黄丽娟
- 作品数：8 被引量：5H指数：2
- 供职机构：天津医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金天津市科技发展战略研究计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 反义肽核酸阻断促甲状腺激素受体的表达以及对Graves'病可能的治疗作用
- 目的：1.探讨反义肽核酸对FRTL细胞膜表面促甲状腺激素受体表达的影响2.探讨反义肽核酸对类Graves'病可能的治疗作用
方法：1.细胞部分1.1设计两种分别与TSHRmRNA不同片段互补的asPNA，命名为N...
- 黄丽娟
- 关键词：反义肽核酸促甲状腺激素受体病理生理学促甲状腺激素
- 文献传递
- 实时定量RT-PCR方法检测豚鼠TSHR免疫BALB/c小鼠甲状腺TSHR的表达被引量：1
- 2005年
- 目的:建立外标准法SYBRGREENI实时定量(real-time)RT-PCR方法,以检测豚鼠TSHR分子免疫对BALB/c小鼠甲状腺TSHRmRNA的表达的影响。方法:取正常BALB/c小鼠甲状腺提取甲状腺总RNA,逆转录后进行PCR,得到333bp扩增产物。经回收纯化后作为real-timePCR的标准品,稀释为106、105、104、103、102、101拷贝,制作标准曲线;并同时进行普通PCR,比较其灵敏度。优化反应条件使溶解曲线有特异扩增。检测豚鼠TSHR分子免疫的BALB/c小鼠甲状腺TSHRmRNA的表达。结果:建立的外标准法SYBRGREENI实时定量RT-PCR方法可以灵敏的检测到10copy的核酸,灵敏度为普通PCR的104倍;溶解曲线只有特异峰,溶解温度为82.9℃。没有明显的引物二聚体和非特异峰出现。不同标准点批间变异系数范围为5.8%￣14.3%(n=6)。与对照组比较,TSHR大分子免疫的BALB/c小鼠甲状腺组织TSHRmRNA水平显著升高(P<0.05)。结论:外标准法SYBRGREENI实时定量RT-PCR具有灵敏度高,特异性强,重复性好的特点,比普通PCR更精确地检测出小鼠甲状腺组织TSHRmRNA的水平。
- 朱云娟黄丽娟陈宁沈炳玲陆凤先
- 关键词：TSHRMRNASYBR
- TSHR大分子及其活性多肽在BALB/c小鼠体内的免疫原特性研究被引量：2
- 2006年
- 目的:观察促甲状腺激素受体(TSHR)及其活性片段aa352-366在BALB/c小鼠体内的免疫原特性研究,探讨TSHR分子结构与功能的关系。方法:将血蓝蛋白(KLH)偶联的多肽TSHRaa352-366-KLH和多肽加受体混合组-TSHRaa352-366-KLH加豚鼠TSHR(gTSHR),间隔15d分两组分别注入BALB/c小鼠腹腔内,对照组注射KLH,测定各时相血清中甲状腺激素及促甲状腺激素受体抗体水平;90d后处死动物,检测小鼠甲状腺组织TSHRmRNA水平及其病理变化。结果:与各组自身0d的数据比较,多肽组小鼠血清TT3、TT4水平降低(P<0·01),TRAb升高(P<0·01);多肽加受体混合组TT3、TT4水平降低(P<0·01),TRAb(P<0·01)、TBAb(P<0·05)和TSAb(P<0·05)均升高。此外,混合组甲状腺组织TSHR mRNA水平明显高于正常组(P<0·05);多肽组小鼠甲状腺组织显示滤泡上皮细胞扁平、核缺失、皱缩及胶质浓缩等甲减的病理改变,而混合组则呈现不均一的病理变化。结论:TSHR以及活性片段hTSHRaa352-366都具有免疫原性,刺激小鼠血清TRAb、TSAb和TBAb的产生,引起甲状腺组织的病理改变。
- 朱云娟陈宁黄丽娟姚小梅沈炳玲叶静戴玉杰刘欣张丽莙李兰英陆凤先
- 关键词：肽碎片
- TSHR及活性多肽对BALB/c小鼠甲状腺的影响
- 2007年
- 目的:探讨促甲状腺激素受体(TSHR)及活性多肽对BALB/c小鼠甲状腺的影响。方法:对BALB/c小鼠腹腔注射血蓝蛋白耦联的人TSHR(hTSHRaa352～366)和从豚鼠脂肪细胞提取的TSHR(gTSHR)进行免疫,每2周免疫1次共6次,每次免疫前2d取血,检测血清T4、促甲状腺激素受体抗体(TRAb)水平。12周后处死小鼠,取甲状腺做病理组织学检查。结果:血清T4水平hTSHRaa352～366组从第6周开始下降(P<0.01),而且一直维持到12周,血清TRAb水平明显升高(P<0.01),甲状腺组织显示滤泡上皮细胞扁平、核缺失、皱缩、胶质浓缩等甲状腺功能减退病理改变;gTSHR组血清T4水平在第6周已下降,而12周时有的下降、有的则升高,无统计学意义,血清TRAb水平升高(P<0.01),甲状腺组织出现不均一的病理表现。结论:hTSHRaa352～366刺激BALB/c小鼠产生TRAb和促甲状腺激素受体抑制抗体(TBAb),抑制促甲状腺激素(TSH)与TSHR结合,降低了甲状腺激素T4水平;而gTSHR刺激BALB/c小鼠同时产生TRAb、促甲状腺激素受体刺激抗体(TSAb)和TBAb,引起甲状腺功能亢进或甲状腺功能减退。
