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一种诱导胚胎干细胞分化为胰岛样细胞的方法: 本发明涉及一种诱导胚胎干细胞分化为胰岛样细胞的方法，属于细胞生物学领域。本发明采用5种优化培养基诱导胚胎干细胞定向分化为能分泌胰岛素的细胞，诱导分化一定时间后可得到能分泌胰岛素的胰岛样细胞。本发明所述方法具有能够显著提高...; 王常勇张妍郭希民段翠密王秀丽; 文献传递

硒促进小鼠胚胎干细胞分化为胰岛细胞的实验研究被引量：5: 2004年; 目的 :探讨硒在体外诱导小鼠胚胎干细胞向胰岛细胞分化中的促进作用。方法 :将ES D3小鼠胚胎干细胞悬浮培养 7d形成拟胚体 ,然后进行贴壁培养 ,加入分化培养液 1诱导 6d ,然后用分化培养液 2诱导 6d ,最后用含不同浓度的亚硒酸钠的培养基诱导 2 0d。对诱导后获得的胰岛素产生细胞团 (IPCC)细胞进行双硫腙染色 ,对染色结果进行体视学分析。进行胰岛素刺激释放试验 ,用ELISA法测定胰岛素释放量。RT PCR法检测胰腺细胞相关基因的表达。结果 :亚硒酸钠浓度在 0 .0 3～ 810 μmol/L之间时 ,经过系列诱导后获得的IPCC其DTZ阳性率随着亚硒酸钠浓度的提高而显著升高。当亚硒酸钠浓度为 2 70 μmol/L时DTZ阳性率上升至最高点 ,随后开始缓慢下降 ;胰岛素分泌释放试验也证实 2 70 μmol/L亚硒酸钠诱导的细胞释放的胰岛素最多。RT PCR结果进一步表明诱导获得的IPCC具有类胰岛组织的功能。结论; 张妍郭希民王常勇段翠密张立岭; 关键词：胚胎干细胞胰岛细胞硒分化

5-Fu对NKG2D配体MICA/B蛋白表达的调节作用: 综合治疗是恶性肿瘤的重要治疗原则，除传统的化疗、放疗及手术等治疗方法外，免疫治疗的地位日益增强。自20世纪80年代末，Rosenberg等发现淋巴因子激活的自体杀伤细胞(lymp hokine activated kil...; 张妍; 关键词：5-氟尿嘧啶蛋白表达 NKG2D配体抗肿瘤药; 文献传递

5-氟尿嘧啶增强HeLa细胞对自然杀伤细胞敏感性研究: 2009年; 目的用5-氟尿嘧啶（5-fluorouracil，5-FU）处理HeLa细胞，检测其NKG2D配体MICA的表达及其对NK92细胞杀伤敏感性的变化。方法不同浓度的5-Fu处理HeLa细胞，在不同时间点用半定量PCR及流式细胞术检测HeLa细胞表面的NKG2D配体MICA在RNA及蛋白水平的表达变化情况，用MTT法检测NKG2D抗体封闭NK92细胞的NKG2D受体前后，NK92细胞对HeLa细胞的杀伤作用。结果不同浓度的5．Fu作用于HeLa细胞后，半定量RT—PCR结果显示MICA表达随5-Fu作用浓度增加逐渐增高。而且40μg／ml5．Fu作用于HeLa细胞后随着作用时间的延长（0、8、16、24h）MICA表达增加，流式细胞术检测结果表明，MICA表达的增加主要依赖于未凋亡细胞的MICA表达。在40μg／ml5-FU作用24h，效靶比为2．5：1，5：1，10：1，20：1时都检测到NK92细胞对HeLa细胞的杀伤增强，杀伤作用可部分被NKG2D抗体抑制。结论5-FU能够上调HeLa细胞表面NKG2D配体MICA的表达，增强HeLa细胞对NK92细胞的敏感性，提示化疗联合NK细胞免疫治疗宫颈癌可产生协同作用，提高治疗效果。; 张妍魏广智赵敬湘罗丹王字玲; 关键词：5-氟尿嘧啶 NKG2D配体 HELA细胞

不同化疗药物对人MICA启动子活性的调节作用: 2005年Gasser等在Nature上发表文章报道:DNA损伤可诱导NKG2D配体的上调,提示天然免疫系统在基因组稳定性调节进程中发挥重要作用。而化疗和放疗等可引起DNA损伤,DNA损伤引起的应激反应分子的的组成性活化...; 罗丹赵敬湘魏广智张妍王字玲; 文献传递

5-Fu对A549细胞NKG2D配体MICA/B启动子活性的作用: 2009年; 目的:克隆A549细胞NKG2D配体MICA/B的启动子,分析其活性,并研究5-Fu对MICA/B启动子活性的调节作用。方法:PCR方法扩增人MICA/B的启动子及其5个截短体基因,用双荧光报告基因系统进行启动子活性分析,并测定不同浓度5-Fu处理对启动子活性的影响。结果与结论:克隆了人MICA启动子(-455/+4)、MICB启动子(-470/+40)及其5个截短体基因,MICA的相对活性分别为:3.61,2.26,1.63,0.313,0.711,0.663;MICB的相对活性分别为:17.49,10.11,7.398,0.822,0.997,0.49。用20,40,80,160,320μg/ml的5-Fu处理A549细胞8h后,MICA启动子活性分别是未处理的1.69,1.48,1.62,1.55,1.78倍,MICB启动子活性分别是未处理的1.44,1.87,1.38,1.19,1.25倍。表明不同浓度5-Fu处理A549细胞后MICA/B启动子相对活性上升。; 罗丹赵敬湘魏广智张妍王字玲; 关键词：启动子活性 5-FU

人MICA启动子的克隆与活性鉴定: 人MICA(MHC class I-related molecule A)为NK细胞表面活化性受体NKG2D的配体,不表达于正常组织细胞或仅低表达于肠上皮细胞,在肿瘤细胞株和上皮来源的原发性肿瘤如肺癌、乳腺癌、肝癌、前列...; 罗丹赵敬湘魏广智张妍王字玲; 文献传递

NK细胞NKG2D配体MICA/B、ULBP1-4的克隆表达和多克隆抗体的制备: 研究背景:NKG2D为NK细胞活化性受体,是近几年研究者较为关注的也是研究较深入的一个受体,可表达于多种免疫细胞上,参与适应性及固有性免疫应答,调节NK、T细胞、巨噬细胞、树突状细胞的功能。人类的NKG2D配体为MICA...; 赵敬湘魏广智罗丹张妍王字玲; 文献传递

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张妍