张美娟
- 作品数：9 被引量：27H指数：2
- 供职机构：南京医科大学基础医学院病原生物学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 紫外线辐照致弱日本血吸虫尾蚴诱导C_(57)BL/6小鼠皮肤早期免疫应答动态变化的研究被引量：1
- 2006年
- 目的观察紫外线辐照致弱日本血吸虫尾蚴经耳廓免疫C57BL/6小鼠后,小鼠皮肤组织早期免疫应答的动态变化。方法98只小鼠测定双侧耳廓厚度后,14只作为0d组不感染/免疫,其余平均分为2组。一组经双侧耳廓分别感染正常尾蚴150条/耳,另一组经双侧耳廓分别免疫紫外线辐照致弱尾蚴150条/耳。感染/免疫后第1、2、4、7、14、21天分别剖杀2组小鼠各7只,测定耳廓厚度。取感染处的耳廓组织,左侧进行培养,收集上清检测相应细胞因子。右侧纵切为二,一半进行HE染色观察炎症反应;另一半应用免疫组化技术观察皮肤组织中IL-12和CD11c分子的表达。结果正常尾蚴感染的小鼠皮肤炎症反应在第7天达到高峰后逐渐下降,第21天基本恢复;而辐照尾蚴免疫小鼠耳廓皮肤在第14天炎症反应才达高峰,第21天反应仍然十分强烈。尾蚴穿皮后第4天,组织中有较高水平的CD11c及IL-12分子表达。皮片培养细胞因子定量检测也显示:与Th1细胞应答相关的IL-12、IFN-γ及Th2型因子IL-10早期在正常、辐照尾蚴差异无显著性。结论和正常尾蚴相比,辐照致弱尾蚴诱导的皮肤免疫应答持续时间长、强度高,但两者诱导Th细胞向不同方向极化并不发生于免疫应答启动阶段。
- 郭彩琴张美娟胡姝颖单昊张素华王荣芝倪忠耘季旻珺吴海玮吴观陵
- 关键词：日本血吸虫致弱尾蚴耳廓皮肤免疫应答
- 青蒿琥酯治疗小鼠日本血吸虫病的血清学研究被引量：2
- 2007年
- 目的观察青蒿琥酯对日本血吸虫感染小鼠的治疗作用及血清IgG的动态变化,探讨血清抗体与体外杀童虫效果的相关性。方法用日本血吸虫感染C57/BL6小鼠,在感染后8、15、22和29d分别一次性灌服300mg/kg青蒿琥酯,对照组小鼠灌服1%羧甲基纤维素钠。最后一次给药后7d剖杀小鼠,计算成虫数和虫卵数,以ELISA法检测小鼠血清中日本血吸虫特异性IgG抗体的水平,观察接受青蒿琥酯治疗的小鼠血清与巨噬细胞体外协同杀伤日本血吸虫童虫的效应。结果青蒿琥酯治疗组小鼠未检获成虫和虫卵;血清中日本血吸虫尾蚴抗原特异的IgG抗体水平在感染后21d达高峰,此后下降;成虫抗原特异的IgG抗体水平呈上升态势,二者与对照组比较差异均无显著性;青蒿琥酯治疗小鼠血清中虫卵抗原特异的IgG抗体呈低水平状态,显著低于对照组。青蒿琥酯治疗组小鼠血清和对照组小鼠血清均具有较强的体外杀童虫效果。结论青蒿琥酯对日本血吸虫感染的小鼠具有显著的治疗效果,其血清与巨噬细胞在体外具有协同杀伤童虫的作用。
- 陈雪松李宗吉张美娟季旻珺胡姝颖吴海玮吴观陵
- 关键词：血吸虫青蒿琥酯血清学
- 重组副肌球蛋白联合ISA206佐剂诱导抗日本血吸虫保护力
- 2009年
- 目的探讨重组的全长日本血吸虫副肌球蛋白(rSj97)的免疫保护作用以及作为疫苗的适用佐剂组合。方法重组副肌球蛋白分别与弗氏佐剂(rSj97-FA)、ISA206(rSj97-ISA206)、CpGODN(rSj97-CpGODN-IFA)联合免疫C57BL/6小鼠,在0、2、4周共进行3次免疫注射,剂量为每只每次25μgrSj97。第3次免疫后2周,经腹部贴片感染日本血吸虫尾蚴(40±2)条。第12周剖杀冲虫,计算减虫率与减卵率。同时,在0、2、6、8、12周对各组小鼠采血,检测血清中特异性IgG1与IgG2a抗体。结果相对于未免疫组,rSj97-FA组的减虫率为27.6%、减卵率为-2.3%,rSj97-ISA206组的减虫率为45.3%(P<0.01)、减卵率为35.4%(P<0.05),rSj97-CpGODN-IFA组的减虫率为7.3%、减卵率为6.4%,对照组(仅注射CpGODN)减虫率为13%、减卵率为3%。rSj97-FA、rSj97-ISA206与rSj97-CpGODN-IFA组在首次免疫后2周,rSj97特异性IgG1与IgG2a水平较免疫前显著升高(P<0.01),攻击感染后仍维持在同一水平;对照组与未免疫对照组,其特异性IgG1水平至感染后6周方显著升高(P<0.01),但仍为较低水平(A值<0.1),而IgG2a一直保持在基线水平,无显著变化。结论重组副肌球蛋白分别与3种佐剂联合使用均能诱导小鼠产生特异性IgG1和IgG2a,但仅ISA206佐剂组诱导C57BL/6小鼠产生显著的抗日本血吸虫保护力,rSj97-ISA206是潜在用于大动物免疫的疫苗组合。
