杜晓棠
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 供职机构：南京医科大学基础医学院病原生物学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 重组副肌球蛋白联合ISA206佐剂诱导抗日本血吸虫保护力
- 2009年
- 目的探讨重组的全长日本血吸虫副肌球蛋白(rSj97)的免疫保护作用以及作为疫苗的适用佐剂组合。方法重组副肌球蛋白分别与弗氏佐剂(rSj97-FA)、ISA206(rSj97-ISA206)、CpGODN(rSj97-CpGODN-IFA)联合免疫C57BL/6小鼠,在0、2、4周共进行3次免疫注射,剂量为每只每次25μgrSj97。第3次免疫后2周,经腹部贴片感染日本血吸虫尾蚴(40±2)条。第12周剖杀冲虫,计算减虫率与减卵率。同时,在0、2、6、8、12周对各组小鼠采血,检测血清中特异性IgG1与IgG2a抗体。结果相对于未免疫组,rSj97-FA组的减虫率为27.6%、减卵率为-2.3%,rSj97-ISA206组的减虫率为45.3%(P<0.01)、减卵率为35.4%(P<0.05),rSj97-CpGODN-IFA组的减虫率为7.3%、减卵率为6.4%,对照组(仅注射CpGODN)减虫率为13%、减卵率为3%。rSj97-FA、rSj97-ISA206与rSj97-CpGODN-IFA组在首次免疫后2周,rSj97特异性IgG1与IgG2a水平较免疫前显著升高(P<0.01),攻击感染后仍维持在同一水平;对照组与未免疫对照组,其特异性IgG1水平至感染后6周方显著升高(P<0.01),但仍为较低水平(A值<0.1),而IgG2a一直保持在基线水平,无显著变化。结论重组副肌球蛋白分别与3种佐剂联合使用均能诱导小鼠产生特异性IgG1和IgG2a,但仅ISA206佐剂组诱导C57BL/6小鼠产生显著的抗日本血吸虫保护力,rSj97-ISA206是潜在用于大动物免疫的疫苗组合。
- 孟睿杜晓棠储凯侯敏王荣芝王勇张美娟田芳张媛媛徐进梅季旻珺吴海玮
- 关键词：日本血吸虫佐剂小鼠保护力
- IL-10在感染日本血吸虫p47 GTP酶缺失小鼠中的免疫调节作用被引量：2
- 2010年
- 目的在日本血吸虫早期感染模型和SEA致敏模型中,研究IGTP和IRG-47缺失小鼠在抵抗日本血吸虫感染过程中IL-10的免疫调节作用。方法以IGTP基因敲除(IGTP-/-)小鼠、IRG-47基因敲除(IRG-47-/-)小鼠和野生型(WT)小鼠为研究对象,建立日本血吸虫早期感染模型和可溶性虫卵抗原(SEA)致敏模型。在早期感染模型中,以HE染色观察耳廓的病理变化,间接ELISA法检测耳廓皮片培养上清中Th1/Th2型细胞因子的表达水平;在SEA致敏模型中,以间接ELISA法检测血清中日本血吸虫特异性IgG抗体、脾单个核细胞培养上清中Th1/Th2型细胞因子的表达水平;以及流式细胞术检测脾细胞亚群比例的变化。结果日本血吸虫感染7d后,IGTP-/-、IRG-47-/-和WT小鼠的耳廓病理变化无显著差异;但IRG-47-/-小鼠耳廓培养上清中IL-10水平显著低于IGTP-/-小鼠。SEA致敏小鼠3周后,IGTP-/-小鼠血清中SEA特异性IgG抗体水平显著低于WT小鼠;IRG-47-/-小鼠脾细胞在体外SEA刺激下,产生的IL-10水平显著高于IGTP-/-小鼠和WT小鼠;流式结果显示IRG-47-/-小鼠脾中Th2细胞比例显著低于WT小鼠。结论SEA是IRG-47缺失小鼠抵抗日本血吸虫、促使宿主产生保护性应答的重要调节因素,IL-10在此过程中是重要的免疫调节分子。
- 吴婧娇田芳高雅楠杜晓棠张美娟季旻珺吴观陵
- 关键词：日本血吸虫免疫调节IL-10基因敲除
- p47 GTPase缺失对小鼠巨噬细胞成熟及功能的影响
- 2009年
- 目的以日本血吸虫感染小鼠为模型,研究p47GTP酶家族成员IGTP及IRG-47缺失对巨噬细胞发育成熟及功能的影响。方法常规方法建立日本血吸虫感染小鼠模型,通过实时荧光定量PCR观察日本血吸虫不同感染时期igtp或irg47单一基因缺失的巨噬细胞igtp、lrg47和irg47的mRNA水平;流式细胞术检测巨噬细胞表面分子MHC-Ⅱ类(I-A)、CD16/32、CD40和CD80的表达;应用硝酸还原酶法检测感染急性期巨噬细胞产生炎症因子NO的能力。结果巨噬细胞igtp、irg47及lrg47基因在感染血吸虫后3周表达快速上调,感染后6周上调表达的幅度相差各异,IRG-47-/-小鼠igtp和lrg47转录明显上调。感染前和感染后3周IGTP-/-组的巨噬细胞表面CD16/32和CD40表达均较IRG-47-/-组和WT组高;感染后6周表达差异均无统计学意义(P>0.05)。在感染后6周,无有丝分裂原刺激情况下IGTP-/-组的巨噬细胞较IRG-47-/-组和WT组产生更高水平的NO;LPS刺激后,3组巨噬细胞产生的NO水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论IGTP及IRG-47缺失不影响巨噬细胞发育成熟,也不影响巨噬细胞产生炎症因子NO的潜能,提示p47GTP酶可能具有独特的、不依赖NO的作用方式。
- 杜晓棠陈雪松张美娟季旻珺吴观陵
- 关键词：GTP酶巨噬细胞小鼠
