周娟
- 作品数：4 被引量：1H指数：1
- 供职机构：复旦大学生命科学学院遗传学研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 酵母双杂交系统在膜蛋白相互作用研究中的应用被引量：1
- 2010年
- 膜相关蛋白约占细胞总蛋白质中的1/3，它们大都参与了细胞的诸多生理、病理过程和药物反应机理。研究膜蛋白的相互作用对于揭示细胞的生命活动规律及寻找药物作用靶标都有重要的意义。由于膜蛋白本身的特性及其难以进入核内等原因，经典的酵母双杂交技术并不适用于检测膜蛋白间的相互作用。针对在活细胞中研究膜蛋白相互作用的需要，近年来国际上先后发展了一系列用于膜蛋白相互作用研究的酵母双杂交新系统，并取得了许多重要发现。
- 李红梅周娟霍克克
- 关键词：酵母双杂交蛋白质相互作用
- CRK是PTPN4新的相互作用蛋白
- 2008年
- 以PTPN4为“诱饵”，利用酵母双杂交系统筛选人肝cDNA文库，获得了一个与PTPN4相互作用的蛋白：CRKⅠ．从cDNA文库中通过PCR得到CRK家族的3个成员的基因，把这3个基因与PTPN4共转酵母，发现CRKⅠ、CRKⅡ和CRKL均能与PTPN4发生很强的相互作用．通过截断体证实它们之间的相互作用是通过CRKs的SH3结构域与PTPN4的462-468位的脯氨酸富集区介导的．免疫共沉淀以及免疫荧光共定位实验进一步证实了CRKI与PTPN4的相互作用．通过酪氨酸磷酸化特异性抗体检测发现PTPN4可以明显降低CRKI的磷酸化水平．
- 周娟万兵兵单敬轩吴冬华施慧莉霍克克
- 关键词：CRK酵母双杂交免疫荧光定位酪氨酸磷酸化
- 人类ARRB1和GNMT蛋白相互作用的初步研究
- 2010年
- GNMT(甘氨酸-N-甲基转移酶,glycine N-methyltransferase)是人体内一个多功能蛋白.最近研究发现GNMT是一个潜在的抑癌基因,但GNMT抑癌的机理却不清楚.研究以GNMT为"诱饵",利用酵母双杂交系统筛选人肝cDNA文库,获得了GNMT的一个相互作用蛋白ARRB1(-βarrestin1),并通过GST Pull-down、免疫共沉淀的方法在体内体外验证了相互作用的特异性.进一步研究发现GNMT和ARRB1的相互作用不依赖于GNMT的四聚体高级结构和甲基转移酶活性.免疫荧光共定位实验发现,当ARRB1与GNMT共转染HeLa细胞后,ARRB1蛋白的亚细胞定位发生改变,表现出与GNMT蛋白共定位,有入核的趋势.这为研究GNMT的抑癌作用机理提供了新的线索.
- 叶侃石彦伍慧玲周娟施慧莉霍克克
- 关键词：酵母双杂交免疫荧光定位
- 人类HDAC4和MIF4GD蛋白相互作用的初步研究
- 2008年
- 以HDAC4为"诱饵",利用酵母双杂交系统筛选人肝cDNA文库得到"猎物"蛋白,通过GST Pull-down,Co-IP,荧光共定位等技术验证HDAC4和"猎物"的特异性结合,并通过成人多组织cDNA Panel确定"猎物"的组织表达谱.通过体内、外蛋白结合实验证实了HDAC4与MIF4GD(MIF4G domain containing)蛋白特异性互作,且两者亚细胞共定位于细胞质内,并确定了MIF4GD在胎盘、肝脏和胰腺中有特异性表达.本实验发现并验证了HDAC4与MIF4GD的特异性互作,并确定了MIF4GD的特异性表达谱,为深入研究两种蛋白的功能及其所参与的生理过程提供了新的线索.
- 吴冬华周娟单敬轩施慧莉霍克克
- 关键词：酵母双杂交蛋白质相互作用
