李林
- 作品数：3 被引量：19H指数：2
- 供职机构：天津医科大学总医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
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- Warburg效应及其对肿瘤转移的影响被引量：16
- 2015年
- 肿瘤细胞葡萄糖代谢的一个特点就是在氧含量正常的情况下依然选择利用糖酵解,即Warburg效应。Warburg效应的内在机制十分复杂,可能与癌基因激活、抑癌基因失活,糖代谢酶表达异常和肿瘤微环境改变等有关,具体的机制还有待进一步研究。Warburg效应这种代谢重编程与肿瘤的发生发展有着密切联系,为肿瘤细胞提供生长优势,帮助其逃避凋亡,同时为肿瘤的转移创造合适的环境,促进肿瘤转移。本文概述了Warburg效应的发生机制及其对肿瘤转移的作用。
- 魏慧君郭丽丽李林周清华吴志浩
- 关键词：肿瘤转移
- 转录因子Snail与肿瘤的上皮细胞间质化
- 2011年
- 肿瘤对人体的危害极大,其引起的死亡大多是因为肿瘤转移。肿瘤的转移是一个十分复杂的过程,它是多种基因参与的结果,不仅仅是遗传性状的改变,还包括细胞与细胞之间、细胞与细胞外基质之间的相互作用。一些在胚胎发育中起着重要作用的基因常常在癌组织中重新激活,提示其可能有促进肿瘤发生和/或转移的作用。肿瘤的浸润和转移是通过细胞粘附分子的改变而实现的。
- 李林吴志浩周清华
- 关键词：细胞间质转录因子细胞粘附分子上皮细胞外基质遗传性状
- 具有不同酶活性并可抵抗特异shRNA降解的nm23-H1真核表达载体的构建和表达被引量：3
- 2014年
- 背景与目的已有的研究证明nm23-H1基因是一个重要的肿瘤转移抑制基因,但其抑制肿瘤转移的生化机理尚不完全清楚。Nm23-H1基因结构和功能异常与肿瘤的侵袭转移有密切关系。我们前期已构建了nm23-H1的短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)载体以及可抵抗此shRNA降解的nm23-H1的cDNA的表达载体,在此基础上我们欲应用基因定点突变技术构建具有不同酶活性并能抵抗此shRNA降解的nm23-H1cDNA真核表达载体,并通过恢复实验验证其表达,为进一步研究肿瘤抑制基因nm23-H1的分子机制提供理论基础和实验依据。方法以pcDNA3.1(+)-shRNA-resistant-nm23-H1质粒为突变模板,应用重叠延伸PCR方法引入nm23-H1基因四个单点突变和一个联合位点突变,并将突变基因片段克隆到真核表达载体pcDNA3.1Hygro(+)。将突变质粒转染人肺腺癌细胞株A549/nm23-H1-shRNA(稳定沉默nm23-H1基因),利用Western blot技术验证不同突变体nm23-H1蛋白的表达。结果成功构建了shRNA抵抗的nm23-H1S44A、nm23-H1P96S、nm23-H1H118F、nm23-H1S120G、nm23-H1P96S-S120G五个突变型真核表达载体,经DNA序列分析突变的碱基序列与实验设计完全一致,经Western blot验证nm23-H1蛋白表达正常。结论成功构建了五个具有不同突变位点的shRNA抵抗的nm23-H1基因真核表达载体,并且突变蛋白质nm23-H1表达正常,同时也表明重叠延伸PCR技术是一种高效、便捷、经济的DNA定点突变方法。
- 鲁战胜郭丽丽李林吴志浩周清华
- 关键词：NM23-H1重叠延伸PCR定点突变BLOT
