朱明月
- 作品数：51 被引量：160H指数：6
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- 发文基金：海南省自然科学基金国家自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 甲胎蛋白是肝癌细胞耐受全反式维甲酸诱导凋亡的新靶分子
- ＜正＞目的:研究甲胎蛋白（Alpha-fetoprotein,AFP）对肝癌细胞内PTEN/AKT信息通路信号传递的影响。方法:用Western Blotting法分析全反式维甲酸（All trans retinoic ...
- 朱明月李孟森谢协驹李刚
- 关键词：甲胎蛋白PI3K/AKT信号通路
- 文献传递
- 抑制PI3K信号通路促进TRAIL诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡
- 2014年
- 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)对癌细胞有独特的细胞毒性作用,而对正常细胞没有影响.但乳腺癌细胞耐受TRAIL诱导凋亡.本研究探索磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)信号通路对人乳腺癌MCF-7细胞耐受TRAIL的影响.采用MTT法、显微照相以及DAPI染色观察TRAIL对MCF-7细胞生长的抑制作用以及诱导细胞凋亡状况;流式细胞分析细胞凋亡的情况;激光共聚焦显微镜观察多聚ADP核糖多聚酶-1(poly(ADP-ribose)polymerase-1,PARP-1)的迁移和定位;Western印迹分析死亡受体、caspase-3/8、磷酸化的AKT[pAKT(Ser473)]、Src和PARP-1等蛋白质表达.结果显示,小剂量TRAIL(<80 nmol/L)和Ly294002(<40μmol/L)对MCF-7细胞生长没有显著的抑制作用,但是大剂量TRAIL(160 nmol/L)和Ly294002(80μmol/L)则能抑制MCF-7细胞生长;低剂量Ly294002协同TRAIL抑制MCF-7细胞生长,并诱导细胞凋亡;Ly294002和TRAIL共同作用能促进PARP-1从胞浆进入细胞核;蛋白质表达分析显示,MCF-7细胞均表达死亡受体DR4、DR5、诱骗受体DcR1和DcR2、以及caspase-8,但是不表达caspase-3;Ly294002和TRAIL共同作用也能抑制pAKT(Ser473)和Src的表达,并且导致PARP-1断裂.本研究结果提示,抑制PI3K信号可增加MCF-7细胞对TRAIL诱导的敏感性;MCF-7细胞通过PI3K/AKT途径促进Src的表达耐受TRAIL的细胞毒性作用;Ly294002联合TRAIL是一种新的药物组合方式治疗乳腺癌.
- 朱明月李伟夏华鲁琰董栩陈栘郭峻莉符史干谢协驹李孟森
- 关键词：乳腺癌细胞凋亡PI3K信号通路
- 甲胎蛋白抑制PTEN活性导致肝癌细胞耐受ATRA诱导的凋亡被引量：9
- 2011年
- 研究甲胎蛋白(α-fetoprotein,AFP)对肝癌细胞内PTEN/AKT信息通路信号传递的影响.用Western blotting法分析全反式维甲酸(all trans retinoic acid,ATRA)处理人肝癌Bel 7402和HepG2细胞24 h后PTEN表达的变化.免疫共沉淀(Co-IP)技术研究AFP与PTEN相互作用.激光共聚焦显微镜观察AFP与PTEN在细胞共定位.RNA干扰(RNAi)技术抑制AFP表达,再用ATRA处理24 h后检测细胞内PTEN表达的变化,并分析蛋白激酶B(AKT)的磷酸化.用pcDNA3.1质粒和人afp基因连接构建表达AFP的载体(称为pcDNA3.1-afp),然后转染到不表达AFP的人肝癌HLE细胞.结果显示,人肝癌Bel 7402和HepG2细胞均有PTEN的表达,ATRA(160μmol/L)处理24 h后能促进这些细胞的PTEN表达.Co-IP技术研究发现AFP能与PTEN结合.共聚焦显微镜观察显示AFP与PTEN共定位于细胞浆.干扰AFP表达后,PTEN表达明显提高.抑制AFP表达后,ATRA能显著促进Bel 7402细胞内PTEN的表达,并能抑制AKT的磷酸化.转染pcDNA3.1-afp载体后,HLE细胞内有AFP表达,并与PTEN结合,且发现pcDNA3.1-afp载体能增加AKT的磷酸化[p-AKT(Ser473)],对抗ATRA抑制HLE细胞增殖.研究的结论是:肝癌细胞内表达的AFP能与PTEN结合并抑制PTEN对AKT的去磷酸化作用,肝癌细胞内高表达的AFP能激活AKT信息通路.胞浆内的AFP是肝癌细胞耐受ATRA的重要因子.
