分析,搜索Swiss-Prot线虫数据库,鉴定蛋白种类并根据基因本体论(gene ontology,GO)进行分析.结果质谱成功鉴定了其中的25个差异显著蛋白(ratio>2.0,P<0.05),其中N2株系检测到的表达量比ia04株系高的主要是热休克蛋白(HSP-70,HSP-60)、GTP结合蛋白(TAG-210)、乙酰辅酶A脱氢酶中链(GN=T);ia04株系检测到的表达量比N2高的是延伸因子(EFT-3)和铁硫蛋白-1(ISP-1),在ia04株系中,HSP的含量明显低于N2株系,说明这可能是ia04株系对缺氧敏感的原因之一.根据GO注释结果发现,鉴定到的这些差异蛋白与线虫的DNA合成及生长发育的相关性较大.结论蛋白质组学的方法为线虫缺氧的研究提供了有参考价值的数据,不同株系差异蛋白的发现可促进对缺氧应答机制的了解,且可从蛋白质水平揭示重要表型的基因表达机制.
- 李华玲陈文飞陈欣虹周晓霞张成岗
- 关键词：秀丽线虫蛋白质组学热休克蛋白
- 马立克氏病病毒超强毒感染鸡羽髓蛋白质组分析被引量：3
- 2011年
- 【目的】羽毛是细胞游离马立克氏病病毒(Marek's disease virus,MDV)释放的部位,为了解感染MDV后鸡羽中宿主基因表达的变化及对病毒感染的应答,进行了MDV感染鸡的羽髓蛋白质组学分析。【方法】1日龄无特定病原体(specific pathogen free,SPF)鸡人工感染MDV超强毒RB1B株(1000PFU),感染后21d采集鸡羽毛,提取羽髓蛋白,以17cm,pH5-8的IPG胶条进行二维电泳,以未感染病毒的SPF鸡羽髓蛋白为对照,使用PDQuest软件对二维电泳图谱进行差异蛋白分析,并选取部分差异斑点进行质谱鉴定。【结果】PDQuest软件分析发现攻毒组和对照组表达差异大于两倍的蛋白点有41个,其中攻毒组表达上调的蛋白点25个,下调的蛋白点7个,新出现的蛋白点有9个。质谱分析共成功鉴定了21个斑点,对应于20个蛋白。如载脂蛋白AI(apolipoprotein AI)、14-3-3 sigma(两个斑点均为该蛋白)、癌蛋白18(stathmin)等。【结论】功能预测表明这些蛋白涉及到宿主的抗病毒应答、物质代谢、细胞骨架成分、细胞增殖相关等方面。
- 陈欣虹卢占军钱琨金文杰王友秦爱建
- 关键词：马立克氏病病毒蛋白质组
- 晶胞接种法在肌动蛋白和木聚糖酶结晶中的应用被引量：2
- 2014年
- 晶胞接种法(seeding technique)包括微晶胞接种法(micro-seeding technique)和大晶胞接种法(macro-seeding technique).微晶胞接种法主要用于改善晶体的衍射质量.大晶胞接种法主要用于得到大体积晶体以提高衍射分辨率,尤其是晶体的中子衍射分辨率.本文采用连续多次微晶胞接种法极大地改进了肌动蛋白(actin)晶体的衍射质量,获得的单晶X-光衍射分辨率达到1.9.本文丰富了大晶胞接种法的内容,以此技术获得了体积达到2立方毫米的木聚糖酶(xylanase)巨大单晶,其中子衍射分辨率达到了2.0,从而为它的第一个中子衍射晶体结构的解析奠定了坚实的基础.
- 万群陈欣虹
- 关键词：肌动蛋白木聚糖酶
- 雏鸡法氏囊蛋白质组学双向电泳技术的建立及其初步分析被引量：5
- 2009年
- 为了建立并优化鸡法氏囊蛋白质组学的双向电泳技术体系,以不同日龄雏鸡的法氏囊组织为研究对象,用固相pH梯度胶条进行等电聚焦、SDS-PAGE垂直电泳,采用不同的样品制备方法,对上样量、水化、等电聚焦、胶条平衡和凝胶染色方法等进行一系列优化,并应用PDQuest8.0.1软件对图谱进行初步分析。结果显示法氏囊组织在pH 5~8范围1、7 cm的2-DE胶上可以得到很好的分离,胶体考染后经PDQuest软件分析,在正常法氏囊组织可检测到800个以上蛋白点,不同2-DE图谱间蛋白点平均匹配率为83.5%,不同日龄雏鸡法氏囊存在有明显表达差异的蛋白质点37个,其中表达上调蛋白点17个,表达下调蛋白点11个,新增蛋白点5个,消失蛋白点4个。试验建立的鸡法氏囊组织蛋白质组双向电泳技术为法氏囊发育进化及其免疫功能的研究提供了新技术和方法。
- 卢占军秦爱建陈欣虹苏钰文邵红霞金文杰钱锟王友朱玉峰
- 关键词：法氏囊蛋白质组双向电泳
- 血管活性肠肽对胶原诱导关节炎大鼠治疗的作用初探被引量：5
- 2005年
- 目的探讨血管活性肠肽(VIP)对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠的免疫调节作用,为应用VIP治疗类风湿关节炎(RA)提供理论依据.方法采用尾根部皮内多点注射法注射天然Ⅱ型胶原(CⅡ),免疫雌性Wistar大鼠(60只),建立CIA模型.随机取CIA成模大鼠(5只/组)于初次免疫后14～35 d,腹腔内注射不同浓度的VIP.定期进行临床、实验室、影像学及病理指标评估.结果不同剂量VIP (0.1、 1、 5 nmol隔日1次,共2周)治疗后CIA大鼠,其临床、实验室、影像学及病理指标明显缓解;正常鼠于VIP给药5 nmol 2周后重要脏器功能、组织学未见明显异常.结论生理浓度的VIP体内可缓解CIA鼠关节局部及全身免疫炎性反应,5 nmol 2周以内的体内治疗量基本安全,提示VIP可作为治疗RA有潜力的制剂.
