杨乔欣
- 作品数：24 被引量：79H指数：6
- 供职机构：第四军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金军队医药卫生科研基金江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 汉坦病毒病毒吸附蛋白表位的研究被引量：1
- 2005年
- 目的 研究并确定汉坦病毒 (HTNV)病毒吸附蛋白 (VAP)相关表位的序列特征。方法 淘筛噬菌体肽库 ,将阳性克隆携带的外源肽与HTNV囊膜糖蛋白G2做同源性分析。应用IFA及ELISA法鉴定阳性噬菌体的特性。合成短肽 ,结合激光扫描共聚焦显微 (LSCM)技术观察该短肽与宿主细胞膜的结合情况。结果 保守性序列模式PX( 1 2 ) HX( 0 2 ) H与HTNVG2上96 YPWHTAKCHY1 0 5序列相似 ,合成的阳性短肽可以与病毒敏感细胞膜相结合。结论 保守基因序列PX( 1 2 ) HX( 0 2 ) H及与之对应的HTNVG2上96 YPWHTAKCHY1 0 5序列在病毒与宿主细胞结合中可能起作用 。
- 吕欣薛小平杨乔欣尹文雷迎峰张芳琳
- 关键词：表位汉坦病毒短肽VAP同源性分析共聚焦
- 单纯疱疹病毒囊膜糖蛋白模拟短肽的筛选
- 为了获得可替代单纯疱疹病毒(HSV)囊膜糖蛋白作为该病毒亚单位疫苗免疫原的小片段短肽,我们将一株有强动物保护活性的抗HSV糖蛋白C型共同性单克隆抗体
- 杨乔欣马文煜余颖任君萍黎志东
- 文献传递
- 检测抗人疱疹病毒6型IgG的间接免疫荧光试验的建立及其应用被引量：12
- 2003年
- 目的 :建立检测血清中人疱疹病毒 6型 (HHV 6 )IgG的间接免疫荧光试验 (IFA)。方法 :用HHV 6国内分离株感染人脐带血单个核细胞制备抗原片 ,建立检测HHV 6IgG的IFA方法 ,并用于育龄期妇女血清流行病学调查。结果 :建立的IFA具有特异性。对 116份育龄期妇女血清标本检测表明 ,HHV 6IgG的阳性率为 72 .4 % ,几何平均滴度 (GMT)为 1∶6 1;在孕妇和正常未孕妇女之间 ,以及不同孕期的孕妇之间 ,HHV 6IgG的阳性率和GMT均无差异 (P >0 .0 5 )。结论 :建立了具有特异性的IFA法 ,可用于对育龄妇女HHV
- 刘军连徐志凯王红英王德堂张芳琳杨乔欣姚堃
- 关键词：人疱疹病毒6型间接免疫荧光试验IGG抗体育龄期妇女血清流行病学调查
- 天然抗角蛋白自身抗体识别的角蛋白模拟表位的研究被引量：1
- 2002年
- 目的探索利用天然抗角蛋白自身抗体(AKautoAb)淘筛噬菌体递呈的随机肽库,获得在体内具有功能活性的角蛋白模拟表位方法。方法用角蛋白亲和层析柱从正常人混合血清中分离并纯化AKautoAb,然后进行生物素标记;用生物素化的AKautoAb对噬菌体递呈的随机15肽库进行3轮淘洗并进行ELISA检测;挑取23个阳性克隆进行DNA测序,分析所获数据并进行竞争实验。结果DNA测序分析表明,AKautoAb特异识别3个抗原表位区:SLSPMPTTNRR、PPLIPIPLRTM和TTPRPPMRIMLPRIT,其中SLSPMPTTNRR可能含有优势表位;携有这些短肽的噬菌体可与AKautoAb特异结合,角蛋白可阻断这种特异的结合反应。结论利用噬菌体随机肽库技术成功地获得了AKautoAb所识别的角蛋白模拟表位。
- 张亮刘玉峰李巍李承新张衍国杨乔欣任君萍黎志东
- 关键词：天然抗角蛋白自身抗体ELISA法
- 日本脑炎病毒糖蛋白模拟短肽的筛选和基因定位被引量：2
- 2001年
- 目的 寻找 JEV m Ab 2 F2识别的抗原表位 ,为 JEV小分子多肽疫苗合理设计提供依据 .方法 链亲和素包被塑料平皿 ,加入生物素标记 2 F2与噬菌体随机 15肽库 ,再洗脱 ,扩大培养进行三轮淘筛 ,经夹心 EL ISA、竞争 EL ISA鉴定后 ,挑取 10个阳性克隆 ,DNA测序 ,与 JEV E蛋白同源分析 .结果 筛选到的噬菌体能特异地与 2 F2结合 ,并且这种结合可被天然抗原所抑制 . 10个克隆的氨基酸序列相同 :-HTPQWSPSQYRPSL R- ,同源分析在 JEV E蛋白 2 2 4～ 2 2 9aa得到一个同源性较高的序列 :PXXSPS.结论 PXXSPS可能为 JEV E蛋白的一个模拟表位 .