- 孟睿杜晓棠储凯侯敏王荣芝王勇张美娟田芳张媛媛徐进梅季旻珺吴海玮
- 关键词：日本血吸虫佐剂小鼠保护力
- Ficoll密度梯度离心法分离猪外周血单个核细胞条件的探讨被引量：11
- 2007年
- 目的探讨猪外周血单个核细胞(PBMC)最佳分离条件,为寄生虫免疫学研究提供有效的方法。方法使用猪淋巴细胞分离液,在不同离心转速和时间条件下分离猪PBMC,观察所得云雾状PBMC层的厚度,计算细胞得率及细胞活力,以确定猪淋巴细胞分离液分离猪PBMC的最佳实验条件。同时采用文献报道的人淋巴细胞分离液分离猪PBMC的分离条件(1500r/min,30min)分离猪PBMC,比较两者分离PBMC效果。结果使用猪淋巴细胞分离液(密度1.110ng/L),在20～25℃室温下以1500r/min(半径15cm)离心30min,接着低温(4℃)1500r/min离心10min,洗涤2次,这样获得的猪PBMC效果最好。同样条件下,用人的淋巴细胞分离液分离猪PBMC,不仅所得细胞沉淀中混杂细胞如红细胞及其他细胞碎片较多,而且PBMC细胞得率及活力也不好。结论本实验提出了获得大量有活力的猪PBMC的方法和条件。
- 张素华林丹丹张美娟陈雪松徐进梅单昊吴观陵吴海玮
- 关键词：寄生虫学免疫学
- TLR2与TLR4对日本血吸虫感染转归影响的研究
- 虽经半个多世纪的不懈抗争,日本血吸虫病(schistosomiasis japonica)迄今仍然是我国主要公共卫生问题之一。近年来,采取的以传染源控制为主的综合防治策略,将重点置于对构成我国现有疫区主要传染源--牛的控...
- 张美娟
- 关键词：日本血吸虫基因芯片T细胞应答NK细胞CD8+T细胞
- 文献传递
- UV致弱日本血吸虫尾蚴诱导C57BL/6小鼠免疫保护作用的研究被引量：12
- 2006年
- 目的研究紫外线(UV)致弱日本血吸虫尾蚴诱导C57BL/6小鼠的免疫保护作用。方法分别观察不同UV强度(300、400和500μW/cm2照射的日本血吸虫尾蚴经腹部皮肤免疫)、不同免疫剂量(8、24和300条UV致弱尾蚴经腹部皮肤免疫)、不同免疫位点(300条UV致弱尾蚴经腹部和耳廓皮肤免疫)和不同免疫次数(100条UV致弱尾蚴经腹部皮肤免疫3次)诱导C57BL/6小鼠抗血吸虫攻击感染(40条正常尾蚴经腹部皮肤感染)的保护力。同时观察免疫后小鼠的体液免疫应答变化。结果300、400和500μW/cm2UV照射的日本血吸虫尾蚴免疫C57BL/6小鼠诱导产生的减虫率分别为2.72%、11.37%和10.38%;8、24和300条致弱尾蚴免疫小鼠诱导产生的减虫率分别为38.67%、7.54%和16.36%;300条致弱尾蚴经腹部和耳廓皮肤免疫诱导小鼠产生的减虫率分别为16.36%和16.14%;100条致弱尾蚴免疫3次,诱导小鼠产生减虫率为4.88%。对300条UV照射尾蚴免疫后小鼠的体液免疫应答动态观察显示,与感染对照组相比,免疫组血清中可溶性成虫抗原(SWA)和可溶性虫卵抗原(SEA)特异的IgG于免疫后2周开始升高,正常尾蚴抗原(SCA)特异的IgG于免疫1周后开始升高,SWA和SCA特异的IgG随免疫次数的增加而升高。结论UV致弱日本血吸虫尾蚴免疫C57BL/6小鼠能诱导其产生高水平的体液免疫应答,但保护力水平较低,提示C57BL/6小鼠为对UV致弱日本血吸虫尾蚴的低应答品系。
- 胡姝颖张美娟郭彩琴单昊张素华张媛媛侯敏季旻珺吴海玮吴观陵
- 关键词：血吸虫C57BL/6小鼠保护力体液免疫
- 浅谈临床护士与检验医学分析前质量管理
- ＜正＞检验医学分析前质量管理是实验室全面质量管理体,系中并非由检验人员完全至可以控制,且影响因素复杂,质量缺陷隐蔽,责任难以确定的一个最难而且也是最重要的管理阶段。其中涉及人员有临床医生、护士、标本运输人员及实验室标本接...