- 朱明月符史干李孟森谢协驹李刚
- 关键词：PTENPI3K/AKT信号通路
- 一种获得人类甲胎蛋白的方法
- 本发明公开了一种获得人类甲胎蛋白的方法，是把人类甲胎蛋白基因克隆到昆虫细胞的表达载体pFastBac 1、pFastBac Dual或pFastBac1?Gus中，并转化DH10Bac后，获得含有人类甲胎蛋白基因的Bac...
- 林波刘坤朱明月李伟董栩李孟森
- 文献传递
- α-芋螺毒素GIC与Ac-AChBP共结晶条件的筛选与优化被引量：1
- 2017年
- 旨在筛选及优化α-芋螺毒素与乙酰胆碱结合蛋白(ACh BPs)共结晶的条件,得到高分辨率的共结晶晶体。在昆虫表达系统中分泌表达海兔乙酰胆碱结合蛋白(Ac-ACh BP),并用凝胶色谱进行纯化,把纯化的乙酰胆碱结合蛋白与α-芋螺毒素GIC共结晶,利用结晶机器人及HAMPTON RESEARCH结晶试剂盒进行结晶及结晶条件的筛选与优化。结果显示,在0.6 mol/L Ammonium citrate dibasic,0.1 mol/L Sodium acetate trihydrate p H4.8的条件下生长的晶体较好,其分辨率可以达到2.1?。筛选与优化结晶条件(Ammonium citrate dibasic的摩尔浓度及0.1 mol/L Sodium acetate trihydrate的p H值)可以得到高分辨率的α-芋螺毒素GIC与Ac-ACh BP共结晶晶体。
- 林波刘坤朱明月李伟董栩李孟森
- 一种高效表达AFP3-CASP3融合蛋白的方法
- 本发明公开了一种高效表达AFP3‑CASP3融合蛋白的方法，属于生物技术领域，本发明把HBx基因克隆到慢病毒中，用慢病毒‑HBx感染人肝癌细胞，肝癌细胞内表达HBx蛋白后，把含有AFP第3个结构域和CASP3基因的表达载...
- 刘坤林波朱明月李伟董栩李孟森
- GSTPl基因启动子甲基化与前列腺癌的相关性研究被引量：5
- 2017年
- 背景与目的:谷胱甘S-转移酶P1(glutathione S-transferase P1,GSTP1)保护细胞避免DNA损伤和癌细胞形成,抑制GSTP1活性可以导致DNA损伤的敏感性增强和癌变发生的概率增加。该研究旨在研究前列腺癌组织中GSTPl基因甲基化与前列腺癌临床病理特征的关系。方法:收集2015年4月—2016年12月在海南省中医院和海口市人民医院住院的46例前列腺癌患者的前列腺癌组织及对应的包埋癌旁组织,应用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)检测GSTPl m RNA水平,通过甲基化特异性聚合酶链反应(methylation-specific polymerase chain reaction,MSP)检测GSTP1基因启动子区域Cp G岛的甲基化表达水平,然后与性别、年龄及肿瘤TNM分期等临床数据进行关联分析。结果:与癌旁组织比较,前列腺癌组织中GSTP1 m RNA表达水平降低(P<0.01),并且GSTP1 m RNA降低与GSTPl基因甲基化呈负相关(P<0.05);前列腺癌和癌旁组织中甲基化阳性率分别为66.0%和23.5%,差异有统计学意义(P<0.05);GSTP1基因的启动子甲基化频率与肿瘤分期显著相关(r=073,P<0.05),而与其他临床特征无明显相关性(P>0.05)。结论:GSTP1基因启动子甲基化可能造成GSTP1基因低表达,与前列腺癌发病明显相关,有望成为检测及诊断前列腺癌的新方法。
- 邢红宇朱明月李伟林波
- 关键词：前列腺癌甲基化
- 抑制PI3K信号促进TRAIL诱导人乳腺癌细胞MCF-7凋亡
- 目的:研究磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)信号途径对人乳腺癌细胞MCF-7耐受肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor relat...