- 任君萍马文煜杨乔欣肖毅丁天兵黎志东
- 关键词：日本脑炎病毒噬菌体肽库
- 噬菌体表达短肽模拟乙脑病毒糖蛋白的研究被引量：1
- 2002年
- 为研究日本脑炎病毒 (JEV )E蛋白模拟肽 ,将抗JEVE蛋白的mAb 2H4淘筛噬菌体 15肽库。经夹心ELISA、竞争ELISA鉴定后 ,随机挑取 10个阳性克隆 ,测序并与JEVE蛋白同源比较。将阳性噬菌体免疫小鼠 ,检测血清中特异性抗体。ELISA结果显示筛选到的噬菌体能特异地与mAb 2H4结合 ,并且这种结合可被JEV天然抗原所竞争抑制。 10个阳性克隆的氨基酸序列相同 :—RQDPQWPYANSTIAR— ,同源分析得到的序列STXAR可能为mAb 2H4识别的模拟表位。阳性噬菌体表达的 15肽能够刺激小鼠产生特异性抗体。该噬菌体表达短肽模拟JEVE蛋白的部分抗原性。
- 任君萍马文煜杨乔欣丁天兵黎志东
- 关键词：随机肽库表位日本脑炎病毒
- 我国首例与HIV感染者长期无保护性接触未引发感染的报告被引量：6
- 2001年
- 目的 通过某女 HIV感染的确认及其丈夫 HIV感染的排除 ,报告我国首例与 HIV感染者长期无保护性接触而未引发 HIV感染的案例 .方法 初筛实验用酶联免疫吸附(EL ISA)实验及明胶颗粒凝集 (PA )实验检测 HIV- 1抗体及HIV- 2抗体 ,确认实验用蛋白免疫印迹 (WB)实验检测 HIV- 1抗体及 HIV- 2抗体 .结果 某女 ,EL ISA实验结果 HIV- 1抗体阳性 ,HIV- 2抗体阴性 .复检结果相同 .PA实验结果 HIV-1阳性 .WB实验出现 HIV- 1特异性条带 gp160 ,gp12 0 ,p66,p5 5 ,gp41,p31,p2 4,p17,无 HIV- 2特异性条带出现 .结果为 HIV- 1抗体阳性 ,HIV- 2抗体阴性 .某男 ,EL ISA实验结果 :HIV- 1抗体及 HIV- 2抗体均为阴性 ,PA实验结果为阴性 .3mo及 6mo后复查 ,EL ISA,PA实验结果仍为阴性 .结论 某女为 HIV感染者 ,某男可排除 HIV感染的可能性 .某男与感染者长期无保护性接触未感染 HIV,也未因与感染者长期共同生活而感染 HIV.
