杨兵
- 作品数：5 被引量：0H指数：0
- 供职机构：重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 乙型肝炎病毒X蛋白稳定表达株的构建及沉默效果观察
- 目的构建稳定表达乙型肝炎病毒X蛋白(HBX)基因的HepG2HBX细胞株,观察小分子干扰RNA(siRNA)对HBX基因的特异性抑制效果。方法用脂质体将含有HBX序列的真核表达质粒pCDNA3.1(+)/HBX-Flag...
- 杨兵张莉萍文阳安黄世峰
- 文献传递
- preS1分子连接体转运siHBX抑制HepG2-HBX细胞株内HBX表达的实验研究
- 2011年
- 目的探讨应用preS1分子连接体作为siRNA转运载体对HepG2-HBX细胞株中稳定表达的乙型肝炎病毒X蛋白(HBX)的抑制效果及生物学效应。方法构建HepG2-HBX稳定表达细胞株;化学合成pres1分子连接体及HBX特异性siRNA序列(siHBX);pres1分子连接体分别与肝细胞系及siRNA进行结合能力试验,然后以preS1分子连接体作为转运载体转染siHBX入HepG2-HBX后经实时荧光RT-PCR及Western Blot检测siHBX对HBX基因的抑制效果。结果成功构建了稳定表达HBX基因的HepG2-HBX细胞株,preS1分子连接体能够与siRNA进行有效结合,同时可以携带siRNA进入肝细胞内高效抑制HepG2-HBX细胞株内HBX的表达。与空白组相比,阴性对照组抑制率为(11.94±6.3)%,而阳性对照组(脂质体)及实验组(preS1分子连接体)的抑制率分别为(85.24±2.6)%和(77.80±6.10)%,实验组与空白组及阴性对照组相比,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论 preS1分子连接体可作为一种新型siRNA转运载体,携带siHBX进入肝癌细胞内发挥RNA干扰机制,为乙型肝炎病毒相关性肝脏疾病的治疗提供了新的途径。
- 杨兵文阳安黄世峰周倩云张莉萍陈维贤
- 关键词：乙型肝炎病毒X蛋白
- 乙型肝炎病毒X蛋白稳定表达株的构建及沉默效果观察
- 2011年
- 目的构建稳定表达乙型肝炎病毒X蛋白(HBX)基因的HepG2-HBX细胞系,观察小分子干扰RNA(siRNA)对HBX基因的特异性抑制效果。方法用脂质体将含有HBX序列的真核表达质粒pCDNA3.1(+)/HBX-Flag转染入HepG2细胞系,通过G418筛选后,分别经RT-PCR和免疫组化对HBX的表达进行验证;化学合成靶向HBX的siRNA(即siHBX),转染入HBX稳定表达株,分别以RT-PCR和实时荧光定量RT-PCR检测HBX mRNA表达水平,Western blot检测HBX蛋白表达水平以验证siHBX对HBX基因的沉默效应,流式细胞仪检测细胞周期变化。结果成功构建表达HBX基因的HepG2-HBX细胞系;siHBX可以高效特异抑制HBX表达,并抑制细胞周期进展。结论 siHBX可作为一种靶向抑制肝癌细胞系内HBX表达的策略,为后续HBV感染相关性肝癌的治疗奠定了实验基础。
- 杨兵陈维贤文阳安黄世峰周倩云张莉萍
- 关键词：乙型肝炎病毒X蛋白肝癌小分子干扰RNA
- 乙型肝炎病毒X蛋白稳定表达株的构建及沉默效果观察
- 杨兵张莉萍文阳安黄世峰
- siRNA化学修饰及靶向转运策略的研究进展
- 2010年
- siRNA的化学修饰及靶向转运策略已广泛应用于肿瘤、病毒感染性疾病及代谢性疾病的临床治疗研究,并取得一定的进展。本文主要对siRNA的化学修饰、细胞穿透性多肽、靶向性配体及纳米颗粒等方面的研究进展作一综述。
- 杨兵陈维贤张莉萍
- 关键词：小干扰RNA化学修饰转运系统