- 程宏张育祝瑾周晓霞陈欣虹刘成林茅晶晶金菲
- 关键词：血管活性肠肽胶原诱导性关节炎神经免疫调节
- 鼠脑驱动蛋白的表达、纯化和结晶
- 2014年
- 驱动蛋白是一类利用水解ATP为ADP和磷酸的过程中释放的能量沿微管系统运动的蛋白。为了研究ATP中储存的化学能是如何转化为驱动蛋白的机械动能,鼠脑驱动蛋白的相关N-端区域在BL21-Codon Plus(DE3)-RP感受态大肠杆菌细胞中大量地表达。通过SP-强阳离子交换色谱和分子筛色谱的两步骤纯化,蛋白最终产量高达10 mg/L细胞培养液,蛋白纯度可以达到95%以上。纯化的蛋白具有水解ATP酶的活力,并与驱动蛋白抗体有特异性的反应。驱动蛋白可以在如下条件结晶:1.7 mol/L(NH4)2SO4,500 mmol/L NaCl,20%glycerol。晶体衍射的分辨率可以达到2.0。
- 万群祝娉婷吕后宁陈欣虹
- 关键词：驱动蛋白ATP纯化晶体
- 人源NOVA1蛋白的真核表达及其抗低氧活性鉴定
- 2016年
- 构建人NOVA1基因的真核表达载体pCMV-Myc-NOVA1,转染PC12细胞后筛选最佳转染条件,进而结合细胞免疫组织化学研究NOVA1蛋白在PC12细胞中的表达分布,并探究其抗低氧活性。根据NCBI数据库NOVA1基因序列设计上下游引物,以pCR4-TOPO-NOVA1载体为模板采用聚合酶链式反应扩增获得NOVA1基因的全长c DNA编码序列,限制性内切酶SalⅠ和XhoⅠ双酶切后插入pCMV-Myc真核表达载体,酶切及直接测序验证后采用脂质体转染法转染入PC12细胞,针对转染比例和转染时间进行优化,进而采用实时定量PCR和Western blotting检测NOVA1蛋白的表达,最后采用细胞免疫组织化学检测NOVA1蛋白在PC12细胞中的表达定位及其抗低氧活性。通过酶切和直接测序验证,成功构建了真核表达载体pCMV-Myc-NOVA1;质粒和Lipo2000最佳转染比例为1:2.5,最佳转染时间为72 h;最佳转染条件下NOVA1基因和蛋白的表达水平显著增加,转染pCMV-Myc-NOVA1质粒后,NOVA1蛋白主要分布于细胞核和细胞质;过表达NOVA1的PC12细胞增殖活性明显增加。本文采用分子克隆的方法成功构建了NOVA1基因的真核表达载体,通过条件优化实现了高效表达并测定过表达NOVA1蛋白具有明显的抗低氧活性,不仅为深入揭示NOVA1蛋白的作用机理提供了重要参考,而且为NOVA1蛋白潜在的药物开发提供了重要技术支撑。
- 李华玲吕贝孔玲陈欣虹朱素娟
- 关键词：真核表达载体
- 引入课堂应答系统 “唤回”学生注意力被引量：4
- 2019年
- 互联网时代,大学生在课堂上被各种网络媒体吸引而导致注意力不集中的现象越来越普遍。为"唤回"学生注意力,亟须改进教学模式。课堂应答系统利用现代信息媒体教学技术,可随时在课堂上对学生提问、考核,促进了教师和学生的直接互动。引入课堂应答系统可激发学生学习的积极性,迫使学生的注意力回到课堂。学生注意力回到课堂又可激发教师的教学热情,从而提升教学效果和学习效率。
- 陈欣虹
- 关键词：课堂应答系统注意力教学模式
- 实时定量PCR法在肝癌细胞β_2 M mRNA检测中的应用
- 2012年
- 目的探讨实时定量PCR法检测肝癌细胞β2微球蛋白(β2M)mRNA的应用价值。方法采用2-ΔΔCT定量PCR法检测肝癌SMMC 7721细胞株β2M mRNA表达水平。结果预实验确定目的基因(β2M)和内参基因(β-actin)的扩增效率较为一致。肝癌细胞中β2M基因表达水平明显低于正常肝细胞株L02(P<0.05)。结论2-ΔΔCT定量PCR法为定量检测肝癌细胞β2M基因的较好方法;可用于β2M在肝癌细胞中表达调控的研究。
- 陈欣虹程文婷吕丰伟刘明艳徐慧吴一鸣
- 关键词：Β2微球蛋白肝癌细胞定量聚合酶链反应
- 双向电泳分析鸡羽髓蛋白组学方法的建立被引量：2
- 2009年
- 为建立双向电泳方法研究鸡羽髓蛋白组学,以进一步了解病毒与宿主相互作用的新机制,从SPF鸡羽根挤出羽髓,提取其中蛋白进行双向电泳,并对不同裂解液、IPG胶条pH值范围、一向等电聚焦条件、二向SDS-PAGE凝胶浓度等影响因素进行优化。结果显示,采用17cm,pH5~8IPG胶条,400μg羽髓蛋白进行的双向电泳,图谱用PDQuest8.0.1分析,可分辨的蛋白点约为700左右,不同样本间的匹配率大于80%。可见,本研究建立的双向电泳方法分辨率及重复性均较高。
- 陈欣虹钱锟卢占军张晨飞王友邵红霞金文杰秦爱建
- 关键词：蛋白质组学双向电泳