- 黎志东徐志凯邢爱华杨乔欣任君萍张亮
- 关键词：HIV感染性交艾滋病
- 单纯疱疹病毒糖蛋白模拟位的研究被引量：10
- 2002年
- 目的为了充分认识单纯疱疹病毒(HSV)糖蛋白的抗原表位，寻找HSV多组分疫苗和新型基因工程疫苗更有效的小片段短肽作为该病毒疫苗的备选免疫原。方法利用有动物保护活性的抗HSV糖蛋白C（gC）单克隆抗体（McAb）1A12淘筛噬菌体随机12肽库，经4轮筛选后进行ELISA检测，随机挑取14个阳性克隆进行序列测定,序列比较后得到保守序列，做ELISA阻断实验进一步鉴定筛选结果并与相关天然蛋白HSV gC进行序列比较。结果获得保守序列-SG(L)RHII-和其侧翼辅助序列-AK-、-VW-，其与天然相关蛋白HSV gC 114～116位氨基酸十分相似。携有此短肽的噬菌体可以与McAb特异结合，并可部分阻断抗体与HSV囊膜抗原的反应。结论所筛选到的保守序列可模拟McAb针对的抗原表位，可能是HSV的替代抗原。这一研究方法有望使短肽替代庞大的糖蛋白全长氨基酸序列，为研制更有效及更广谱的基因工程疫苗提供依据，也使研制基于抗原表位水平的特异诊断试剂成为可能。
- 杨乔欣马文煜余颖
- 关键词：单纯疱疹病毒噬菌体随机肽库模拟位抗原表位
- TGF-βRⅡ/Fc融合蛋白的纯化及其生物学活性鉴定被引量：1
- 2003年
- 目的 :用重组Bac TRⅡ杆状病毒表达系统大量表达融合蛋白TGF βRⅡ /Fc,并对其进行纯化及鉴定 ;验证该融合蛋白是否能够阻断细胞因子TGF β1的生物学作用。 方法 :采用病毒空斑形成试验测定病毒滴度 ,并对其进行扩增。采用Pro teinG柱和快速蛋白质液相层析法 (FPLC)纯化目的蛋白。采用SDS PAGE分析纯化后的目的蛋白 ,并将蛋白电泳条带进行灰度扫描 ,计算目的蛋白的含量。采用Westernblot和夹心ELISA法 ,鉴定目的蛋白是否表达。采用MTT比色法 ,验证融合蛋白TGF βRⅡ /Fc能否阻断TGF β1对小鼠肺成纤维细胞 (L92 9)生长的作用。采用Westernblot技术 ,验证融合蛋白能否阻断TGF β1对L92 9细胞纤维黏连蛋白 (FN)生成的促进作用。结果 :本实验室构建并保存的重组Bac TRⅡ杆状病毒原液内病毒的滴度为 2× 10 12 pfu/L。蛋白电泳后灰度扫描结果表明 ,目的蛋白约占总蛋白的 10 %。夹心ELISA法和Westernblot分析证明目的蛋白已表达。融合蛋白TGF βRⅡ /Fc能够阻断TGF β1对L92 9细胞生长的抑制作用 ,以及对该细胞FN生成的促进作用。结论 :本室构建的重组Bac TRⅡ杆状病毒表达系统 ,能够表达融合蛋白TGF βRⅡ /Fc ,表达水平为 9mg/L。纯化得到的目的蛋白具有一定的生物学活性 ,可阻断TGF β1对L92 9细胞生长的?
- 李圣青李焕章杨乔欣倪殿涛
- 关键词：肺间质纤维化融合蛋白
- 从噬菌体15肽库中筛选乙脑病毒糖蛋白模拟肽被引量：2
- 2001年
- 目的用抗JEV E蛋白的mAb 2H4筛选噬菌体15肽库，以研究JEV E蛋白模拟肽。方法用生物素标记的mAb 2H4，对噬菌体随机15肽库进行3轮筛选。经ELISA鉴定后，随机挑取10个阳性噬菌体克隆测序，并与JEV E蛋白进行同源性比较。结果筛选到的噬菌体能与mAb 2H4特异地结合，并且这种结合可被天然JEV抗原所抑制。10个阳性噬菌体克隆的氨基酸序列相同，均为RQDPQWPYANSTIAR。同源分析表明，在JEV E蛋白不同区域有两个同源性较高的序列：STXAR和WXXAXST。阳性噬菌体展示肽也能与抗天然JEV抗原的鼠血清产生特异性反应。结论筛选的该噬菌体克隆展示肽可模拟JEV E 蛋白的部分抗原性。
- 任君萍马文煜杨乔欣丁天兵肖毅宋建华
- 关键词：噬菌体肽库表位日本脑炎病毒