- 张美娟李红梅吴湘
- 文献传递
- p47 GTPase缺失对小鼠巨噬细胞成熟及功能的影响
- 2009年
- 目的以日本血吸虫感染小鼠为模型,研究p47GTP酶家族成员IGTP及IRG-47缺失对巨噬细胞发育成熟及功能的影响。方法常规方法建立日本血吸虫感染小鼠模型,通过实时荧光定量PCR观察日本血吸虫不同感染时期igtp或irg47单一基因缺失的巨噬细胞igtp、lrg47和irg47的mRNA水平;流式细胞术检测巨噬细胞表面分子MHC-Ⅱ类(I-A)、CD16/32、CD40和CD80的表达;应用硝酸还原酶法检测感染急性期巨噬细胞产生炎症因子NO的能力。结果巨噬细胞igtp、irg47及lrg47基因在感染血吸虫后3周表达快速上调,感染后6周上调表达的幅度相差各异,IRG-47-/-小鼠igtp和lrg47转录明显上调。感染前和感染后3周IGTP-/-组的巨噬细胞表面CD16/32和CD40表达均较IRG-47-/-组和WT组高;感染后6周表达差异均无统计学意义(P>0.05)。在感染后6周,无有丝分裂原刺激情况下IGTP-/-组的巨噬细胞较IRG-47-/-组和WT组产生更高水平的NO;LPS刺激后,3组巨噬细胞产生的NO水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论IGTP及IRG-47缺失不影响巨噬细胞发育成熟,也不影响巨噬细胞产生炎症因子NO的潜能,提示p47GTP酶可能具有独特的、不依赖NO的作用方式。
- 杜晓棠陈雪松张美娟季旻珺吴观陵
- 关键词：GTP酶巨噬细胞小鼠
- IL-10在感染日本血吸虫p47 GTP酶缺失小鼠中的免疫调节作用被引量：2
- 2010年
- 目的在日本血吸虫早期感染模型和SEA致敏模型中,研究IGTP和IRG-47缺失小鼠在抵抗日本血吸虫感染过程中IL-10的免疫调节作用。方法以IGTP基因敲除(IGTP-/-)小鼠、IRG-47基因敲除(IRG-47-/-)小鼠和野生型(WT)小鼠为研究对象,建立日本血吸虫早期感染模型和可溶性虫卵抗原(SEA)致敏模型。在早期感染模型中,以HE染色观察耳廓的病理变化,间接ELISA法检测耳廓皮片培养上清中Th1/Th2型细胞因子的表达水平;在SEA致敏模型中,以间接ELISA法检测血清中日本血吸虫特异性IgG抗体、脾单个核细胞培养上清中Th1/Th2型细胞因子的表达水平;以及流式细胞术检测脾细胞亚群比例的变化。结果日本血吸虫感染7d后,IGTP-/-、IRG-47-/-和WT小鼠的耳廓病理变化无显著差异;但IRG-47-/-小鼠耳廓培养上清中IL-10水平显著低于IGTP-/-小鼠。SEA致敏小鼠3周后,IGTP-/-小鼠血清中SEA特异性IgG抗体水平显著低于WT小鼠;IRG-47-/-小鼠脾细胞在体外SEA刺激下,产生的IL-10水平显著高于IGTP-/-小鼠和WT小鼠;流式结果显示IRG-47-/-小鼠脾中Th2细胞比例显著低于WT小鼠。结论SEA是IRG-47缺失小鼠抵抗日本血吸虫、促使宿主产生保护性应答的重要调节因素,IL-10在此过程中是重要的免疫调节分子。
- 吴婧娇田芳高雅楠杜晓棠张美娟季旻珺吴观陵
- 关键词：日本血吸虫免疫调节IL-10基因敲除