- 朱明月李伟夏华鲁琰董栩陈栘郭峻莉符史干谢协驹李孟森
- 关键词：乳腺癌细胞
- 文献传递
- 肝病患者血清肿瘤标记物含量及肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体表达在癌变中的临床意义被引量：2
- 2011年
- 目的探讨血浆透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型胶原(ⅢC)、Ⅳ型胶原(ⅣC)、甲胎蛋白(AFP)和肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)受体-2(DR5)、诱捕受体-1(DcR1)的表达与肝纤维化及肝癌变的关系。方法用ELISA方法测定正常对照组(A组)、肝炎组(B组)及肝硬化并发肝癌组(C组)的HA、ⅢC、ⅣC及LN和AFP的含量,用WesternBlotting检测肝癌手术的癌组织、癌旁组织AFP、DR5和DcR1的表达。结果 HA、LN、ⅢC、ⅣC和AFP的血清含量由高到低:C组>B组>A组;(1)ⅢC、ⅣC、LN的相关性:A、B、C组ⅢC、ⅣC、LN表达呈正相关,r分别为0.623、0.651、0.714(P均<0.05)。(2)C组的各个观察指标均高于B组和A组,特别是血清AFP和HA含量,在A组和B组之间尽管也有统计学的意义(P<0.05),但是C和A、B组比较,这两者的含量显著性升高(P<0.001)。(3)WesternBlotting分析显示,癌旁组织的AFP和DcR1表达明显低于癌组织(P均<0.05);而DR5在癌旁组织表达则明显高于癌组织(P均<0.05)。结论由肝炎到肝硬化、肝癌的过程中HA的累聚以及LN、ⅢC、ⅣC和AFP的表达是一个渐进的基因激活过程;AFP、DR5和DcR1在肝癌组织的表达变化预示癌细胞耐受凋亡诱导。
- 林尤仕朱明月谢协驹李孟森
- 关键词：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体
- 大鼠青光眼应激模型中视网膜神经节细胞PTEN基因表观遗传修饰及表达的影响被引量：2
- 2019年
- 目的探讨大鼠青光眼应激模型中视网膜神经节细胞PTEN基因表观遗传修饰及表达的影响。方法 (1)大鼠青光眼模型及处理。选择清洁级雌性Wistar大鼠30只,采用完全随机设计方法分为正常对照组10只、模型组10只、模型+药物干预组(甲钴胺处理)10只。除正常对照组外,其余大鼠均建立大鼠青光眼应激模型,建模完成后模型组不采取任何措施处理,正常对照组不参与建模,模型+药物干预组建模成功后采用甲钴胺进行处理,两组均干预11周。3组大鼠处死后,摘取眼球,完成视神经节细胞(RGCs)分离,用DAPI和PITC染色,荧光镜观察凋亡小体和caspase-3和PTEN细胞定位;采用免疫组织化学观察PTEN的表达。采用Western blot分析RGCs的PTEN和AKT(Ser473)表达量。(2)大鼠青光眼模型RGCs的PTEN基因表观遗传修饰的改变。造模后的1、3、5、7、9、11周处死大鼠,摘取眼球,完成RGCs分离,并将组织分为两份,一份用于测定PTEN的表达;另外一份于检测RGCs的PTEN基因启动子组蛋白(H3K9或H4K8)的乙酰化状态。结果模型+药物干预组处理后1、3、5、7、9、11周RGCs凋亡率低于模型组(P<0.05);模型+药物干预组与正常对照组PTEN阳性率差异无统计学意义(P>0.05),低于模型组(P<0.05);Western blot结果表明:模型+药物干预组PTEN表达量低于模型组和正常对照组(P<0.05);模型+药物干预组AKT(Ser473)表达量高于正常对照组(P<0.05),低于模型组(P<0.05);模型组+药物干预组PTEN基因启动子组蛋白阳性率与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),均高于模型组(P<0.05)。结论大鼠青光眼应激模型中视网膜神经节细胞PTEN基因表观遗传修饰及表达能产生明显的影响,能通过改变AKT(Ser473)表达量抑制疾病发展。
- 杨静史贻玉沈沛阳陈海波朱明月李伟
- 关键词：视网膜神经节细胞遗传修饰