- 沈炳玲黄丽娟朱云娟朱学良陆凤仙
- 关键词：小鼠
- TSHR胞外区中间段在BALB/c小鼠体内的免疫原性研究
- 2007年
- 目的观察促甲状腺激素受体(TSHR)胞外区中间段(TSHRm)的免疫调节作用,探讨TSHR分子结构与功能的关系。方法将血蓝蛋白与原核表达的人TSHRm融合蛋白耦联,间隔15d注入BALB/c小鼠腹腔内共5次,对照组注射生理盐水;检测动物血清T_4、促甲状腺激素受体抗体(TRAb)、促甲状腺激素受体刺激抗体(TSAb)、促甲状腺激素受体阻滞抗体(TBAb)水平及甲状腺组织病理变化。结果对照组动物T_4水平升高后下降,TRAb水平较实验前升高,TSAb、TBAb无显著变化。实验组动物T_4总体水平一直保持升高趋势;免疫30 d时血清TRAb水平显著升高(P<0.001),TSAb、TBAb水平变化表现为先升后降。甲状腺组织的病理变化为甲状腺上皮细胞增生和淋巴细胞浸润。结论人TSHRm融合蛋白可刺激小鼠产生TRAb、TSAb和TBAb,其对动物机体的影响反映了TSAb和TBAb综合作用的结果,表明TSHRm可能具有TSAb及TBAb两种抗原表位。
- 陈宁朱云娟陈慧黄丽娟方佩华陆凤先
- 关键词：促甲状腺激素受体促甲状腺激素受体抗体自身免疫性甲状腺疾病
- 格雷夫斯眼病发病机制和治疗的研究进展
- 2005年
- 黄丽娟陆凤先
- 关键词：特异性自身免疫性疾病格雷夫斯进行性发展细胞激活
- 外标准法实时定量反转录-聚合酶链反应方法的建立
- 2006年
- 目的为了检测BALB/C小鼠甲状腺促甲状腺激素受体(TSHR)表达,建立外标准法实时定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法。方法取正常BALB/C小鼠甲状腺提取甲状腺总RNA,逆转录后进行PCR,PCR产物经回收纯化后作为real-timePCR的标准品,制作标准曲线,优化反应条件使溶解曲线有特异扩增。检测豚鼠TSHR分子免疫的BALB/C小鼠甲状腺TSHRmRNA的表达。结果建立的外标准法SYBRGREENⅠ实时定量RT-PCR方法可以灵敏检测到10copies的核酸,灵敏度为普通PCR的104倍;溶解曲线只有特异峰;不同标准点批间变异系数范围为5.8%￣14.3%(n=6)。与对照组比较,TSHR大分子免疫的BALB/C小鼠甲状腺组织TSHRmRNA水平显著升高(P<0.05)。结论外标准法实时定量RT-PCR具有灵敏度高、特异性强、重复性好的特点,可精确地检测出小鼠甲状腺组织TSHRmRNA的水平。
- 朱云娟黄丽娟陈宁沈炳玲陆凤先
- 关键词：逆转录聚合酶链反应受体促甲状腺激素
- 促甲状腺激素受体多肽片段aa352-366的特性被引量：3
- 2005年
- 目的观察促甲状腺激素受体(TSHR)活性片段aa352-366的免疫调节作用,探讨TSHR分子结构与功能的关系。方法将血蓝蛋白(KLH)偶联的多肽KLH-TSHRaa352-366和多肽加受体的混合物KLH-TSHRaa352-366+gTSHR,间隔15d分两组分别注入BALB/c小鼠腹腔内,对照组注射生理盐水,测定各时相血清中总三碘甲状腺氨酸(TT3)、总甲状腺素(TT4)、促甲状腺激素受体抗体(TRAb)、促甲状腺激素受体刺激抗体(TSAb)、促甲状腺激素受体抑制抗体(TBAb)水平;第90天后处死动物,检测小鼠甲状腺组织TSHRmRNA水平及其病理变化。结果与各组自身0d的数据比较,多肽组小鼠血清TT3、TT4水平降低,TRAb升高;多肽加受体组TT3、TT4水平降低,TRAb和TBAb升高,而TSAb降低。此外,多肽加受体组甲状腺组织TSHRmRNA水平较正常组增高;多肽组小鼠甲状腺组织显示滤泡上皮细胞扁平、核缺失、皱缩及胶质浓缩等甲状腺功能减低的病理改变。结论hTSHRaa352-366刺激小鼠血清TRAb和TBAb的产生,阻断TSH与TSHR的结合,抑制三碘甲状腺氨酸(T3)、甲状腺素(T4)的分泌,引起甲状腺组织的病理改变,可能是TBAb在TSHR大分子上的抗原决定簇。
- 陈宁朱云娟黄丽娟叶静姚小梅沈炳玲戴玉杰刘欣陆凤先
- 关键词：促甲状腺激素受体TSHR血蓝蛋白KLH
