冯朝晖
- 作品数：8 被引量：26H指数：3
- 供职机构：浙江医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 甲基硝基亚硝基胍诱发的遗传不稳定细胞DNA聚合酶βmRNA表达水平研究被引量：7
- 1999年
- 目的和方法：本实验室曾报道，低浓度０－２ μｍｏｌＬ 烷化剂甲基硝基亚硝基胍（ Ｎ－ ｍｅｔｈｙｌ－ Ｎ′－ ｎｉｔｒｏ － Ｎ－ｎｉｔｒｏｓｏｇｕａｎｉｄｉｎｅ ， ＭＮＮＧ） 可以诱导哺乳类细胞遗传不稳定状态。为明确其发生机制，本文利用定量ＲＴ－ ＰＣＲ 方法，研究了该低浓度ＭＮＮＧ 对人ＨｅＬａ 及猴肾ｖｅｒｏ 细胞ＤＮＡ 聚合酶β（ｐｏｌ β） ｍ ＲＮＡ 表达水平的影响。结果：经０－２ μｍｏｌＬ ＭＮＮＧ２ ．５ ｈ 处理后，ＨｅＬａ 细胞ｐｏｌ βｍ ＲＮＡ 水平在６ ～２４ ｈ 内升高约１ 倍；而ｖｅｒｏ 细胞ｐｏｌ βｍ ＲＮＡ 水平在１２ ～３０ ｈ 内亦升高１倍左右。结论：提示ｐｏｌ βｍＲＮＡ 水平改变可能参与ＭＮＮＧ
- 冯朝晖余应年陈星若
- 关键词：DNA聚合酶ΒMNNG细胞遗传
- 甲基硝基亚硝胍诱发的遗传不稳定Vero细胞中错配结合蛋白的研究被引量：2
- 1997年
- 应用凝胶阻滞技术（gelretaldation），在甲基硝基亚硝胍（MNNG）诱发的遗传不稳定的Vero细胞（非洲绿猴肾细胞）抽提物中，发现存在特异性针对G·T的错配结合蛋白（mismatchbindingprotein），能选择性识别DNA中的G·T错配，并与之结合.经与正常Vero细胞相比较，证实其功能并无缺陷。从而排除了MNNG通过对错配结合蛋白功能的损伤而诱发细胞遗传不稳定的可能机制。
- 冯朝晖余应年张小山陈星若
- 关键词：MNNG细胞遗传错配修复
- 甲基硝基亚硝基胍诱发的遗传不稳定vero细胞DNA体外复制的保真度被引量：11
- 1998年
- 利用在猴肾ｖｅｒｏ细胞抽提物中建立的ＤＮＡ体外复制系统，对穿梭质粒ｐＺ１８９ＤＮＡ进行有效的复制后，将复制产物转化至Ｅ．ｃｏｌｉＭＢＭ７０７０，观察ｐＺ１８９质粒ＤＮＡ中突变靶基因ｓｕｐＦｔＲＮＡ基因突变的情况．在烷化剂甲基硝基亚硝基胍（Ｎ－ｍｅｔｈｙｌ－Ｎ′－ｎｉｔｒｏ－Ｎ－ｎｉｔｒｏｓｏｇｕａｎｉｄｉｎｅ）诱发的遗传不稳定（ｇｅｎｅｔｉｃｉｎｓｔａｂｉｌｉｔｙ）ｖｅｒｏ细胞胞浆抽提物中进行ｐＺ１８９质粒ＤＮＡ复制，发现经过体外复制的ｐＺ１８９质粒中ｓｕｐＦｔＲＮＡ基因突变率高出对照组５－８倍（Ｐ＜０．０５）。
- 冯朝晖余应年陈星若
- 关键词：MNNG甲基硝基亚硝基胍VERO细胞DNA复制
- pZ189质粒DNA体外复制系统的建立被引量：2
- 1998年
- 报道了含ＳＶ４０复制起点的质粒ＤＮＡ在真核细胞抽提物中进行复制的ＤＮＡ体外复制系统的建立．在外源性蛋白质ＳＶ４０大Ｔ抗原（ＳＶ４０Ｔａｇ）的参与下，穿梭质粒ｐＺ１８９能在猴肾ｖｅｒｏ细胞胞浆抽提物中，利用其中参与体内ＤＮＡ复制所需的蛋白质成分，有效地进行体外ＤＮＡ复制．从而为研究真核细胞ＤＮＡ复制系统的结构与功能提供了简单、有效的模型．
- 冯朝晖余应年陈星若
- 关键词：穿梭质粒真核细胞DNA
- MNNG诱发的遗传不稳定vero细胞中错配修复功能的研究被引量：3
- 1998年
- 在MNNG诱发的延迟发生的,以非定标性突变形成为特征的遗传不稳定vero细胞抽提物中,应用凝胶阻滞和体外错配修复技术,发现仍存在特异性针对G·T的错配结合蛋白,能选择性识别并结合DNA中的G·T错配;同时发现在该细胞核抽提物中G·T错配能被有效、特异地修复成G·C。经与正常vero细胞比较,证实二者功能均无缺陷。从而排除了MNNG通过对错配结合蛋白及G·T错配修复功能的损伤而诱发细胞遗传不稳定的可能机制。
- 冯朝晖余应年陈星若
- 关键词：MNNG诱发VERO细胞
- 错配修复研究新进展被引量：1
- 1997年
- 错配修复是细胞复制后的一种修复机制,对维持细胞遗传稳定起重要作用。近年来,对错配修复的研究进展飞速。目前,已在人类细胞中发现若干与细菌、真菌错配修复基因高度同源的人类错配修复基因,并在许多肿瘤中证实有错配修复功能的缺陷。本文主要介绍近年来错配修复研究的一些新进展。
- 冯朝晖
- 关键词：基因肿瘤
- 真核细胞DNA聚合酶被引量：1
- 1998年
- 近年来,其核细胞DNA体外复制模型的建立及蛋白纯化技术的提高,DNA聚合酶基因的克隆,真核细胞DNA聚合酶研究取得了很大进展。迄今为止,已发现α、β、γ、δ、ε、ζ等6类真核细胞DNA聚合酶,分别在DNA复制和修复等事件中起到重要作用。
- 冯朝晖
- 关键词：真核细胞DNA聚合酶DNA
- 低浓度N-甲基-N′-硝基-N-亚硝基胍对HeLa细胞DNA聚合酶及拓扑异构酶Ⅱ α mRNA表达水平的影响被引量：9
- 1999年
- 利用定量逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法，研究了低浓度甲基硝基亚硝基胍（ＭＮＮＧ）对ＨｅＬａ细胞ＤＮＡ聚合酶（Ｐｏｌα，β，δ，ε）及拓扑异构酶Ⅱα（ＴｏｐⅡα）ｍＲＮＡ表达水平的影响．发现经０．２μｍｏｌ·Ｌ－１ＭＮＮＧ处理２．５ｈ后，ＨｅＬａ细胞ＰｏｌβｍＲＮＡ水平在６－２４ｈ内升高约１倍，而Ｐｏｌα，δ，ε及ＴｏｐＩαｍＲＮＡ水平则无明显改变．提示ＰｏｌβｍＲＮＡ水平改变可能参与ＭＮＮＧ诱发细胞遗传不稳定的发生．
- 冯朝晖余应年陈星若
- 关键词：亚硝基胍MNNG聚合酶
